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比率熒光探針定量檢測生物樣品中的甲基乙二醛

發(fā)布時間:2021-01-12 09:04
  生物體內(nèi)存在過量的甲基乙二醛(MG)會引發(fā)一系列的疾病,其中糖尿病與MG的過量水平有著重要的關(guān)系,因此定量檢測生物體內(nèi)的MG濃度對糖尿病的研究具有重要意義。色譜分析方法包括HPLC,以及色譜-質(zhì)譜方法的聯(lián)用如LC-MS和GC-MS,均被用于檢測MG的水平,然而它們需要昂貴的儀器和運行成本,并且樣品制備往往需要長時間的衍生化處理。因此,開發(fā)一種簡單、高效的檢測方法具有重要意義。熒光探針具有優(yōu)異的選擇性、靈敏度和良好的生物成像功能被廣泛用于生物樣品的檢測,其中比率熒光法以兩個不同波長處熒光強(qiáng)度的比值作為響應(yīng)信號以確定目標(biāo)物濃度。由于不受環(huán)境影響因素的影響,其檢測的準(zhǔn)確性得到提高。本文使用比率熒光探針WHL45對生物樣本中的MG進(jìn)行特異性檢測,主要展開了以下三方面的研究工作:(1)比率熒光探針定量方法的構(gòu)建和動物血清中的MG濃度的檢測。本文利用比率熒光探針WHL45對MG特異性識別的特點,綜合考慮緩沖溶液中WHL45與MG反應(yīng)的動力學(xué)參數(shù),采用標(biāo)準(zhǔn)加入法確定MG的線性濃度范圍,從而構(gòu)建MG的定量檢測方法。以胎牛血清(FBS)樣品為實例,檢驗了該方法的可行性。(2)將WHL45應(yīng)用于生物樣品人... 

【文章來源】:華中師范大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

比率熒光探針定量檢測生物樣品中的甲基乙二醛


MG在生理系統(tǒng)中的形成門

異常代謝,生理系統(tǒng),惡性循環(huán)


頌士學(xué)位論文??MASTER'S?THESIS??衰竭和帕金森病的體內(nèi)模型中增加[9,13,14二2_24]。較高濃度的?^〇與糖尿病和??的線粒體功能障礙有關(guān)[16,25],也會導(dǎo)致心血管疾。郏玻叮,氧化應(yīng)激[5],血脂異??細(xì)胞脫落和失巢凋亡[13],細(xì)胞凋亡[28】和DNA鏈斷裂頻率增加[18]。99%的MG??1代謝消耗,從而保護(hù)蛋白質(zhì)組和基因組。GLOl沉默會導(dǎo)致MG,?MG-H1??dG濃度的增加,導(dǎo)致早產(chǎn)和衰老[29],動脈粥樣硬化郵,3U,高血壓[29],慢性??病,胰島素抵抗[3G]和炎癥[32]。2012年國際牙科聯(lián)合會表示:“糖尿病和心血??現(xiàn)在是全球疾病負(fù)擔(dān)和死亡的主要原因[33]”。因此MG的研宄對于人類健康,??疾病治療具有重要意義。對細(xì)胞,組織和體液中MG濃度測量的需求也日益??

熒光探針


熒光檢測法以簡單,快速的響應(yīng),和對活細(xì)胞中動態(tài)生物過程的實時和原位監(jiān)??測的能力,被廣泛用于復(fù)雜的生物樣品分析中[6&72]。熒光檢測法的核心即熒光探針。??熒光探針一般由三部分構(gòu)成如圖1.4所示:(1)熒光基團(tuán):即發(fā)射熒光的源頭也稱??突光供體、熒光團(tuán),決定探針識別的靈敏度;(2)識別基團(tuán):即識別目標(biāo)分析物的??基團(tuán),也稱熒光受體,決定探針的選擇性和特異性,識別基團(tuán)與目標(biāo)敏感物發(fā)生相??互作用,致使受體分子化學(xué)性質(zhì)發(fā)生變化,從而引起熒光團(tuán)的熒光信號的増強(qiáng),猝??滅或位移的改變;(3)連接基團(tuán):連接熒光基團(tuán)和識別基團(tuán)的部分,起到分子識別??樞紐的作用[73】。??麵PE???圖1.4熒光探針的結(jié)構(gòu)。??熒光探針主要發(fā)光機(jī)理有三種:第一種分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移(ITC),通過改變熒光??團(tuán)上的電子云密度導(dǎo)致探針最大發(fā)射波長發(fā)生改變;第二種熒光共振能量轉(zhuǎn)移??(FRET),這類型的探針一般是兩個熒光團(tuán),產(chǎn)生共振能量遷移而自猝滅['第三??種光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移過程(PET),是指在光照射激發(fā)下,識別基團(tuán)和熒光團(tuán)之間發(fā)??7??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]比率熒光探針的構(gòu)建及應(yīng)用[J]. 張勵國,王志利,姚凱,安彥召,徐守芳.  廣東化工. 2016(18)
[2]標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量檢測的不確定度來源分析[J]. 伊魁宇,王猛.  廣州化工. 2012(09)
[3]電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定釹鐵硼中鋁、鈷、銅、鎵、鋯、鋱、鈦、鈮[J]. 張立鋒,張翼明,周凱紅.  冶金分析. 2011(03)
[4]加標(biāo)回收實驗方案探討[J]. 伍云卿,涂杰峰,范超,陳衛(wèi)偉.  福建分析測試. 2010(03)
[5]乙腈沉淀法去除人血清中高豐度蛋白的探索性研究[J]. 覃健,胡天橋,張志勇,何敏,韋霄,蔣智華.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2010(05)
[6]兩種去除血清高豐度蛋白方法的比較[J]. 覃健,張志勇,何敏,胡天橋.  預(yù)防醫(yī)學(xué)情報雜志. 2010(04)
[7]加標(biāo)回收實驗的實施及回收率計算的研究[J]. 任成忠,毛麗芬.  工業(yè)安全與環(huán)保. 2006(02)
[8]基于激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移的新一代熒光探針[J]. 呂鳳婷,高莉?qū)?房喻.  化學(xué)進(jìn)展. 2005(05)
[9]測量誤差及其處理方法[J]. 劉素花.  上海計量測試. 2004(02)

博士論文
[1]比率熒光傳感器的設(shè)計及其對環(huán)境污染物小分子的可視化檢測[D]. 閆葉寒.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]比率型甲基乙二醛熒光探針的設(shè)計合成與細(xì)胞成像[D]. 汪會玲.華中師范大學(xué) 2018
[2]低成本、自動化血檢系統(tǒng)的搭建與研究[D]. 謝登玲.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2017
[3]甲基乙二醛在圍產(chǎn)期奶牛酮病群體監(jiān)測中的作用[D]. 李超.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]薄膜太陽能電池CuInxGa1-xSe2中銅、鎵、銦、硒的電感耦合等離子體光譜測量[D]. 張菲菲.吉林大學(xué) 2017
[5]吖啶橙熒光染色法檢測腎癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其臨床意義[D]. 劉敏.天津醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號:2972561

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