比率熒光探針定量檢測生物樣品中的甲基乙二醛
發(fā)布時間:2021-01-12 09:04
生物體內(nèi)存在過量的甲基乙二醛(MG)會引發(fā)一系列的疾病,其中糖尿病與MG的過量水平有著重要的關系,因此定量檢測生物體內(nèi)的MG濃度對糖尿病的研究具有重要意義。色譜分析方法包括HPLC,以及色譜-質譜方法的聯(lián)用如LC-MS和GC-MS,均被用于檢測MG的水平,然而它們需要昂貴的儀器和運行成本,并且樣品制備往往需要長時間的衍生化處理。因此,開發(fā)一種簡單、高效的檢測方法具有重要意義。熒光探針具有優(yōu)異的選擇性、靈敏度和良好的生物成像功能被廣泛用于生物樣品的檢測,其中比率熒光法以兩個不同波長處熒光強度的比值作為響應信號以確定目標物濃度。由于不受環(huán)境影響因素的影響,其檢測的準確性得到提高。本文使用比率熒光探針WHL45對生物樣本中的MG進行特異性檢測,主要展開了以下三方面的研究工作:(1)比率熒光探針定量方法的構建和動物血清中的MG濃度的檢測。本文利用比率熒光探針WHL45對MG特異性識別的特點,綜合考慮緩沖溶液中WHL45與MG反應的動力學參數(shù),采用標準加入法確定MG的線性濃度范圍,從而構建MG的定量檢測方法。以胎牛血清(FBS)樣品為實例,檢驗了該方法的可行性。(2)將WHL45應用于生物樣品人...
【文章來源】:華中師范大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
MG在生理系統(tǒng)中的形成門
頌士學位論文??MASTER'S?THESIS??衰竭和帕金森病的體內(nèi)模型中增加[9,13,14二2_24]。較高濃度的?^〇與糖尿病和??的線粒體功能障礙有關[16,25],也會導致心血管疾。郏玻叮荩趸瘧ぃ郏担,血脂異??細胞脫落和失巢凋亡[13],細胞凋亡[28】和DNA鏈斷裂頻率增加[18]。99%的MG??1代謝消耗,從而保護蛋白質組和基因組。GLOl沉默會導致MG,?MG-H1??dG濃度的增加,導致早產(chǎn)和衰老[29],動脈粥樣硬化郵,3U,高血壓[29],慢性??病,胰島素抵抗[3G]和炎癥[32]。2012年國際牙科聯(lián)合會表示:“糖尿病和心血??現(xiàn)在是全球疾病負擔和死亡的主要原因[33]”。因此MG的研宄對于人類健康,??疾病治療具有重要意義。對細胞,組織和體液中MG濃度測量的需求也日益??
熒光檢測法以簡單,快速的響應,和對活細胞中動態(tài)生物過程的實時和原位監(jiān)??測的能力,被廣泛用于復雜的生物樣品分析中[6&72]。熒光檢測法的核心即熒光探針。??熒光探針一般由三部分構成如圖1.4所示:(1)熒光基團:即發(fā)射熒光的源頭也稱??突光供體、熒光團,決定探針識別的靈敏度;(2)識別基團:即識別目標分析物的??基團,也稱熒光受體,決定探針的選擇性和特異性,識別基團與目標敏感物發(fā)生相??互作用,致使受體分子化學性質發(fā)生變化,從而引起熒光團的熒光信號的増強,猝??滅或位移的改變;(3)連接基團:連接熒光基團和識別基團的部分,起到分子識別??樞紐的作用[73】。??麵PE???圖1.4熒光探針的結構。??熒光探針主要發(fā)光機理有三種:第一種分子內(nèi)電荷轉移(ITC),通過改變熒光??團上的電子云密度導致探針最大發(fā)射波長發(fā)生改變;第二種熒光共振能量轉移??(FRET),這類型的探針一般是兩個熒光團,產(chǎn)生共振能量遷移而自猝滅['第三??種光誘導電子轉移過程(PET),是指在光照射激發(fā)下,識別基團和熒光團之間發(fā)??7??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]比率熒光探針的構建及應用[J]. 張勵國,王志利,姚凱,安彥召,徐守芳. 廣東化工. 2016(18)
[2]標準曲線法進行定量檢測的不確定度來源分析[J]. 伊魁宇,王猛. 廣州化工. 2012(09)
[3]電感耦合等離子體質譜法測定釹鐵硼中鋁、鈷、銅、鎵、鋯、鋱、鈦、鈮[J]. 張立鋒,張翼明,周凱紅. 冶金分析. 2011(03)
[4]加標回收實驗方案探討[J]. 伍云卿,涂杰峰,范超,陳衛(wèi)偉. 福建分析測試. 2010(03)
[5]乙腈沉淀法去除人血清中高豐度蛋白的探索性研究[J]. 覃健,胡天橋,張志勇,何敏,韋霄,蔣智華. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2010(05)
[6]兩種去除血清高豐度蛋白方法的比較[J]. 覃健,張志勇,何敏,胡天橋. 預防醫(yī)學情報雜志. 2010(04)
[7]加標回收實驗的實施及回收率計算的研究[J]. 任成忠,毛麗芬. 工業(yè)安全與環(huán)保. 2006(02)
[8]基于激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質子轉移的新一代熒光探針[J]. 呂鳳婷,高莉寧,房喻. 化學進展. 2005(05)
[9]測量誤差及其處理方法[J]. 劉素花. 上海計量測試. 2004(02)
博士論文
[1]比率熒光傳感器的設計及其對環(huán)境污染物小分子的可視化檢測[D]. 閆葉寒.中國科學技術大學 2017
碩士論文
[1]比率型甲基乙二醛熒光探針的設計合成與細胞成像[D]. 汪會玲.華中師范大學 2018
[2]低成本、自動化血檢系統(tǒng)的搭建與研究[D]. 謝登玲.中國科學技術大學 2017
[3]甲基乙二醛在圍產(chǎn)期奶牛酮病群體監(jiān)測中的作用[D]. 李超.西北農(nóng)林科技大學 2017
[4]薄膜太陽能電池CuInxGa1-xSe2中銅、鎵、銦、硒的電感耦合等離子體光譜測量[D]. 張菲菲.吉林大學 2017
[5]吖啶橙熒光染色法檢測腎癌循環(huán)腫瘤細胞及其臨床意義[D]. 劉敏.天津醫(yī)科大學 2015
本文編號:2972561
【文章來源】:華中師范大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
MG在生理系統(tǒng)中的形成門
頌士學位論文??MASTER'S?THESIS??衰竭和帕金森病的體內(nèi)模型中增加[9,13,14二2_24]。較高濃度的?^〇與糖尿病和??的線粒體功能障礙有關[16,25],也會導致心血管疾。郏玻叮荩趸瘧ぃ郏担,血脂異??細胞脫落和失巢凋亡[13],細胞凋亡[28】和DNA鏈斷裂頻率增加[18]。99%的MG??1代謝消耗,從而保護蛋白質組和基因組。GLOl沉默會導致MG,?MG-H1??dG濃度的增加,導致早產(chǎn)和衰老[29],動脈粥樣硬化郵,3U,高血壓[29],慢性??病,胰島素抵抗[3G]和炎癥[32]。2012年國際牙科聯(lián)合會表示:“糖尿病和心血??現(xiàn)在是全球疾病負擔和死亡的主要原因[33]”。因此MG的研宄對于人類健康,??疾病治療具有重要意義。對細胞,組織和體液中MG濃度測量的需求也日益??
熒光檢測法以簡單,快速的響應,和對活細胞中動態(tài)生物過程的實時和原位監(jiān)??測的能力,被廣泛用于復雜的生物樣品分析中[6&72]。熒光檢測法的核心即熒光探針。??熒光探針一般由三部分構成如圖1.4所示:(1)熒光基團:即發(fā)射熒光的源頭也稱??突光供體、熒光團,決定探針識別的靈敏度;(2)識別基團:即識別目標分析物的??基團,也稱熒光受體,決定探針的選擇性和特異性,識別基團與目標敏感物發(fā)生相??互作用,致使受體分子化學性質發(fā)生變化,從而引起熒光團的熒光信號的増強,猝??滅或位移的改變;(3)連接基團:連接熒光基團和識別基團的部分,起到分子識別??樞紐的作用[73】。??麵PE???圖1.4熒光探針的結構。??熒光探針主要發(fā)光機理有三種:第一種分子內(nèi)電荷轉移(ITC),通過改變熒光??團上的電子云密度導致探針最大發(fā)射波長發(fā)生改變;第二種熒光共振能量轉移??(FRET),這類型的探針一般是兩個熒光團,產(chǎn)生共振能量遷移而自猝滅['第三??種光誘導電子轉移過程(PET),是指在光照射激發(fā)下,識別基團和熒光團之間發(fā)??7??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]比率熒光探針的構建及應用[J]. 張勵國,王志利,姚凱,安彥召,徐守芳. 廣東化工. 2016(18)
[2]標準曲線法進行定量檢測的不確定度來源分析[J]. 伊魁宇,王猛. 廣州化工. 2012(09)
[3]電感耦合等離子體質譜法測定釹鐵硼中鋁、鈷、銅、鎵、鋯、鋱、鈦、鈮[J]. 張立鋒,張翼明,周凱紅. 冶金分析. 2011(03)
[4]加標回收實驗方案探討[J]. 伍云卿,涂杰峰,范超,陳衛(wèi)偉. 福建分析測試. 2010(03)
[5]乙腈沉淀法去除人血清中高豐度蛋白的探索性研究[J]. 覃健,胡天橋,張志勇,何敏,韋霄,蔣智華. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2010(05)
[6]兩種去除血清高豐度蛋白方法的比較[J]. 覃健,張志勇,何敏,胡天橋. 預防醫(yī)學情報雜志. 2010(04)
[7]加標回收實驗的實施及回收率計算的研究[J]. 任成忠,毛麗芬. 工業(yè)安全與環(huán)保. 2006(02)
[8]基于激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質子轉移的新一代熒光探針[J]. 呂鳳婷,高莉寧,房喻. 化學進展. 2005(05)
[9]測量誤差及其處理方法[J]. 劉素花. 上海計量測試. 2004(02)
博士論文
[1]比率熒光傳感器的設計及其對環(huán)境污染物小分子的可視化檢測[D]. 閆葉寒.中國科學技術大學 2017
碩士論文
[1]比率型甲基乙二醛熒光探針的設計合成與細胞成像[D]. 汪會玲.華中師范大學 2018
[2]低成本、自動化血檢系統(tǒng)的搭建與研究[D]. 謝登玲.中國科學技術大學 2017
[3]甲基乙二醛在圍產(chǎn)期奶牛酮病群體監(jiān)測中的作用[D]. 李超.西北農(nóng)林科技大學 2017
[4]薄膜太陽能電池CuInxGa1-xSe2中銅、鎵、銦、硒的電感耦合等離子體光譜測量[D]. 張菲菲.吉林大學 2017
[5]吖啶橙熒光染色法檢測腎癌循環(huán)腫瘤細胞及其臨床意義[D]. 劉敏.天津醫(yī)科大學 2015
本文編號:2972561
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