ATP合成酶是一種膜結合的多亞基復合物,是生物體合成能量所必需的。它通過跨膜質子動力勢驅動的旋轉機制合成ATP，在細胞生理和代謝中起重要作用。完整的ATP合成酶由兩個主要的亞復合物組成,即膜嵌入的Fo組分和水溶性F1組分。Fo亞復合物由三個亞基（a1,b2和C10-15）組成,具有質子通道的功能。F1亞復合物由5個亞基α3β3γ1δ1ε1組成,在α和β亞基的界面處含有3個催化位點。在大多數(shù)細菌中,ATP合成酶操縱子含有9個開放閱讀框（open reading frame,ORF）,包括8個結構基因（atpBEFHAGDC）和1個位于結構基因之前的atpI基因。AtpI，也稱為UncI,是一種疏水膜蛋白,它在ATP合成酶的組裝過程中輔助c亞基組裝成c環(huán)。谷氨酸棒桿菌是一種重要的氨基酸生產(chǎn)菌種,與其他細菌一樣,其ATP合成酶操縱子含有8個結構基因,在結構基因上游還有兩個功能未知基因（cg1360和cg1361）。目前對谷氨酸棒桿菌ATP合成酶的研究主要集中于整個atpBEFHAGDC簇,對Cg1360和Cg1361的生理功能尚無研究報道。在本研究中,我們通過對Cg1360,Cg1361和其... 

【文章來源】：中國科學技術大學安徽省 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１細菌ＡＴＰ合成酶結構示意圖（Ｈｉｃｋｓ?ｅｔ?ａｌ．?２０１０）??ＡＴＰ合成酶的催化反應如（ｉ）所示

１．２．２．２?ＡＴＰ合成酶的組裝??ＡＴＰ合成酶的組裝是一個模塊化的過程，包括ａ３ｐ３，?ｙｅ－中央莖，ｃ－環(huán)等幾??個中間體的形成和輔助因子的干預（圖１．２）。目前在真核生物中已發(fā)現(xiàn)多種調??控ＡＴＰ合成酶組裝的輔助因子，但在原核生物中發(fā)現(xiàn)的輔助因子還較少。酵??母ＡＴＰ合成酶可溶性Ｆ１亞復合體中的ａ３ｐ３的組裝需要輔助因子Ａｔｐｌｌｐ和??Ａｔｐｌ２ｐ?的調控（Ａｃｋｅｒｍａｎ?２００２；?Ａｃｋｅｒｍａｎ?ａｎｄ?Ｔｚａｇｏｌｏｆｆ?１９９０），其他分子伴侶??Ｆｍｃｌｐ和Ｈｓｐ９０在熱應徼條件下也參與Ｆ１亞復合體組裝（Ｆｒａｎｃｉｓ?ａｎｄ?Ｔｈｏｒｓｎｅｓｓ??２０１１；?Ｌｅｆｅｂｖｒｅ－Ｌｅｇｅｎｄｒｅ?ｅｔ?ａＬ?２００１）。在細菌中未找到線粒體ＡＴＰ合成酶組裝??的輔助因子Ａｔｐｌｌｐ的同源物，僅在變形菌中鑒定出Ａｔｐｌ２ｐ的同源物（Ｐｉｃｋｏｖａｅｔ??ａｌ．?２００５）。事實上，細菌Ｆ１亞復合體可以從純化的Ｆ１成分中重構（Ｓｔｅｍｗｅｉｓ??１９７８；?Ｓｔｅｍｗｅｉｓ?ａｎｄ?Ｓｍｉｔｈ?１９７７）〇??膜包埋的Ｆｏ亞復合體由ａｂ２ＣｌＣＭ５組成。ｃ亞基單體具有兩個跨膜螺旋區(qū)，??能夠折疊成發(fā)卡結構，位于其Ｃ端的保守氨基酸殘基為Ｈ＋或Ｎａ＋離子結合位點??（ＦｉｌｌｉｎｇａｍｅａｎｄＳｔｅｅｄ２０１４）。研宄發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母中的Ａｔｐ２５ｐ蛋白翻譯后分裂??４??

大腸桿菌中表達雜合ＦｌＦｏ，發(fā)現(xiàn)來自／＞〇／７／〇；７／如〃／＿?的Ａｔｐｌ對于完??整的他＋－轉運八��？合成酶的產(chǎn)生是必不可少的（８１＾１＾６１３丨．２００７）（圖１．３）。??當Ａｔｐｌ不存在時，ｃ亞基作為單體存在而不能形成ｃ－環(huán)；然而，如果Ａｔｐｌ同時??從另一個質粒表達，則產(chǎn)生具有ｃ－環(huán)的ＦｌＦｏ復合物（Ｓｕｚｕｋｉ?ｅｔａｌ．?２００７）。Ｈｉｓ－ｔａｇ??標記的尺Ａｔｐｌ與ｃ■亞基單體或ｃ－環(huán)均發(fā)生交聯(lián)反應（Ｏｚａｋｉ?ｅｔ?ａｌ．??２００８）。同樣，在大腸桿菌中異源表達ｄｃｅｔｏｋｃ／ｅｒ／ｗｗ?ＦＩＦｏ－ＡＴＰ合成酶??需要」．醫(yī)＜９＾／／／?Ａｔｐｌ的存在（Ｂｒａｎｄｔ?ｅｔ?ａｌ．?２０１３）。此外，尺ｃ－亞基在體??外寡聚化成ｃ－環(huán)是由Ａｔｐｌ介導的（Ｏｚａｋｉ?ｅｔ?ａｌ．?２００８），表明Ａｔｐｌ輔助ｃ－環(huán)的組??裝。??Ｕｎｃｉ?Ｕｎｃｉ??ｃ，?＾?ｌ＊ｃ，?ｌ－ｃ＇，，?Ｎａ＋?＾?ｃ，，??＿｜二＿｜？冰?＿ｌ＾ｌ＿??Ｉ?Ｏｔｈｅｒ?Ｏｔｈｅｒ?Ｉ??Ｘｓｕｂｕｎｉｔｓ?ｓｕｂｕｎｉｔｓ?▼??▼?ＡＴＰ??＊?ｆ：??Ｉｍｉ?ｉ嚿


本文編號：2970410