微囊藻毒素（microcystin,MCs）是一類毒性強(qiáng)的環(huán)七肽毒素,其會(huì)對(duì)養(yǎng)殖水環(huán)境造成嚴(yán)重危害。Keap1-Nrf2信號(hào)通路是保護(hù)細(xì)胞免受各種環(huán)境毒物的損傷的主要途徑,Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1（Keap1）是Cul3依賴性泛素連接酶復(fù)合物的BTB-Kelch型底物銜接蛋白,Keap1靶向促進(jìn)核轉(zhuǎn)錄因子紅細(xì)胞系相關(guān)因子-2（Nrf2）的泛素化降解。在氧化應(yīng)激下,Keap1-Nrf2信號(hào)通路會(huì)調(diào)控下游Ⅱ相解毒/抗氧化酶對(duì)細(xì)胞起保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)對(duì)褶紋冠蚌Keap1進(jìn)行鑒定與功能的分析以及對(duì)Nrf2-Keap1信號(hào)通路在微囊藻毒素作用下轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究,這將有助于了解貝類的氧化應(yīng)激調(diào)控機(jī)制。1.從構(gòu)建的褶紋冠蚌血細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組文庫(kù)中篩選出兩種類型的Keap1（Keap1a和Keap1b）基因片段,設(shè)計(jì)特異引物和使用RACE PCR技術(shù)成功的克隆出了CpKeap1a和CpKeap1b基因的cDNA序列全長(zhǎng)。CpKeap1a基因cDNA序列全長(zhǎng)2952 bp,其中5’非編碼區(qū)有351 bp,3’非編碼區(qū)有762 bp,開(kāi)放閱讀框長(zhǎng)度為1839 bp,共編碼612個(gè)氨基酸,該蛋白含一個(gè)pol... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Keap1半胱氨酸殘基響應(yīng)多種藥物的示意圖

圖 1.3 Keap1-Nrf2 信號(hào)通路的活化機(jī)制[11]Fig. 1.3 Activation mechanism of Keap1-Nrf2 signaling pathway[11]3 Keap1-Nrf2 信號(hào)通路的抗氧化應(yīng)激作用Nrf2 是一種基本的亮氨酸拉鏈（bZIP）蛋白，已被確定為參與保護(hù)細(xì)胞免化和親電損傷的關(guān)鍵因子[51]，它的許多靶基因在維持細(xì)胞抗氧化反應(yīng)和異質(zhì)代謝方面很重要。例如過(guò)氧化氫酶（catalase, CAT），銅鋅超氧化物歧化Cu/Zn-superoxide dismutase, Cu/ZnSOD），主要負(fù)責(zé)消除源自內(nèi)源和外源的[52]，因此，其在生物體內(nèi)對(duì)消除 ROS 有著非常重要的作用[53, 54]；谷胱甘肽移酶（glutathione S-transferases, GSTs）可催化谷胱甘肽與毒性化合物的結(jié)產(chǎn)生更容易被排泄的水溶性和生物活性較低的產(chǎn)物[55]；谷胱甘肽過(guò)氧化物glutathione peroxidases, GPx）是主要的抗氧化酶，可清除過(guò)氧化氫或有機(jī)氫化物，從而保護(hù)生物膜和細(xì)胞成分免受氧化應(yīng)激[56]；硫氧還蛋白（thioredoxin

總RNA檢測(cè)Fig.2.1TotalRNAdetection

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]家蠅Keap1和Nrf2基因的克隆、表達(dá)及功能分析[D]. 于雪.河北大學(xué) 2015



本文編號(hào)：2954618