【摘要】：核桃內(nèi)生真菌具有豐富的生物多樣性,為了更好地利用這種微生物資源,本研究在核桃內(nèi)生真菌活性菌株篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化、代謝產(chǎn)物分離純化,以及抑菌機(jī)理等方面進(jìn)行研究,主要結(jié)果如下:(1)采用生長(zhǎng)速率法,以6種常見植物病原菌為指示菌,對(duì)16株核桃內(nèi)生真菌進(jìn)行活性篩選。結(jié)果表明,1株來(lái)源于良種核桃樹根部的內(nèi)生真菌G3,其發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)6種病原菌均表現(xiàn)出一定的抑菌活性。其中對(duì)蘋果腐爛病原菌抑制率達(dá)到100%,完全抑制了病原菌菌絲生長(zhǎng);對(duì)水稻紋枯、核桃炭疽病原菌抑制率均大于75%。通過(guò)形態(tài)學(xué)特征觀察結(jié)合分子生物學(xué)鑒定,G3確定為彎角鐮刀菌Fusarium camptoceras。(2)以接種量、發(fā)酵溫度和發(fā)酵天數(shù)為影響因子,以G3發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)蘋果腐爛病原菌的抑制率為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過(guò)單因素試驗(yàn)、正交試驗(yàn)對(duì)核桃內(nèi)生真菌G3的發(fā)酵工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,G3發(fā)酵的最優(yōu)工藝為:接種量10%,發(fā)酵溫度28℃,發(fā)酵時(shí)間30 d;此工藝條件下,G3發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)蘋果腐爛病原菌抑制率為85.17%。影響因子對(duì)抑制率的影響依次為:發(fā)酵溫度發(fā)酵天數(shù)接種量。(3)采用液液分配方法,對(duì)核桃內(nèi)生真菌G3固體發(fā)酵產(chǎn)物的乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分別進(jìn)行萃取。結(jié)果表明,正丁醇相和乙酸乙酯相對(duì)蘋果腐爛病原菌抑制的IC_(50)值分別為3.3 mg/mL和4.3 mg/mL;結(jié)合各萃取相質(zhì)量及其對(duì)蘋果腐爛病原菌抑制效果綜合考慮,選擇正丁醇相和乙酸乙酯相作為深入研究的活性萃取相。(4)通過(guò)對(duì)各萃取相化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn),結(jié)果顯示,正丁醇相主要含有有機(jī)酸類物質(zhì),乙酸乙酯相主要為酚類物質(zhì),推測(cè)G3發(fā)酵產(chǎn)物活性物質(zhì)可能為有機(jī)酸與酚類物質(zhì)。對(duì)乙酸乙酯萃取相進(jìn)行柱色譜分離獲得高活性組分Fry2-2,供試濃度為1 mg/mL時(shí),對(duì)蘋果腐爛病原菌抑制率達(dá)到89.36%;GC-MS分析共檢測(cè)到15種化合物,主要為胺類、脂類、酚類與烷烴類。對(duì)Fry2-2進(jìn)一步分離,在Fry2-2-2組分中析出化合物A,經(jīng)過(guò)重結(jié)晶純化和核磁共振等檢測(cè),化合物A鑒定為:2,2'-亞甲基雙[6-(1,1-二甲基乙基)]-4-甲基-苯酚,抑制蘋果腐爛病原菌的IC_(50)值為0.11 mg/mL。(5)在體外和體內(nèi)條件下,對(duì)G3高活性組分抑制蘋果腐爛病的機(jī)理進(jìn)行研究。結(jié)果表明:高活性組分處理下,病原菌菌絲出現(xiàn)破損、撕裂,或者頂端形成紡錘形,使其生長(zhǎng)異常,菌絲量減少;病原菌菌液的電導(dǎo)率增加、麥角甾醇含量降低、幾丁質(zhì)酶活性增加;感病蘋果的體內(nèi)防御酶SOD、PPO、POD活性均明顯升高,高活性組分與5 mmol/L水楊酸兩者處理效果相近,防御酶活性都呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),并能夠明顯抑制蘋果腐爛病斑的擴(kuò)展,最大抑制率為77.61%。
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS201.3;TS255.6
【圖文】：

云貴等地區(qū)（王偉等, 2007），除了黑龍江和南方沿海一些核桃分布（朱俊玲等, 2003; 陸俊等, 2014; 王豐俊和王建中韌，紋理美觀，適宜制造高檔用具，甚至在軍事領(lǐng)域也有）。核桃被認(rèn)為是生態(tài)先鋒樹種和生物質(zhì)能源戰(zhàn)略樹種，在能力，在山丘、坡麓、梯田、堰邊栽植有涵養(yǎng)水源、保持經(jīng)濟(jì)、生態(tài)和社會(huì)效益，因此引起了社會(huì)各界的廣泛重視。植總面積已突破 200 萬(wàn)公頃，年堅(jiān)果總產(chǎn)量超過(guò) 50 萬(wàn)噸，益。植物的化學(xué)成分研究物主要含有萘醌及其苷類、黃酮及其苷類、二芳基庚烷類類（naphthoquinones）1）、氫化胡桃醌及其苷是核桃青皮中的主要萘醌類物質(zhì)，質(zhì)，為橙色針狀結(jié)晶，具有顯著的殺蟲、抑菌和抗癌等生止血、抑菌及治療濕疹、牛皮癬等（閆克玉等, 1994）。

分別為大黃酚、大黃素甲醚、4'，8-二羥基-1-四氫萘酮。林君陽(yáng)（果皮中分離得到1個(gè)萘醌類化合物，為5-羥基-2-甲氧基-1,4-萘醌。楊霞青皮中測(cè)定出胡桃醌含量為 0.84 mg/g，對(duì)馬尾松潰瘍病菌和核桃枝顯，EC50分別為 102.751 mg/L、112.808 mg/L。Li 等（2008）和從胡桃科植物中分離到 5,8-二羥基-1,4 萘醌、α-萘和 5-羥基-3,3'-雙衍生物。酮類（flavonoids）類化合物分布廣泛于植物界，多以游離態(tài)或糖苷形式存在，主要有、抗氧化、抗菌及抗病毒等活性。黃酮醇及其苷類是核桃青皮中的，姚煥英等（2003）研究表明核桃屬植物中的黃酮類化合物主要存中，主要包括櫻花亭（7-甲基二氫山奈酚）、槲皮素（6）、山奈（8）、扁蓄苷（槲皮素-3-阿拉伯糖苷）、胡桃苷（山奈酚-3-阿拉及 taxifolin。此外還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)核桃青皮中其他黃酮類物質(zhì)，比如桑 2007）、5-羥基-3,7,3',4'-四甲氧基黃酮（10）（周媛媛等 2014）

王克建等（2009）發(fā)現(xiàn)核桃仁中包含鞣花�；咸烟� 4 種異構(gòu)體、橡 2 種異構(gòu)體、二鞣花酰基葡萄糖 2 種異構(gòu)體、二沒(méi)食子酰基葡萄糖 2 種花�；拖餴\0酰基葡萄糖 3 種異構(gòu)體。王金蘭等（2008）在山核桃樹皮二甲氧基鞣花酸，山核桃酚和 4,8-二羥基萘酚-1-O-β-D-[6'-O-(3",5"-二甲甲�；�)]吡喃葡萄糖苷等。萬(wàn)政敏等（2007）在普通核桃青皮中發(fā)現(xiàn)了、沒(méi)食子酸、綠原酸、阿魏、咖啡酸、對(duì)羥基苯甲酸等酚類物質(zhì)。其他成分宇彬等（2006）從核桃青皮中得到精制多糖 76.08%，粗多糖 38.07%。楸皮中還發(fā)現(xiàn)了咖啡酸、沒(méi)食子酸、逆沒(méi)食子酸、對(duì)羥基桂皮酸、琥1,2,6-三沒(méi)食子糖和 1,2,3,6-四沒(méi)食子糖。核桃楸青果皮中發(fā)現(xiàn)了對(duì)羥基草醛、咖啡酸及對(duì)羥基肉桂酸等（石建輝等, 2006; 劉元慧, 2009; 。馬良進(jìn)等（2009）用不同溶劑對(duì)山核桃外果皮甲醇浸膏進(jìn)行萃取分離離得到 7 個(gè)化合物：?jiǎn)趟赏?0），黃卡瓦胡酵素（21），5-羥基-4',（22），5-羥基-2-甲氧基-1,4-萘醌（23），5-羥基-6,7-二甲氧基黃烷酮（25）。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 杜瓊;;突破發(fā)展瓶頸 實(shí)現(xiàn)云南核桃產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展[J];創(chuàng)造;2018年12期

2 王建英;;阜平縣核桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展前景[J];現(xiàn)代農(nóng)村科技;2019年02期

3 張洪洲;劉媛杰;王憲磊;李勇;周丹;侯寶華;蘇海飛;鄭浩;肖豪杰;;核桃烘干裝置設(shè)計(jì)與優(yōu)化控制[J];農(nóng)機(jī)化研究;2018年05期

4 雷永霞;郝彩霞;;核桃育苗技術(shù)[J];農(nóng)民致富之友;2017年22期

5 陳遠(yuǎn)東;;黔西南州核桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展分析[J];綠色科技;2018年01期

6 賈瑞芬;;2007年來(lái)10年間核桃文獻(xiàn)分析[J];四川農(nóng)業(yè)與農(nóng)機(jī);2018年01期

7 宮學(xué)斌;王婷婷;宮俊杰;張敏;趙煜煒;姜建波;;核桃加工及綜合利用研究進(jìn)展[J];中國(guó)果菜;2018年03期

8 王億;沈京晶;;通江縣核桃生產(chǎn)現(xiàn)狀與發(fā)展對(duì)策探析[J];四川林勘設(shè)計(jì);2015年01期

9 汪衛(wèi)祥;;四川核桃生產(chǎn)現(xiàn)狀及產(chǎn)業(yè)化發(fā)展建議[J];中國(guó)園藝文摘;2015年10期

10 張建國(guó);;核桃種植管理及采收技術(shù)解析[J];花卉;2017年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 趙秀平;裴更生;毛向紅;趙亞輝;;從國(guó)內(nèi)外核桃生產(chǎn)現(xiàn)狀與市場(chǎng)需求談河北省核桃產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)干果分會(huì)成立大會(huì)暨第二屆全國(guó)干果生產(chǎn)與科研進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

2 陳來(lái)生;杜中平;;青海核桃生產(chǎn)現(xiàn)狀、問(wèn)題與發(fā)展對(duì)策[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)干果分會(huì)成立大會(huì)暨第二屆全國(guó)干果生產(chǎn)與科研進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

3 趙寶軍;;遼寧省核桃生產(chǎn)現(xiàn)狀、存在問(wèn)題及發(fā)展建議[A];首屆全國(guó)干果生產(chǎn)與科研進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];1998年

4 趙寶軍;宮永紅;;通過(guò)美國(guó)核桃產(chǎn)業(yè)看我國(guó)核桃生產(chǎn)[A];第四屆全國(guó)干果生產(chǎn)、科研進(jìn)展研討會(huì)論文集[C];2005年

5 張毅萍;;世界及我國(guó)核桃生產(chǎn)概況和幾個(gè)問(wèn)題[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)干果分會(huì)成立大會(huì)暨第二屆全國(guó)干果生產(chǎn)與科研進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2001年

6 張建良;張潔;郭龍;張銳;;兩種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理對(duì)‘溫185’核桃品質(zhì)的影響[A];中國(guó)園藝學(xué)會(huì)2017年論文摘要集[C];2017年

7 王福宗;毛向紅;;關(guān)于河北省核桃生產(chǎn)良種化的幾個(gè)問(wèn)題[A];首屆全國(guó)干果生產(chǎn)與科研進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];1998年

8 鄒路路;李美鳳;魏蜜;毛雅慧;傅本重;;核桃細(xì)菌性疫病菌多糖、色素及其競(jìng)爭(zhēng)能力研究[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2017年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2017年

9 余雷;鄒路路;涂昌;王博凱;衛(wèi)錦霞;周佳凱;魏蜜;傅本重;;源于植物內(nèi)生菌的核桃細(xì)菌性疫病生防菌的篩選[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2018年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2018年

10 孫曉麗;陳秀梅;王紅霞;張志華;;生態(tài)循環(huán)模式在核桃生產(chǎn)上的應(yīng)用與展望[A];第八屆全國(guó)干果生產(chǎn)、科研進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 杜彥章 胡紫君 本報(bào)記者 汪江婷;產(chǎn)教融合讓核桃樹成“搖錢樹”[N];廣元日?qǐng)?bào);2019年

2 李玉榮;核桃產(chǎn)業(yè)奏響發(fā)展致富曲[N];畢節(jié)日?qǐng)?bào);2018年

3 李志浩 劉兵;葉城：“咬緊”核桃不放松 走出綠洲貧困“輪回”[N];糧油市場(chǎng)報(bào);2019年

4 李桑鐸;核桃樹病蟲害的用藥方法[N];農(nóng)業(yè)科技報(bào);2019年

5 王根憲;核桃，何以成為商洛市樹？[N];商洛日?qǐng)?bào);2019年

6 閆紅星 李永春;古縣核桃產(chǎn)業(yè)釋放出“萬(wàn)噸生產(chǎn)力”[N];山西科技報(bào);2017年

7 記者 張力宏 李小龍;商洛代表團(tuán)建議省上重點(diǎn)支持我市核桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展[N];商洛日?qǐng)?bào);2018年

8 黃家瑞;柞水為1.6萬(wàn)畝核桃上保險(xiǎn)[N];商洛日?qǐng)?bào);2018年

9 本報(bào)記者 楊開源;紫色核桃樹，綠化怎么用？[N];中國(guó)花卉報(bào);2018年

10 張國(guó)霞;核桃生長(zhǎng)后期謹(jǐn)防兩種病害[N];新疆科技報(bào)(漢);2018年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 李文治;核桃蛋白酶解產(chǎn)物改善記憶功效及其壓片性能研究[D];華南理工大學(xué);2017年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 惠建超;高活性核桃內(nèi)生真菌篩選及其代謝產(chǎn)物抑菌機(jī)理研究（Ⅱ）[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2019年

2 王悅;反膠束法提取核桃蛋白及蛋白理化性質(zhì)的研究[D];河北工程大學(xué);2018年

3 胡海超;γ射線輻照抑制鮮核桃萌發(fā)的呼吸代謝生理機(jī)制研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2018年

4 徐慧娟;河池市核桃炭疽病菌的生物學(xué)特性及其對(duì)核桃葉片生理生化的影響[D];廣西大學(xué);2018年

5 張波;核桃射頻熱風(fēng)聯(lián)合干燥特性及品質(zhì)變化研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2017年

6 任歡;新疆核桃生產(chǎn)發(fā)展優(yōu)勢(shì)及競(jìng)爭(zhēng)力研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 崔艷慧;云南省漾濞縣核桃專業(yè)化烘烤組織模式構(gòu)建的探究[D];云南師范大學(xué);2017年

8 武曉霞;我國(guó)核桃生產(chǎn)與貿(mào)易比較優(yōu)勢(shì)研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

9 鄭書童;新疆核桃生產(chǎn)機(jī)械化現(xiàn)狀及發(fā)展對(duì)策[D];石河子大學(xué);2016年

10 陳玉婷;反膠束制備核桃蛋白的工藝及結(jié)構(gòu)與功能性研究[D];濟(jì)南大學(xué);2017年

本文編號(hào)：2805526