發(fā)布時(shí)間：2020-05-01 20:28

【摘要】：干旱是影響全球農(nóng)林牧業(yè)發(fā)展及植物生態(tài)環(huán)境的主要因素。闡明植物抗旱分子機(jī)理,提高植物抗旱能力已成為我國發(fā)展農(nóng)林牧業(yè)及保護(hù)植物生態(tài)亟需解決的重大科學(xué)問題。OSCA1作為第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的植物中的陽離子通道蛋白,探索植物抵御干旱脅迫的分子機(jī)理,具有非常重要的意義。然而到目前為止,OSCA1的生理機(jī)制仍然不清楚。鑒定已知蛋白的相互作用蛋白為探究其蛋白功能和分子機(jī)制提供重要依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)主要利用多種國際先進(jìn)和認(rèn)可度高的篩選方法,篩選出OCSA1的互作因子之一:Calmodulin(CaM),并進(jìn)行更深層的生理機(jī)制分析。目前取得的成果如下:1.通過酵母雙雜交(Y2H)、免疫沉淀-質(zhì)譜聯(lián)用(IP-MS)以及雙分子熒光互補(bǔ)(BiFC)三種方法共同篩選出CaM是OSCA1的互作因子之一;2.通過鈣成像系統(tǒng)分析處理以及動物細(xì)胞HEK293T異源體系后發(fā)現(xiàn),CaM會促進(jìn)OSCA1通道的閉合,從而使其介導(dǎo)的OICI(Osmotic Induced Calcium Increase)所引起的鈣信號下降;3.通過Y2H,篩選出OSCA1與CaM的結(jié)合區(qū)域OSCA1(459-475),并且之后發(fā)現(xiàn)CaM的結(jié)合區(qū)域不僅僅只有OSCA1(459-475)這么1處,OSCA1上還存在著4個(gè)CaM的結(jié)合區(qū)域。
【圖文】：

圖 1.1 Y2H 檢測蛋白質(zhì)相互作用示意圖[72]Fig.1.1 Schematic diagram of Y2H detection of protein interaction2 免疫沉淀-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

圖 1.2 BiFC 檢測蛋白質(zhì)相互作用示意圖[72]Fig.1.2 Schematic diagram of BiFC detection of protein interaction.5 本研究的立題依據(jù)和意義
【學(xué)位授予單位】：杭州師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：Q943

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 王明強(qiáng);武金霞;張玉紅;韓凝;邊紅武;朱睦元;;蛋白質(zhì)相互作用實(shí)驗(yàn)技術(shù)的最新進(jìn)展[J];遺傳;2013年11期

2 梁秋芬;劉寬燦;徐碧玉;金志強(qiáng);;鈣調(diào)蛋白在植物發(fā)育中的功能[J];生命科學(xué)研究;2005年S2期

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本文編號：2647028