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鹽穗木根際產(chǎn)ACC脫氨酶細(xì)菌的篩選及促生作用的初步研究

發(fā)布時間:2020-04-03 12:56
【摘要】:鹽穗木(Halostachys caspica)屬于藜科(Chenopodiaceae)、鹽穗木屬,是新疆鹽堿地的優(yōu)勢植物種屬,生長于鹽堿化程度高的貧瘠土壤地區(qū)。根際促生菌(PGPR)是既可促進(jìn)植物生長與植被對礦物質(zhì)元素的消化吸收,又能抑制有害的微生物繁殖的一類有益菌類;ACC脫氨酶能夠降解植被體內(nèi)合成乙烯的直接前體物質(zhì)—ACC為a-丁酮酸和氨,進(jìn)而降低乙烯含量。研究人員發(fā)現(xiàn)PGPR中一些細(xì)菌可以分泌ACC脫氨酶這種活性物質(zhì),產(chǎn)ACC脫氨酶活性的細(xì)菌可以分解植物在逆境條件下產(chǎn)生的ACC,減少植被生長的障礙,提高植被的存活率。本研究以新疆鹽穗木根際的土壤作為樣品,采用定向富集的方法,分離篩選產(chǎn)ACC脫氨酶的促生菌,對篩選的菌株進(jìn)行鑒定;生長特性的研究;產(chǎn)ACC脫氨酶酶活的測定及耐鹽耐堿特性的研究;同時還對篩選菌株促生潛力的測定;不同濃度的菌液對小麥,玉米促生的影響;鹽脅迫下篩選菌株對小麥,玉米促生的影響,結(jié)果如下:(1)從鹽穗木的根際土壤中分離篩選得到1#,3#,5#,三株產(chǎn)ACC脫氨酶活性的菌株。(2)從形態(tài)學(xué)及生理生化特征,Biolog Gen III和16S r DNA分子生物學(xué)的三個層次對三株菌株進(jìn)行觀察和分析,三株菌株得鑒定結(jié)果為:1#菌株為克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae);3#菌株為克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae);5#菌株為酸性克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)。(3)三株菌株生長曲線表明:在0-2h菌株適應(yīng)環(huán)境,生長速度緩慢;2-8 h之間由于豐富的物質(zhì)使細(xì)菌增長速度加快,細(xì)菌大量的繁殖;在10 h時菌株增長速度放緩,生長達(dá)到平衡;初步符合細(xì)菌生長的規(guī)律。(4)1#,3#,5#,三株菌株ACC脫氨酶酶活力具有差異;5#菌株產(chǎn)ACC脫氨酶的活性最強(qiáng),1#與3#之間的酶活力差異不顯著,1#與5#;3#與5#之間酶活力差異顯著(p0.05),三株菌株ACC脫氨酶酶活性大小排序為5#1#=3#。(5)三株菌株耐鹽堿的特點為:NaCl質(zhì)量濃度為6%時,三株菌株的生物量達(dá)到最大,隨著鹽濃度的增加,菌株的生物量降低;三株菌株耐堿性能較好,在p H為7-10時微生物含量OD_(600)均在2.0以上。(6)三株菌株促生潛力:三株菌株都具有產(chǎn)IAA能力,但存在差異,1#與3#相比較差異極顯著(P0.001),1#與5#相比較差異極顯著(P0.001);三株菌株均有解鉀能力,溶磷能力,固氮能力;均有產(chǎn)鐵載體的潛力,但產(chǎn)鐵載體的量差異不顯著,產(chǎn)鐵能力均為“++”。(7)1#菌株、3#菌株和5#菌株的不同菌液濃度對小麥和玉米種子根的生長,下胚軸的生長和根分枝數(shù)都有促進(jìn)作用,但存在著不同程度的差異。經(jīng)過綜合分析:三株菌株的菌懸液濃度為OD_(600)值為1.0時,對小麥和玉米的根長,下胚長和根分枝數(shù)的整體的促生效果都比較好。(8)小麥,玉米種子用OD_(600)值為1.0的1#,5#菌液處理后,在不同濃度的鹽脅迫(0、50、100、150、200、300、350mmol/L)下對其相對的發(fā)芽率、相對下胚長、相對根分枝數(shù)、相對鮮重、相對干重有不同程度的影響。研究發(fā)現(xiàn)用菌液處理種子后可以減緩鹽溶液對它們的脅迫,不同程度的提高種子的發(fā)芽率,在低濃度的鹽溶液下能顯著促進(jìn)下胚長、根分枝數(shù)的生長,但是對小麥,玉米幼苗的鮮重、干重沒有太大的影響。具有ACC脫氨酶活性的1#、5#菌液處理種子后,能夠促進(jìn)植物的生長,緩解鹽脅迫對它們的傷害。
【圖文】:

菌落形態(tài),菌落,菌株,圖片


表 2-12 三株菌株的菌落形態(tài)Table2-12 Colony morphology of three strains革蘭氏染色 芽孢 顏色 透明度 光滑度 凹凸 邊緣 透明圈 1# 陽性 有 乳白色 不透明 光滑 凸 不整齊 無 3# 陽性 有 乳白色 不透明 光滑 凸 不整齊 無 5# 陽性 有 白色 透明 光滑 凸 整齊 無 三株菌株菌落圖如圖 2-1 所示,用掃描電鏡觀察,菌株均為短桿菌,,如圖所示。編號檢測指標(biāo)

掃描電鏡圖,菌株,不透明,乳白色


革蘭氏染色 芽孢 顏色 透明度 光滑度 凹凸 邊緣 透明圈 濕潤度1# 陽性 有 乳白色 不透明 光滑 凸 不整齊 無 濕潤3# 陽性 有 乳白色 不透明 光滑 凸 不整齊 無 濕潤5# 陽性 有 白色 透明 光滑 凸 整齊 無 濕潤三株菌株菌落圖如圖 2-1 所示,用掃描電鏡觀察,菌株均為短桿菌,如圖 2-2所示。圖 2-1 菌株的菌落圖片3 51編號檢測指標(biāo)
【學(xué)位授予單位】:新疆大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:TS201.3

【相似文獻(xiàn)】

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10 葉煒;田呂明;姚鵑;趙R

本文編號:2613397


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