赤潮中有害毒藻會(huì)產(chǎn)生多種海洋毒素,其中有著廣泛分布的麻痹性貝類(lèi)毒素（Paralytic Shellfish Toxins,PSTs）可以經(jīng)各營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的食物關(guān)系累積于海洋動(dòng)物中,若經(jīng)消化吸收進(jìn)入人體,會(huì)與細(xì)胞膜Na⁺離子通道結(jié)合阻礙神經(jīng)傳導(dǎo),引起麻痹性中毒,從而對(duì)人類(lèi)造成亞致死或致死作用。作為近海養(yǎng)殖的主要經(jīng)濟(jì)物種,雙殼貝類(lèi)需要過(guò)濾大量海水?dāng)z食藻類(lèi),從而將有毒藻中的毒素累積在體內(nèi),是PSTs傳遞的主要媒介。本文以甲藻Alexandrium minutum作為毒素生產(chǎn)者,首先,研究暴露于納米顆粒（nanoparticles,NPs）時(shí)A.minutum的生長(zhǎng)情況、生理狀態(tài)和產(chǎn)毒狀況;然后將A.minutum進(jìn)行穩(wěn)定同位素¹⁵N多代培養(yǎng)標(biāo)記,比較藻和毒素中的標(biāo)記豐度,以及標(biāo)記藻是否同普通藻一樣可以在磷缺乏時(shí)保持生長(zhǎng);最后以長(zhǎng)牡蠣（Crassostrea gigas）作為毒素蓄積對(duì)象,將¹⁵N-PSTs引入到貝類(lèi)體內(nèi),研究¹⁵N-PSTs在貝體內(nèi)的分布和轉(zhuǎn)化情況,通過(guò)對(duì)染毒前后長(zhǎng)牡蠣內(nèi)臟團(tuán)進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)...

【文章頁(yè)數(shù)】：98 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 緒論
    1.1 麻痹性貝毒的研究概況
        1.1.1 麻痹性貝毒的來(lái)源及分類(lèi)
        1.1.2 麻痹性貝毒的檢測(cè)方式
        1.1.3 影響產(chǎn)毒藻生長(zhǎng)和產(chǎn)毒的因素
        1.1.4 麻痹性貝毒的蓄積及代謝研究
    1.2 穩(wěn)定同位素示蹤法的應(yīng)用概況
        1.2.1 穩(wěn)定同位素示蹤法簡(jiǎn)介
        1.2.2 ¹⁵N穩(wěn)定同位素示蹤法應(yīng)用及進(jìn)展
    1.3 代謝組學(xué)的應(yīng)用
    1.4 研究目的、意義及內(nèi)容
        1.4.1 研究目的及意義
        1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
2 納米顆粒(NPs)對(duì)A.minutum生長(zhǎng)、氧化應(yīng)激和產(chǎn)毒的影響
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 原料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 培養(yǎng)條件
        2.3.2 活性氧(ROS)的測(cè)定
        2.3.3 丙二醛(MDA)的測(cè)定
        2.3.4 超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定
        2.3.5 過(guò)氧化氫酶(CAT)的測(cè)定
        2.3.6 藻中PSTs的提取
        2.3.7 PSTs的檢測(cè)
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 NPs對(duì) A.minutum生長(zhǎng)的影響
        2.4.2 A.minutum的氧化應(yīng)激狀況
        2.4.3 NPs對(duì) A.minutum產(chǎn)毒狀況的影響
    2.5 本章小結(jié)
3 長(zhǎng)牡蠣不同組織中¹⁵N-PSTs的蓄積及轉(zhuǎn)化
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 原料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 高豐度¹⁵N-A.minutum的培養(yǎng)
        3.3.2 ¹⁵N-標(biāo)記豐度的測(cè)定
        3.3.3 ¹⁵N-PSTs在牡蠣內(nèi)的蓄積實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 鰓的HE染色觀察
        3.3.5 牡蠣組織中¹⁵N-PSTs的提取及測(cè)定
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 高豐度¹⁵N-A.minutum的馴養(yǎng)及磷缺乏對(duì)其生長(zhǎng)的影響
        3.4.2 牡蠣的攝食情況
        3.4.3 染毒前后長(zhǎng)牡蠣的組織學(xué)觀察
        3.4.4 ¹⁵N-PSTs蓄積含量和種類(lèi)
        3.4.5 ¹⁵N-PSTs在牡蠣內(nèi)的轉(zhuǎn)化規(guī)律
    3.5 本章小結(jié)
4 長(zhǎng)牡蠣染¹⁵N-PSTs前后的代謝組學(xué)分析
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 原料
        4.2.2 主要試劑
        4.2.3 主要儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 ¹⁵N-PSTs在牡蠣內(nèi)的蓄積實(shí)驗(yàn)
        4.3.2 代謝組學(xué)樣品的前處理
        4.3.3 液相色譜-質(zhì)譜分析條件
        4.3.4 數(shù)據(jù)處理
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 檢測(cè)方法的可行性
        4.4.2 差異代謝物的篩選
        4.4.3 牡蠣染毒前后的代謝通路分析
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：4047244