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白酒釀造體系中酵母菌群的乳酸耐受機制解析

發(fā)布時間:2022-04-23 20:12
  乳酸在發(fā)酵食品和飲料的發(fā)酵過程中是一種常見的代謝產(chǎn)物和生長抑制劑。例如,在醬香型白酒的發(fā)酵過程中,乳酸是含量最高的有機酸,可達36.20 g·kg-1酒醅,抑制核心酵母的生長代謝。然而目前對酵母乳酸耐受性的研究主要停留在單菌水平,不適用于白酒釀造的混菌體系。研究核心酵母菌群的乳酸耐受機制,有助于維持白酒發(fā)酵過程中酵母菌群發(fā)酵能力的穩(wěn)定,有助于白酒生產(chǎn)走向標準化、精確化與可控化。本文以白酒釀造體系中的核心酵母菌群為研究對象,借助轉(zhuǎn)錄組學(xué)、共培養(yǎng)和反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR等研究手段,初步探明了核心酵母菌群對高濃度乳酸的適應(yīng)性反應(yīng)。取得的主要研究結(jié)果如下:(1)首先探究了乳酸脅迫對白酒釀造體系中的核心酵母Pichia kudriavzevii C-16和Saccharomyces cerevisiae C-3的影響。S.cerevisiae C-3在40 g·L-1乳酸脅迫下幾乎不生長,發(fā)酵終點的OD600降低了98%,乙醇產(chǎn)量降低了66%;而P.kudriavzevii C-16在40 g·L-1乳酸脅迫下... 

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 白酒發(fā)酵過程中的核心酵母
        1.1.1 白酒發(fā)酵過程中酵母的多樣性
        1.1.2 酵母對風(fēng)味和香氣的貢獻
        1.1.3 混合發(fā)酵中酵母與酵母之間的相互作用
    1.2 白酒中的有機酸及其脅迫作用
        1.2.1 白酒中有機酸的研究進展
        1.2.2 有機酸對微生物的脅迫作用
    1.3 酵母中有機酸的適應(yīng)性反應(yīng)
        1.3.1 細胞內(nèi)酸化和pH恢復(fù)
        1.3.2 通過多藥抗性轉(zhuǎn)運蛋白解除有機酸毒害
        1.3.3 弱酸誘導(dǎo)的細胞包膜重塑
        1.3.4 感知和響應(yīng)營養(yǎng)和能量限制
        1.3.5 小結(jié)
    1.4 本課題研究的意義與主要內(nèi)容
        1.4.1 本課題研究的意義
        1.4.2 本課題研究的主要內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 引物
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 培養(yǎng)基的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 核心功能酵母的乳酸耐受性比較
        2.2.2 發(fā)酵液中代謝物的分析
        2.2.3 P.kudriavzevii C-16 與模式菌株乳酸耐受性比較
        2.2.4 RNA測序樣品的制備
        2.2.5 轉(zhuǎn)錄組建庫測序流程
        2.2.6 轉(zhuǎn)錄組信息分析流程
        2.2.7 酵母菌群的乳酸耐受性分析
        2.2.8 發(fā)酵液微生物基因組DNA提取方法
        2.2.9 實時熒光定量PCR定量發(fā)酵液中酵母菌的生物量
        2.2.10 反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR分析乳酸耐受基因轉(zhuǎn)錄水平
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 核心功能酵母乳酸脅迫下發(fā)酵動力學(xué)比較
        3.1.1 不同核心功能酵母的乳酸耐受特性
        3.1.2 不同核心功能酵母發(fā)酵動力學(xué)比較
        3.1.3 不同核心功能酵母降解乳酸能力比較
    3.2 基于比較轉(zhuǎn)錄組學(xué)解析P.kudriavzevii C-16乳酸耐受機制
        3.2.1 P.kudriavzevii C-16與模式菌株的乳酸耐受能力比較
        3.2.2 參考基因組比對結(jié)果
        3.2.3 模式菌株與P.kudriavzevii C-16差異表達基因分析
        3.2.4 P.kudriavzevii C-16響應(yīng)乳酸脅迫的機制
    3.3 酵母菌群重構(gòu)及乳酸耐受互作機制
        3.3.1 P.kudriavzevii C-16對酵母菌群降解乳酸的作用
        3.3.2 微生物相互作用對乳酸降解相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的影響
        3.3.3 微生物相互作用對滲透壓維持相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的影響
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻
附錄 :作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻】:
期刊論文
[1]瀘型酒釀造過程中上層和下層酒醅的有機酸變化分析[J]. 徐勇,郎召偉,沈咪娜,王松濤,張曉娟,沈才洪,陸震鳴.  四川理工學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版). 2018(05)
[2]衡水老白干酒中產(chǎn)酸微生物的分離鑒定及性能研究[J]. 孫鵬飛,張福艷,吳海靜,朱文眾.  中國釀造. 2016(03)
[3]衡水老白干酒發(fā)酵主要風(fēng)味物質(zhì)變化規(guī)律研究[J]. 朱會霞,張煜行,程宗志,郭亞偉,安惠玲,王文晶,李蘇蕊,肖冬光,張志民.  釀酒科技. 2015(02)
[4]釀酒酵母和異常畢赤酵母混菌發(fā)酵對白酒液態(tài)發(fā)酵效率和風(fēng)味物質(zhì)的影響[J]. 唐潔,王海燕,徐巖.  微生物學(xué)通報. 2012(07)
[5]葡萄酒釀造中高級醇的形成機制與調(diào)節(jié)[J]. 程軍,秦偉帥,趙新節(jié).  中國釀造. 2011(12)

博士論文
[1]Candida glycerinogenes高濃度糠醛耐受機制及纖維素乙醇發(fā)酵應(yīng)用[D]. 趙美琳.江南大學(xué) 2019
[2]不同環(huán)境清香類型白酒發(fā)酵微生物種群結(jié)構(gòu)比較及溯源解析[D]. 王雪山.江南大學(xué) 2018

碩士論文
[1]PLFA對清香大曲微生物群落結(jié)構(gòu)分析及產(chǎn)酯酵母的篩選應(yīng)用研究[D]. 張紅霞.山西師范大學(xué) 2016
[2]青稞酒重要風(fēng)味成分及其酒醅中香氣物質(zhì)研究[D]. 高文俊.江南大學(xué) 2014



本文編號:3647902

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