壇紫菜（Porphyra haitanensis）,主要分布在福建、浙江和廣東沿岸,是我國特有的大型經(jīng)濟海藻之一,具有高蛋白、高纖維、低熱值、低脂肪的特點,含有豐富的氨基酸（包括8種必需氨基酸）,是生物活性肽的理想蛋白源。本文首先對不同采收期壇紫菜進行營養(yǎng)成分分析和品質(zhì)評價;其次,采用響應(yīng)面（response surface methodology,RSM）優(yōu)化超聲波提取壇紫菜蛋白的工藝條件,測定蛋白的基礎(chǔ)特性;再次,采用RSM優(yōu)化酸性蛋白酶酶解壇紫菜蛋白的工藝條件,測定酶解產(chǎn)物體外抗氧化活性;最后,利用凝膠過濾色譜（gel filtration chromatography,GFC）對不同分子量的壇紫菜蛋白抗氧化肽進行分離富集,探討高抗氧化活性組分對H₂O₂誘導(dǎo)的人肝癌HepG2細胞的氧化損傷的修復(fù)作用,同時借助液相色譜/電噴霧質(zhì)譜（LC/ESI/MS）技術(shù)對壇紫菜高抗氧化活性肽的一級結(jié)構(gòu)予以鑒定。研究其對具體結(jié)果如下:1.以不同采收期壇紫菜為原料,測定其基本營養(yǎng)成分、氨基酸、脂肪酸和無機元素,并對營養(yǎng)價值進行了評價。結(jié)果表明,壇紫菜蛋白質(zhì)... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 引言
    1.2 抗氧化肽的分離純化
        1.2.1 大孔吸附樹脂法
        1.2.2 膜分離法
        1.2.3 色譜法
    1.3 結(jié)構(gòu)鑒定
        1.3.1 質(zhì)譜分析
        1.3.2 核磁共振
        1.3.3 氨基酸組成與序列分析
    1.4 作用機理
    1.5 抗氧化肽的應(yīng)用
        1.5.1 食品添加劑
        1.5.2 保健食品與藥品
    1.6 立題依據(jù)和研究內(nèi)容
        1.6.1 立題依據(jù)
        1.6.2 研究內(nèi)容
第二章 汕頭地區(qū)不同采收期壇紫菜營養(yǎng)成分分析與品質(zhì)評價
    2.1 引言
    2.2 材料方法
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 實驗方法
            2.2.3.1 基本營養(yǎng)成分的測定
            2.2.3.2 氨基酸分析
            2.2.3.3 脂肪酸分析
            2.2.3.4 無機元素含量測定
            2.2.3.5 營養(yǎng)價值評價
        2.2.4 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 基本營養(yǎng)成分分析
        2.3.2 氨基酸組成分析
        2.3.3 氨基酸營養(yǎng)價值評價
        2.3.4 脂肪酸組成分析
        2.3.5 無機元素分析
    2.4 本章小結(jié)
第三章 超聲波輔助提取壇紫菜蛋白及其基礎(chǔ)特性研究
    3.1 引言
    3.2 材料方法
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 實驗方法
            3.2.3.1 工藝流程
            3.2.3.2 單因素試驗設(shè)計
            3.2.3.3 響應(yīng)面試驗工藝優(yōu)化
            3.2.3.4 等電點（isoelectric point,pI）的測定
            3.2.3.5 紫外-可見分光光度計測定
            3.2.3.6 蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的測定
            3.2.3.7 氨基酸分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 單因素試驗
            3.3.1.1 料液比對蛋白質(zhì)提取率的影響
            3.3.1.2 超聲功率對蛋白質(zhì)提取率的影響
            3.3.1.3 超聲發(fā)出時間對蛋白質(zhì)提取率的影響
            3.3.1.4 超聲全程時間對蛋白質(zhì)提取率的影響
        3.3.2 響應(yīng)面分析
            3.3.2.1 數(shù)學(xué)模型的建立與顯著性分析
            3.3.2.2 因素間交互作用影響結(jié)果
        3.3.3 壇紫菜蛋白基礎(chǔ)特性分析
            3.3.3.1 等電點分析
            3.3.3.2 紫外光譜分析
            3.3.3.3 蛋白質(zhì)分子質(zhì)量組成分析
            3.3.3.4 氨基酸組成分析
    3.4 本章小結(jié)
第四章 末水壇紫菜蛋白酶解條件優(yōu)化及酶解產(chǎn)物體外抗氧化活性
    4.1 引言
    4.2 材料方法
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 實驗儀器
        4.2.3 實驗方法
            4.2.3.1 末水壇紫菜蛋白的制備
            4.2.3.2 末水壇紫菜蛋白酶解工藝流程
            4.2.3.3 末水壇紫菜蛋白水解蛋白酶的選擇
            4.2.3.4 酸性蛋白酶水解末水壇紫菜蛋白的試驗設(shè)計
            4.2.3.5 酶解產(chǎn)物DH與抗氧化活性關(guān)系
            4.2.3.6 酶解產(chǎn)物DH的測定
            4.2.3.7 酶解產(chǎn)物抗氧化活性測定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 末水壇紫菜蛋白水解蛋白酶的選擇
        4.3.2 單因素試驗
            4.3.2.1 底物濃度對酸性蛋白酶水解末水壇紫菜蛋白DH的影響
            4.3.2.2 加酶量對酸性蛋白酶水解末水壇紫菜蛋白DH的影響
            4.3.2.3 PH值對酸性蛋白酶水解末水壇紫菜蛋白DH的影響
            4.3.2.4 溫度對酸性蛋白酶水解末水壇紫菜蛋白DH的影響
        4.3.3 響應(yīng)面分析
            4.3.3.1 數(shù)學(xué)模型的建立與顯著性分析
            4.3.3.2 因素間交互作用影響結(jié)果
        4.3.4 DH與抗氧化活性關(guān)系
    4.4 本章小結(jié)
第五章 酶解產(chǎn)物分離純化以及對HEPG2 人肝癌細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 材料與試劑
        5.2.2 實驗儀器
        5.2.3 實驗方法
            5.2.3.1 末水壇紫菜多肽（粗品）的制備
            5.2.3.2 高效分子排阻色譜
            5.2.3.3 凝膠色譜層析
            5.2.3.4 結(jié)構(gòu)鑒定
            5.2.3.5 細胞培養(yǎng)
            5.2.3.6 細胞模型的建立
            5.2.3.7 末水壇紫菜抗氧化肽對H2O2 誘導(dǎo)HEPG2 細胞氧化損傷的作用
            5.2.3.8 細胞活力、SOD酶活和MDA含量的測定
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 酶解產(chǎn)物分子量分布
        5.3.2 酶解產(chǎn)物的分離純化
        5.3.3 酶解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)鑒定
        5.3.4 細胞抗氧化活性
            5.3.4.1 細胞模型的建立
            5.3.4.2 細胞活力的測定
            5.3.4.3 細胞中SOD酶活和MDA含量的測定
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
攻讀碩士期間論文成果



本文編號：3015658