發(fā)布時間：2020-09-24 13:12

　　 益智(Alpinia oxyphylla Miq.)主要生長于我國南方,是一種藥食同源的植物,益智主要含有黃酮類、倍半萜類、二苯基庚烷類等化學(xué)成分,具有減緩胃痛、腹瀉、潰瘍、多尿、延緩衰老、預(yù)防癡呆等功效。益智果實(shí)廣泛應(yīng)用于食品、藥品、保健品等行業(yè),而益智其它部位的應(yīng)用和研究比較少。下面將研究主要結(jié)果概括如下:以海南保亭地區(qū)(BT)益智植物的莖BT、葉BT、殼BT、仁BT、梗BT和海南瓊中地區(qū)(QZ)益智莖Qz、葉QZ為研究對象,一般營養(yǎng)成分和維生素含量分析采用新鮮樣品。殼BT、梗13T的含水量最高,可達(dá)80%以上;仁BT部位總糖含量最高,為35.48 g/100g;同一產(chǎn)地,仁BT的油脂、葉BT的色素和粗纖維含量最高,分別為2.43g/100 g、0.369 g/100g、15.77 g/100 g。葉QZ VB6、VC、VA、VE 含量比較突出,分別為 12.97 mg/100 g、13.04 mg/100 g、0.901 mg/100 g、43.76 mg/100 g。葉BT 中所含VB2、VB6、VE 含量分別為 0.47 mg/100 g、12.32 mg/100 g、5.81 mg/100 g 均顯著高于同一產(chǎn)地其他部位;除VB3和VC外,殼BT維生素含量均高于仁BT。益智中礦質(zhì)元素含量豐富,葉QZ中Ca、Mg、Fe含量含量最高;殼BT中K、Mg含量和莖BT中Zn含量高于同一產(chǎn)地的其他部位;重金屬含量均低于國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)限量。莖BT、梗BT中亞油酸含量較高,分別為16.53%、19.02%,分別占相應(yīng)不飽和脂肪酸總量的56.1%、58.2%,且莖BT脂肪酸組成相對分布均勻,較符合健康植物油脂的指標(biāo)。除傳統(tǒng)食用部位益智仁外,益智莖油脂、葉、殼均具有一定的營養(yǎng)價值。以總黃酮含量為依據(jù),篩選出益智植物5個部位中總黃酮含量最高的為益智葉。以益智葉總黃酮(Total Flavonoids from the Leaves of Alpiniaoxyphyia Miq.,TFL)提取率、DPPH 自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPHO 清除率、ABTS自由基(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid radical,ABTS+·)清除率以及鐵離子還原能力(Ferric reducing antioxidant power,FRAP)四個指標(biāo)對TFL進(jìn)行微波提取正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,其最佳提取工藝為:50%乙醇為提取溶劑,液料比為20,提取溫度為70℃,提取3次。5組驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明:TFL提取率為28.24%(RSD=0.487%),且其提取液具有優(yōu)良的抗氧化能力。將上述提取液減壓濃縮,冷凍干燥后得到TFL粉末,四個抗氧化實(shí)驗(yàn)評價TFL抗氧化能力:TFL對DPPH·、ABTS+、超氧陰離子自由基(Superoxide anion free radical,O2-·)的半數(shù)清除濃度(50%inhibiting concentration,IC50)分別為 6.56 μg/ml、71.28 μg/mL、1.308 mg/ml。TFL 的 DPPH·、O2-·清除能力和FRAP與VC的作用效果相近,均遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于陽性對照BHT。采用高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)測得 TFL 中白楊素與楊芽黃素的含量分別為0.0896 mg/g、1.8020 mg/g。傅里葉紅外光譜(Fourier Transfoma Infrared spectrum,FTIR)、熱重(Thermogravimetric,TG)、差示掃描量熱(Differential Scanning Calorimetry,DSC)、礦質(zhì)元素分析表明,TFL在210℃以下基本可以穩(wěn)定。以多糖含量為依據(jù),篩選出益智植物5個部位中多糖含量較高的為益智仁和益智殼。采用Box-Behnken設(shè)計(jì)優(yōu)化益智仁多糖(polysaccharide from seed,PS)和益智殼多糖(polysaccharide from pericarp,PP)提取工藝。結(jié)果表明:PS最佳提取工藝確定為pH 4、液料比35 mL/g,酶解時間2.5 h,提取時間2.5 h;PP最佳提取工藝確定為pH 4,液料比35 mL/g,酶解時間1.5 h,提取時間2.0 h。PS和PP的提取率分別為(10.40±0.14)%、(6.21±0.14)%。PS、PP純化后得率分別為4.67%、4.12%。三種抗氧化實(shí)驗(yàn)表明:PS、PP對DPPH·的IC50值分別為2.455 mg/mL、0.17 mg/mL;PS、PP濃度為3mg/mL時對ABTS+·的清除率分別為12.36%、92.47%,其對應(yīng)的FRAP分別為52.67 μmol/L,756.77 μmol/L,PP的抗氧化能力優(yōu)于PS。FTIR、TG、DSC、掃描電鏡(scanning electron microscopy,SEM)、宏觀狀態(tài)的結(jié)果均表明兩種多糖具有差異。PS、PP的單糖含量具有差異性,PS中葡萄糖含量最高,PP中半乳糖醛酸含量最高;PS中主要單糖物質(zhì)的量比為甘露糖:鼠李糖:氨基葡萄糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:木糖:阿拉伯糖:巖藻糖=1:3.18:0.83:5.47:98.34:9.62:24.60:17.51:1.45;PP中主要單糖物質(zhì)的量比為甘露糖醛酸:甘露糖:鼠李糖:氨基葡萄糖:葡萄糖醛酸:半乳糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:木糖:阿拉伯糖:巖藻糖=5.06:l:1.64:1.08:1.81:91.17:5.43:6.36:12.22:12.23:0.86。PP通過乙醇分級沉淀純化后得到的PP-70、PP-80兩種多糖分子量分別在65 KDa和55 KDa左右,其抗氧化能力基本優(yōu)于PP。通過HPLC-MS聯(lián)用分析益智5個部位的化學(xué)成分。分析得出化合物1、2、3、6分別為圓柚酮、楊芽黃素、白楊素、oxyphyllone D/oxyphyllone G,未知化合物4、5、7分子量分別為636、384、546,有待進(jìn)一步確定,益智5個部位化學(xué)成分含量和種類存在較大差異。將益智5個不同部位的乙醇浸膏分為石油醚(Petroleum ether,PE)、乙酸乙酯(ethyl acetate,EA)、正丁醇(n-butanol,nBA)、水(Water,W)4 個不同極性萃取段。不同部位不同極性萃取段對DPPH·、ABTS+·清除能力以及FRAP的結(jié)果表明:莖、葉、梗等部位的nBA和EA段的抗氧化能力較強(qiáng),基本優(yōu)于益智仁、殼部位各個萃取段,具有進(jìn)一步分離純化和化學(xué)成分分析的研究意義。益智食品安全標(biāo)準(zhǔn)(草案)制定中包括益智的兩個部位:益智仁、益智殼。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,將益智仁、殼水分含量分別限定為≤10.0g/100g、≤6.0g/100g;灰分含量分別限定為≤5.0g/100g、≤8.0g/100g;揮發(fā)油含量均限定為≥0.7mL/100g;原兒茶酸含量分別限定為≥35.000 μg/g、≥25.000 μg/g;圓柚酮含量分別限定為≥2.4000 mg/g、≥0.1800 mg/g。根據(jù)益智仁、殼中草酸、植酸、單寧、胰蛋白酶抑制劑活性四種抗?fàn)I養(yǎng)因子的含量,提出益智仁、殼原材料宜采用熱水浸泡方式處理后使用。重金屬、農(nóng)藥殘留、微生物檢查等均要求符合相應(yīng)的食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)。
【學(xué)位單位】：海南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TS201.4
【部分圖文】：

益智各部位采自海南省保亭縣和瓊中縣，手工分離后得到益智逡逑Ｍｉｑ．）植物的莖、葉、殼、仁、梗５個部位；所用益智各部位為新鮮樣品，采收于２０１７逡逑年６月份，材料剪碎存放于－２０邋°Ｃ以下冰箱中保存，用時取出。圖２－１為益智樣品采收逡逑后初步處理照片，其中益智果實(shí)剪刀剪開后將益智果殼與果仁分離。鮮樣處理：樣品逡逑粉碎機(jī)粉碎，冰箱中存放，測定前從冰箱中取出樣品，放置一段時間常溫散去樣品表逡逑面水分，精確稱重。千樣處理：部分營養(yǎng)素的分析采用干基，所用鮮樣于５０邋Ｘ：左右逡逑烘箱中烘干的方式再進(jìn)行測定。逡逑圖２－１益智樣品懫收后初步處理逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｏｆ邋Ａｌｐｉｎｉａ邋ｏｘｙｐｈｙｌｌａ邋Ｍｉｑ．邋ａｆｔｅｒ邋ｈａｒｖｅｓｔ逡逑２．１．２主要實(shí)驗(yàn)試劑與儀器逡逑１７逡逑

Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｔｈｅ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋ｒｕｔｉｎ逡逑３．３．２益智不同部位總黃酮含量對比分析逡逑由圖３－２可知同等微波提取條件下益智葉總黃酮含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于益智其他部位，初逡逑步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，益智葉中總黃酮含量為（２３．５３土０．４３）邋％，分別是梗、殼、莖、仁逡逑總黃酮含量的２．９倍、５．９倍、６．３倍和３７．３倍，具有總黃酮開發(fā)利用的價值。逡逑２５邋？逡逑邐￡邐逡逑２０邋■逡逑ｇ逡逑＿邋１５邋．逡逑W １０邋■逡逑句邋５邋■邐邋邐逡逑0邋－Ｉ邐Ｌ＊邐ＬＩ邐１？邋－邋？？邐逡逑莖葉邋殼仁梗逡逑圖３－２總黃酮含量對比逡逑Ｆｉｇ．邋３－２邋Ｃｏｎｔｒａｓｔ邋ｏｆ邋ｔａｔａｌ邋ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ邋ｃｏｎｔｅｎｔ逡逑３．３．３微波輔助提取益智葉總黃酮單因素實(shí)驗(yàn)逡逑（１）乙醇濃度的影響逡逑由圖３－３可知，ＴＦＬ提取率隨著乙醇濃度的增加而增加，但當(dāng)乙醇濃度高于６０％時，逡逑ＴＦＬ提取率呈現(xiàn)下降趨勢，且試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，隨著乙醇濃度的加大提取液顏色由棕黃到逡逑深綠變化，推測乙醇濃度過大，色素溶出較大反而不利于黃酮類物質(zhì)的溶出，乙醇溶逡逑液濃度為６０％時，益智葉的總黃酮

０．０１邐０．０２邐０．０３邐０．０４邐０．０５邐０．０６逡逑蘆丁濃度／（ｍｇ／ｍＬ）逡逑圖３－１蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｔｈｅ邋ｓｔａｎｄａｒｄ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋ｒｕｔｉｎ逡逑３．３．２益智不同部位總黃酮含量對比分析逡逑由圖３－２可知同等微波提取條件下益智葉總黃酮含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于益智其他部位，初逡逑步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，益智葉中總黃酮含量為（２３．５３土０．４３）邋％，分別是梗、殼、莖、仁逡逑總黃酮含量的２．９倍、５．９倍、６．３倍和３７．３倍，具有總黃酮開發(fā)利用的價值。逡逑２５邋？逡逑邐￡邐逡逑２０邋■逡逑ｇ逡逑＿邋１５邋．逡逑W １０邋■逡逑句邋５邋■邐邋邐逡逑0邋－Ｉ邐Ｌ＊邐ＬＩ邐１？邋－邋？？邐逡逑莖葉邋殼仁梗逡逑圖３－２總黃酮含量對比逡逑Ｆｉｇ．邋３－２邋Ｃｏｎｔｒａｓｔ邋ｏｆ邋ｔａｔａｌ邋ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ邋ｃｏｎｔｅｎｔ逡逑３．３．３微波輔助提取益智葉總黃酮單因素實(shí)驗(yàn)逡逑（１）乙醇濃度的影響逡逑由圖３－３可知，ＴＦＬ提取率隨著乙醇濃度的增加而增加，但當(dāng)乙醇濃度高于６０％時，逡逑ＴＦＬ提取率呈現(xiàn)下降趨勢，且試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，隨著乙醇濃度的加大提取液顏色由棕黃到逡逑深綠變化，推測乙醇濃度過大，色素溶出較大反而不利于黃酮類物質(zhì)的溶出，乙醇溶逡逑液濃度為６０％時，益智葉的總黃酮提取率最高；ＤＰＰＨ＊、ＡＢＴＳ＋‘清除率與總黃酮提取逡逑３６逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2825767