發(fā)布時間：2020-07-11 19:47

【摘要】：新鮮果實(shí)在采收、運(yùn)輸和貯藏過程中,易受到機(jī)械損傷。傷后迅速的木栓化是重要的愈傷過程,可以防止病原物侵染和過度失水,在維持果實(shí)采后品質(zhì)和貨架期方面發(fā)揮重要作用。此研究探究外源脫落酸(ABA)處理對采后番茄和獼猴桃果實(shí)損傷木栓化的影響及其調(diào)控機(jī)理。1.研究了 ABA誘導(dǎo)采后番茄(Solanum lycopersicum)果實(shí)損傷木栓化相關(guān)基因的差異表達(dá)。通過對損傷組織顯微觀察,發(fā)現(xiàn)ABA處理促進(jìn)損傷木栓質(zhì)多酚類(SPP)和多聚脂肪族類(SPA)物質(zhì)堆積。SPP合成途徑中的關(guān)鍵酶基因(SlPAL5和Sl4CL)的轉(zhuǎn)錄水平分別在損傷后第4天和第8天達(dá)到最大,并且ABA處理使其表達(dá)量增加更多。SPA合成途徑中重要酶的基因,SlLACS1和SlLACS2的轉(zhuǎn)錄水平分別在ABA處理后,損傷愈合的第8天和第6天達(dá)到最大。其它重要相關(guān)酶的基因轉(zhuǎn)錄水平,包括SlKCS、SlCYP86B1、SlFAR3和SlGPAT,均在ABA處理后損傷愈合第2天被顯著上調(diào)。ABA也誘導(dǎo)增強(qiáng)PPO和LOX的酶活性及其基因表達(dá)。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,ABA促進(jìn)采后番茄果實(shí)的損傷木栓化進(jìn)程,并增加相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平。2.研究了采后獼猴桃(Actinidia deliciosa)果實(shí)的損傷愈合特性。通過對損傷組織顯微觀察,確定獼猴桃果實(shí)損傷木栓化形成期為傷后2—4天。進(jìn)一步分析表明,ABA處理使損傷木栓化組織中PAL,CAD和POD的酶活性增強(qiáng)。SPP和SPA成分分析顯示,外源ABA處理使損傷愈合組織中總酚、總黃酮、烷烴,烯烴,醇,烷酸,烯酸,酯和甘油酯以及維生素E的含量增加。因此,ABA處理增加木栓質(zhì)成分積累,促進(jìn)獼猴桃損傷愈合。3.進(jìn)行了 ABA促進(jìn)獼猴桃損傷木栓化的蛋白質(zhì)組學(xué)研究。iTRAQ定量蛋白質(zhì)組分析顯示,ABA處理誘導(dǎo)95個蛋白質(zhì)豐度顯著差異,其中29個蛋白表達(dá)豐度下調(diào),66個蛋白表達(dá)豐度上調(diào)。KEGG分析和蛋白質(zhì)間互作分析顯示,ABA主要對抗氧化系統(tǒng)、苯丙烷代謝和脂類代謝產(chǎn)生影響�；诘鞍踪|(zhì)組分析結(jié)果,對其中差異手度蛋白的編碼基因進(jìn)行qRT-PCR分析。其結(jié)果與蛋白質(zhì)豐度差異類似,在轉(zhuǎn)錄水平上也存在相似差異性。由以上結(jié)果推測,分別涉及抗氧化系統(tǒng)、苯丙烷代謝和脂類代謝的GSH-Px,MDHAR,SOD,APX,POD,PAL,CCR,PPO,CYP86B1,DGGT和KCS11是損傷木栓化中ABA響應(yīng)的關(guān)鍵酶。4.探究ABA誘導(dǎo)果實(shí)損傷木栓化的分子調(diào)控機(jī)制。在獼猴桃損傷木栓化期間,一個β-酮酯酰輔酶A合成酶(KCSs)基因Achn030011(指定為AchnKCS)的轉(zhuǎn)錄水平被ABA處理顯著上調(diào)。AchnKCS亞細(xì)胞定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。通過AchnKCS啟動子序列分析,篩選并克隆得到五個可能參與調(diào)控AchnKCS轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子 Achn340751、Achn270881、Achn025721、Achn091781 和 Achnl 17821。根據(jù)它們與擬南芥轉(zhuǎn)錄因子的同源關(guān)系,將它們分別暫指定為AchnbZIP29、AchnbZIP12、AchnbZIP2、AchnbZIP62 和 AchnMYB70。酵母單雜交和雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,AchnbZIP 12和AchnMYB70能夠顯著激活A(yù)chnKCS啟動子,而AchnbZIP29抑制AchnKCS啟動子起始轉(zhuǎn)錄。損傷木栓化期間,AchnbZIP12和AchnMYB70的基因轉(zhuǎn)錄水平也受到ABA誘導(dǎo)上調(diào),并與AchnKCS的轉(zhuǎn)錄豐度變化同步。然而,ABA處理使AchnbZIP29的轉(zhuǎn)錄水平明顯下調(diào)。以上結(jié)果說明,損傷木栓化期間,AchnbZIP12和AchnMYB70在ABA誘導(dǎo)基因AchnKCS表達(dá)中起關(guān)鍵作用。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TS255.3
【圖文】：

這些轉(zhuǎn)錄因子參與木栓化過程的直接證據(jù)還不充分，尚需深入研究。逡逑綜合以上關(guān)于木栓質(zhì)細(xì)胞定位、組成成分、合成代謝主要酶和其基因表達(dá)調(diào)逡逑控等研究，木栓質(zhì)的合成通路及其運(yùn)輸過程如圖１．２。逡逑Ｉ１ＳＷ？：Ｃ１６：０，邋Ｃ１８：０，邋Ｃ１８：１逡逑／邐ｆＴＴ邐邐邐１邐細(xì)Ｍ邐＼逡逑／邐小邐ＬＡＣＳ邐＼逡逑Ｍ遽邋｜邐胎肪酰ＣｏＡｓ：邋Ｃ１６：０－Ｃ0Ａ，邋Ｃ１８：０－Ｃ0Ａ，邋Ｃ１８：１－ＣｏＡ逡逑邐＊邐１｜邐￣邐ＫＣＳ２０邋ＫＣＳ２．邋ＫＣＳ６邐ＣＹＰ８６Ａ３３逡逑咖啡酰－ｃ0ａ邋阿Z克徨五五危茫伲校福叮攏戾五義稀危鄭蹋茫疲粒茫錚粒簀邋危掊危鰨眶莻舅徨義希潁危掊澹疲粒義危卞危歟幔悖罰卞危潁茫伲校福叮粒常沖義希儒錢J慭－ＣｏＡ邐ｊ邐ｊ邐邐邐邋ｊ0ＹＰ８６Ｂ１逡逑ｒｚ＿＿＿ｌ邐１１邋廠佭；：畫邋ｌ邋丨二}0邋｜逡逑ＡＳＦＴ邐：邐ＧＰＡＴ｜Ｇ３Ｐ邐ｊ邋ＬＡＣＳ逡逑＿邐！邐Ｉ邋—．的邐Ｌｏ．ｕ．－＾＾－ＣＱＡ逡逑ｉ邐Ｉ邐ＧＰＡＴ邋Ｇ３Ｐ逡逑，邐ｉ邐邐ｙ逡逑！邐ｉ邐邋中－酰忇丨丨’油酯逡逑＾傶ｍ魏故？逡逑Ｕ）？羥基Ｈ魏肢醋邐ｐｉ邐ｉ邐Ｘ邋逡逑阿魏酰Ｈ？油邐凇憐叻中姒Ｅ聚物逡逑Ｉｔ＊油－ｗ■羚

本文編號：2750851