【摘要】：關(guān)節(jié)炎是一種發(fā)生在人體關(guān)節(jié)或周圍組織,由感染、創(chuàng)傷等因素引起的炎性疾病。我國的關(guān)節(jié)炎患者人數(shù)不斷上升,大約在一億以上。目前緩解關(guān)節(jié)炎的食品主要是氨基葡萄糖(Gminoglucose,GA),它主要存在于骨關(guān)節(jié)間的軟骨中,是軟骨基質(zhì)和滑液中聚氨基葡萄糖的重要組成成分。表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)是強有力的抗氧化劑和免疫調(diào)節(jié)劑,可有效抑制炎癥。本課題旨在構(gòu)建乳清蛋白(lactalbumin,WP)納米載體,增強GA與EGCG抗關(guān)節(jié)炎效應(yīng)。通過研究發(fā)現(xiàn),相較于單獨使用的EGCG和GA,將兩者聯(lián)用時,對骨關(guān)節(jié)炎細胞(HFLS-OA)和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎細胞(HFLS-RA)的抑制活性顯著增強(P0.05);當(dāng)濃度在0.4-0.8 mg·mL~(-1)時,抑制活性相對最好(HFLS-OA為62.9%、HFLS-RA為72.2%);將EGCG-GA偶聯(lián)WP制備納米復(fù)合物,相對于沒有納米復(fù)合的EGCG-GA聯(lián)合物,其對HFLS-OA和HFLS-RA的抑制活性分別提升了7.6%和5.7%;當(dāng)EGCG-GA-WP三者的質(zhì)量比在1:2:8時,納米復(fù)合物對關(guān)節(jié)炎細胞的抑制活性(HFLS-OA為70.5%、HFLS-RA為77.8%)、載藥量(EGCG為86.8%,GA為98.2%)以及穩(wěn)定性最好。體外模擬人體胃液環(huán)境,納米復(fù)合物中的EGCG相較于未復(fù)合的EGCG穩(wěn)定性增強顯著(P0.05),體外模擬的人體腸液環(huán)境,納米復(fù)合物中的EGCG相較于未復(fù)合的EGCG穩(wěn)定性增強極顯著(P0.01)。體外模擬人體胃腸液環(huán)境,納米復(fù)合物中的EGCG在120 min時的釋放率分別為16.7%和19.4%,均較為緩慢,說明在到達腸道的EGCG-GA-WP納米復(fù)合物中的EGCG大部分還是以納米的形式被吸收。將EGCG-GA-WP納米復(fù)合物進行冷凍干燥處理后,相對于溶液狀態(tài)下的納米復(fù)合物其儲藏性能提高極顯著(P0.01)。在SD大鼠關(guān)節(jié)炎模型實驗中,EGCG-GA-WP納米復(fù)合物對大鼠關(guān)節(jié)癥狀的緩解作用與陽性對照組塞來昔布相比沒有差異性(P0.05)。但相較于EGCG-GA-WP納米復(fù)合物,塞來昔布會對大鼠機體造成一定的毒性,且差異極顯著(P0.01);其次,對比GA用藥,EGCG-GA-WP納米復(fù)合物對關(guān)節(jié)炎癥狀的緩解效果顯著增強(P0.05),說明兩者聯(lián)合使用發(fā)揮了更好的作用。
【學(xué)位授予單位】：浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TB383.1;TS201.4;R684.3
【圖文】：

圖.省曰{)HFLS-R決

圖 2-2 不同 GA 濃度對 HFLS-OA 和 HFLS-RA 細胞活力的影響（48h，MTT）Figure 2-2 Effect of different GAconcentrations on the activity of HFLS-OAand HFLS-RAcells(48h, MTT)2.3.3 EGCG-GA 不同配比對關(guān)節(jié)炎細胞抑制效果的影響按上述方法實驗并對實驗結(jié)果處理和計算得出兩種關(guān)節(jié)炎細胞暴露于 EGCG-GA不同濃度配比下的細胞活力。如圖 2-3 所示，EGCG-GA 對 HFLS-OA 細胞、HFLS-RA 細胞均具有一定的抑制性，并且在一定范圍內(nèi)隨著兩者濃度的升高，對兩種細胞的抑制活性顯著增強（P<0.05）。當(dāng)濃度達到 0.4-0.8mg·mL-1時，細胞抑制活性接近于最高值，繼續(xù)增加 EGCG-GA 的濃度對兩種細胞的抑制活性均沒有明顯性增強（P>0.05）。當(dāng) GA 濃度在 0.4-0.8mg·mL-1時，對 HFLS-OA 細胞（62.9%）和 HFLS-RA 細胞（72.2%）的抑制性相對最好。相對于單獨使用的 EGCG 和 GA，兩者聯(lián)合對 HFLS-

第二章 EGCG-GA 聯(lián)用對關(guān)節(jié)炎細胞抑制活性研究強。另外，EGCG 作為植物營養(yǎng)素的一種，已被 Salahuddin[82]、Ohishi 等人[83]證實具有抗炎效應(yīng)。因此，綜合前人實驗研究成果與本文實驗結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，植物多酚營養(yǎng)素 EGCG 與 GA 聯(lián)合使用時，可以發(fā)揮更好的效應(yīng)。

【相似文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 吳敏;EGCG-GA-WP納米復(fù)合物的構(gòu)建及其對關(guān)節(jié)炎抑制活性[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2019年

本文編號：2750949