【摘要】：食品中毒事件這些年來越來越頻繁的發(fā)生在我們身邊,目前,保證食品的質(zhì)量與安全越來越迫切,它已經(jīng)成為世界各媒體和公眾重點關(guān)注的問題。在20世紀(jì)80年代末,各個地方不斷發(fā)生了引起世界人民慌恐的“瘦肉精”事件,其事件的直接原因是動物食品中殘留有“瘦肉精”,人們食用后出現(xiàn)了急性中毒癥狀,因此對我們平時生活中的各種肉類產(chǎn)品,迫切需要進行“瘦肉精”快速檢測。該論文建立了一種新型的納米金復(fù)合探針,該探針通過生物素鏈霉親和素作用將辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)修飾在復(fù)合探針表面,形成酶標(biāo)納米金復(fù)合探針,并且將該探針在免疫技術(shù)方面進一步發(fā)展與延伸,使其可以更好地應(yīng)用于檢測第二代瘦肉精萊克多巴胺。該方法是把抗體用生物素進行標(biāo)記后,組合在納米金表面,鏈霉親和素 生物素可以特異識別HRP,因此HRP能夠與納米金相結(jié)合,從而合成酶聯(lián)納米金復(fù)合探針。使用這種方法,單個納米金復(fù)合探針攜帶約15個HRP分子。再和磁珠技術(shù)應(yīng)用在一起,可以把這種納米金復(fù)合探針用在萊克多巴胺的檢測。萊克多巴胺作為目標(biāo)物,該方法通過抗原抗體的識別作用,將磁性探針,萊克多巴胺,酶標(biāo)納米金復(fù)合探針三者競爭作用,形成磁性復(fù)合物,辣根過氧化酶對底物進行催化反應(yīng),使其發(fā)生顏色變化從而發(fā)出光學(xué)信號。與傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)進行比較后,我們發(fā)現(xiàn)這種新型復(fù)合探針的免疫方法靈敏度提高了10倍,而且檢測限達(dá)1.42 ng·L~(-1),它不僅具有靈敏度高的特點,而且特異性好。利用酶標(biāo)納米金探針法和ELISA法對牛肉,豬肉和羊肉樣品進行萊克多巴胺的添加回收實驗,添加水平為1ng·g~(-1),5 ng·g~(-1)和10 ng·g~(-1),我們得到添加回收率介于78.5%～93.4%,RSD的范圍是11.6%～19.3%之間,這一結(jié)果說明了該方法具有比較好的精密度和較高的準(zhǔn)確度。和傳統(tǒng)的ELISA檢測方法進行相關(guān)性對比后,能夠發(fā)現(xiàn)酶標(biāo)納米金探針法和傳統(tǒng)ELISA的線性關(guān)系比較好。證實了基于酶標(biāo)納米金復(fù)合探針的免疫分析方法的可靠性。
【學(xué)位授予單位】：河北北方學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：O657.3;TS207.3

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本文編號：2727177