東北刺人參(Oplopanax elatusNakai)屬于五加科植物,具有珍貴的藥用價值,其生長條件嚴(yán)格,野生資源少,現(xiàn)因人為的過度采挖,導(dǎo)致野生資源日益減少,影響產(chǎn)品的開發(fā)利用。利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)通過大量培養(yǎng)東北刺人參不定根用于產(chǎn)品開發(fā)和生產(chǎn)具有重要意義。研究表明東北刺人參不定根中含有黃酮、多酚和多糖等多種有效活性成分,具有抗氧化、抗炎和抗癌等藥理活性,但東北刺人參不定根抑制黑色素方面并沒有相關(guān)報道。因此,本研究采用生化酶學(xué)法和細(xì)胞學(xué)法探究了東北刺人參不定根對黑色素抑制的影響,旨在為美白化妝品領(lǐng)域提供一種新型植物材料。酪氨酸酶是黑色素形成的關(guān)鍵酶。在生化酶學(xué)研究中,以陽性對照曲酸為樣品,研究酶促反應(yīng)條件對酪氨酸酶活性的影響,篩選出最佳的反應(yīng)條件,即:底物多巴濃度為1mmol·L-1,酪氨酸酶濃度為50U·mL-1,水浴0min,酶與底物反應(yīng)5min。之后,研究了不同溶劑提取物對酪氨酸酶活性的影響,結(jié)果表明乙醇提取物對酪氨酸酶活性的抑制作用最強(qiáng),IC5o為0.39mg·mL-1。利用單因素試驗方法研究了提取溫度、提取次數(shù)、提取時間及料液比對酪氨酸酶活性的影響,進(jìn)一步利用正交試驗方法對...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１小鼠黑色素瘤細(xì)胞??Ｆｉｇ．?１?Ｂ１６－Ｆ１０?ｃｅｌｌｓ??

和１％雙抗的細(xì)胞培養(yǎng)基（ＤＭＥＭ）中培養(yǎng)。細(xì)胞呈對數(shù)生長時，用磷酸鹽緩沖??液（ＰＢＳ）沖洗，０．２５％胰蛋白酶消化，置于飽和濕度培養(yǎng)箱（５％Ｃ０２）中，３７°Ｃ??下培養(yǎng)。細(xì)胞傳代三次（圖１）后應(yīng)用于試驗中。??找喊斂．ｗ麵，．騎??霉飲：４，瑪■??圖１小鼠黑色素瘤細(xì)胞??Ｆ....

圖３酪氨酸酶濃度對酪氨酸酶活性抑制的影響??

延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文氨酸酶濃度的影響??促反應(yīng)（曲酸－多巴－酪氨酸酶）中，酪氨酸酶的濃度??酸酶活性也很大有影響（圖４）。當(dāng)酪氨酸酶濃度從２５?Ｕｍ?ｍＬ－１時抑制率急劇增力卩，從５０．３９％增加至６５．３５％，濃度繼時，曲酸對酪氨酸酶活性的抑制率趨于平穩(wěn)。這表明曲酸制率與加入的....

圖４水浴時間對酪氨酸酶活性抑制的影響??注：數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（ｎ＝３）??

２．１．１．２酪氨酸酶濃度的影響??在酶促反應(yīng)（曲酸－多巴－酪氨酸酶）中，酪氨酸酶的濃度??對酪氨酸酶活性也很大有影響（圖４）。當(dāng)酪氨酸酶濃度從２５?Ｕｍｌ／１逐漸增加??到５０?Ｕ?ｍＬ－１時抑制率急劇增力卩，從５０．３９％增加至６５．３５％，濃度繼續(xù)增加至１２５??Ｕ－ｍｌ／....

圖５反應(yīng)時間對酪氨酸酶活性抑制的影響??注：數(shù)值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差（ｎ＝３）??

２．１．１．４反應(yīng)時間的影響??在研宄不同反應(yīng)時間對酪氨酸酶活性的影響時，反應(yīng)時間分別設(shè)定為１？９??ｍｉｎ時，酪氨酸酶活性的抑制率變化如圖５所示。結(jié)果可知，反應(yīng)時間由１?ｍｉｎ??增加到５ｍｉｎ時，曲酸對酪氨酸酶活性的抑制率逐漸增大，從４３．７％增大到??７１．４％，當(dāng)反應(yīng)時間....

本文編號：4021239