三陰性乳腺癌是一種高侵襲性的乳腺癌亞型,由于缺乏雌激素受體、孕激素受體以及人表皮生長(zhǎng)因子受體的表達(dá),目前尚無(wú)安全有效的治療方式。白藜蘆醇是一種從植物中提取的天然多酚類物質(zhì),大量存在于葡萄、花生等食物中,研究表明其對(duì)三陰性乳腺癌有著良好的生物活性。然而白藜蘆醇的水溶性差,生物利用度低,使得它的生物活性以及在臨床上的應(yīng)用嚴(yán)重受到限制。為了改善白藜蘆醇的水溶性,提高其對(duì)三陰性乳腺癌的抗腫瘤活性,本研究中合成了氧化介孔碳納米粒,對(duì)白藜蘆醇進(jìn)行負(fù)載,構(gòu)建了白藜蘆醇的納米遞送體系,并探究其體外治療三陰性乳腺癌的效果。1.通過一步水溶液法合成了介孔碳納米粒,并對(duì)介孔碳納米粒進(jìn)行了氧化修飾。利用動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)、氣體吸附分析儀、透射電鏡、掃描電鏡等確定了介孔碳納米粒的粒徑、介孔參數(shù)以及形貌,通過紅外光譜分析對(duì)氧化前后介孔碳表面基團(tuán)的變化進(jìn)行了研究。進(jìn)一步地,采用在水中的分散度分析對(duì)氧化后介孔碳納米粒的親水性和分散性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。研究結(jié)果表明,構(gòu)建的氧化介孔碳納米粒粒徑分布均一,比表面積和孔容量較大,親水性和分散性良好,可以作為白藜蘆醇的遞送載體。2.以氧化介孔碳納米粒為載體,篩選出最優(yōu)的載藥條件,通過旋轉(zhuǎn)蒸...

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 三陰性乳腺癌的研究進(jìn)展
        1.1.1 三陰性乳腺癌概述
        1.1.2 三陰性乳腺癌的治療
            1.1.2.1 乳房腫瘤切除術(shù)
            1.1.2.2 化學(xué)治療和放射治療
            1.1.2.3 免疫治療
            1.1.2.4 基于ncRNA的治療
    1.2 白藜蘆醇在TNBC中的研究進(jìn)展
        1.2.1 植物化學(xué)物質(zhì)在乳腺癌中的研究進(jìn)展
        1.2.2 白藜蘆醇在TNBC中的研究進(jìn)展
    1.3 白藜蘆醇納米遞送系統(tǒng)的發(fā)展和應(yīng)用
        1.3.1 納米遞送系統(tǒng)概述
        1.3.2 白藜蘆醇納米遞送系統(tǒng)的發(fā)展和應(yīng)用
            1.3.2.1 脂質(zhì)體
            1.3.2.2 聚合物納米粒
            1.3.2.3 固體脂質(zhì)納米粒
    1.4 介孔碳納米材料的發(fā)展和應(yīng)用
    1.5 本論文研究?jī)?nèi)容
第二章 氧化介孔碳納米載體的合成
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        2.2.3 溶液的配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        2.3.1 空白介孔碳的合成
        2.3.2 空白介孔碳的氧化
        2.3.3 粒徑表征
        2.3.4 Zeta電位表征
        2.3.5 N₂-等溫吸脫附曲線
        2.3.6 形貌表征
            2.3.6.1 TEM表征
            2.3.6.2 SEM表征
        2.3.7 紅外光譜分析
        2.3.8 分散度分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 MCNs和 oMCNs的構(gòu)建與表征
            2.4.1.1 粒徑和zeta電位
            2.4.1.2 形貌
            2.4.1.3 介孔分析
        2.4.2 MCNs和 oMCNs表面基團(tuán)分析
        2.4.3 MCNs和 oMCNs在水中的分散度分析
    2.5 本章小結(jié)
第三章 負(fù)載白藜蘆醇介孔碳納米體系的構(gòu)建與表征
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        3.3.1 介孔碳納米粒對(duì)白藜蘆醇的負(fù)載(oMCNs-RES)
        3.3.2 白藜蘆醇含量測(cè)定方法的建立
            3.3.2.1 白藜蘆醇檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
            3.3.2.2 白藜蘆醇儲(chǔ)備液的制備
            3.3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
            3.3.2.4 精密度考察
        3.3.3 載藥率的測(cè)定
        3.3.4 單因素考察oMCNs對(duì) RES的最佳載藥率
            3.3.4.1 不同溶劑
            3.3.4.2 不同藥物/材料比例
        3.3.5 粒徑表征
        3.3.6 Zeta電位表征
        3.3.7 形貌表征
            3.3.7.1 掃描電鏡表征
            3.3.7.2 透射電鏡表征
        3.3.8 N₂-等溫吸脫附曲線
        3.3.9 傅里葉紅外光譜分析
        3.3.10 熱重分析
        3.3.11 X-射線衍射分析
        3.3.12 差示掃描量熱分析
        3.3.13 溶解度測(cè)試
        3.3.14 釋放度測(cè)試
        3.3.15 數(shù)據(jù)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.4.2 精密度考察
        3.4.3 最佳載藥條件的摸索
            3.4.3.1 溶劑的選擇
            3.3.3.2 藥物/材料比的選擇
        3.4.4 納米粒的表征
            3.4.4.1 粒徑和Zeta電位
            3.4.4.2 形貌
            3.4.4.3 N₂-等溫吸脫附曲線
            3.4.4.4 紅外光譜分析
            3.4.4.5 熱重分析
            3.4.4.6 XRD分析
            3.4.4.7 DSC分析
        3.4.5 溶解度測(cè)定
        3.4.6 藥物釋放分析
    3.5 本章小結(jié)
第四章 氧化介孔碳納米載體負(fù)載白藜蘆醇對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞的體外作用研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
        4.2.3 細(xì)胞系
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
        4.3.1 溶液的配制
        4.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
            4.3.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇
            4.3.2.2 細(xì)胞傳代
            4.3.2.3 細(xì)胞凍存
        4.3.3 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)空白o(hù)MCNs的生物安全性
        4.3.4 激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)oMCNs進(jìn)入MDA-MB-231 細(xì)胞的能力
        4.3.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)oMCNs進(jìn)入MDA-MB-231 細(xì)胞的情況
        4.3.6 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231 細(xì)胞的活性
        4.3.7 Annexin V-FITC雙染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231 細(xì)胞的凋亡情況
        4.3.8 Tunel染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231 細(xì)胞的凋亡情況
        4.3.9 Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)
            4.3.9.1 細(xì)胞處理和蛋白抽提
            4.3.9.2 BCA法測(cè)定蛋白濃度
            4.3.9.3 SDS-PAGE電泳
            4.3.9.4 轉(zhuǎn)膜
            4.3.9.5 封閉
            4.3.9.6 孵育抗體
            4.3.9.7 顯影
        4.3.10 數(shù)據(jù)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.4.1 MTT法檢測(cè)空白納米載體的細(xì)胞相容性
        4.4.2 MDA-MB-231 細(xì)胞對(duì)oMCNs的攝取
        4.4.3 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231 細(xì)胞毒性作用
        4.4.4 Annexin V-FITC雙染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231 細(xì)胞的凋亡情況
        4.4.5 Tunel染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MDA-MB-231 細(xì)胞的凋亡情況
        4.4.6 Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)相關(guān)凋亡蛋白的表達(dá)的影響
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀博士/碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號(hào)：4015554