發(fā)布時間：2023-01-12 10:34

　　鳶尾酮是香料用鳶尾的特征香氣成分,在日用化妝品、煙草和食品等行業(yè)中有廣泛應(yīng)用。傳統(tǒng)植物提取法需要以陳化2-3年的鳶尾根莖為原材料,存在生產(chǎn)周期長、產(chǎn)物得率低、生產(chǎn)成本高等問題。本課題從鳶尾根莖中分離并鑒定產(chǎn)香微生物,開展用新鮮根粉為原料發(fā)酵生產(chǎn)鳶尾酮的研究,并進(jìn)行了以假紫羅蘭酮為底物合成鳶尾酮探索性實(shí)驗(yàn)。（1）從陳化鳶尾根莖中分離到15株細(xì)菌和8株真菌,經(jīng)高效液相色譜法（HPLC）和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）分析菌株的發(fā)酵產(chǎn)物,獲得一株可以產(chǎn)生順式α-鳶尾酮的細(xì)菌。16S rDNA分子生物學(xué)鑒定結(jié)果表明,該菌株與簡單芽孢桿菌（Bacillus simplex strain）同源性高達(dá)99%,將其命名為YWT-5。（2）以新鮮鳶尾根粉為原料發(fā)酵生產(chǎn)鳶尾酮,優(yōu)化了主要發(fā)酵工藝參數(shù)。在含甘油10g/L,蛋白胨10 g/L,磷酸二氫鉀1g/L,磷酸氫二鉀1.5 g/L,氯化鈉1 g/L,七水硫酸鎂0.5 g/L,氯化鈣0.05 g/L的培養(yǎng)基中,添加新鮮鳶尾根粉至終濃度5 g/L,28℃、200 rpm條件下發(fā)酵24 h后順式α-鳶尾酮的搖瓶產(chǎn)量達(dá)315.95mg·kg-1。10L發(fā)酵罐... 

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 鳶尾酮研究進(jìn)展
        1.2.1 鳶尾酮的分類及理化性質(zhì)
        1.2.2 鳶尾酮的合成
        1.2.3 鳶尾酮的應(yīng)用
    1.3 背景及主要研究內(nèi)容
        1.3.1 選題背景
        1.3.2 主要內(nèi)容及研究方法
第二章 鳶尾酮生香菌的篩選及鑒定
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 培養(yǎng)基
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 菌種分離
        2.3.2 菌種篩選
        2.3.3 菌種保藏
        2.3.4 鳶尾酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        2.3.5 鳶尾酮揮發(fā)性的研究
        2.3.6 產(chǎn)物的提取
        2.3.7 HPLC及GC-MS定性分析
        2.3.8 發(fā)酵產(chǎn)物中鳶尾酮的位置探究
        2.3.9 菌種鑒定方法
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        2.4.1 α-鳶尾酮標(biāo)準(zhǔn)曲的建立
        2.4.2 鳶尾酮揮發(fā)性對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
        2.4.3 菌種分離及篩選
        2.4.4 菌種鑒定
            2.4.4.1 形態(tài)特征
            2.4.4.2 分子生物學(xué)鑒定及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
    2.5 本章小結(jié)
第三章 培養(yǎng)條件對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 試劑
        3.2.2 培養(yǎng)基
        3.2.3 儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 搖瓶參數(shù)優(yōu)化
            3.3.1.1 碳源氮源對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.3.1.2 培養(yǎng)轉(zhuǎn)速對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.3.1.3 培養(yǎng)溫度對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.3.1.4 培養(yǎng)時間對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.3.1.5 根粉添加量對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
        3.3.2 10 L發(fā)酵罐培養(yǎng)
            3.3.2.1 發(fā)酵種子液
            3.3.2.2 發(fā)酵培養(yǎng)基
            3.3.2.3 發(fā)酵方法
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 搖瓶實(shí)驗(yàn)
            3.4.1.1 碳源氮源對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.4.1.2 轉(zhuǎn)速對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.4.1.3 溫度對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.4.1.4 發(fā)酵時間對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.4.1.5 鳶尾根粉添加量對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
        3.4.2 發(fā)酵罐上罐結(jié)果
            3.4.2.1 培養(yǎng)基對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
            3.4.2.2 上罐對鳶尾酮產(chǎn)量的影響
    3.5 本章小結(jié)
第四章 假紫羅蘭酮生物合成鳶尾酮的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 培養(yǎng)基
        4.2.3 儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 假紫羅蘭酮溶解度探究
        4.3.2 細(xì)菌初篩
        4.3.3 細(xì)菌復(fù)篩
        4.3.4 發(fā)酵產(chǎn)物提取
        4.3.5 發(fā)酵產(chǎn)物分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 假紫羅蘭酮溶解度
        4.4.2 微生物的篩選
            4.4.2.1 菌株初篩
            4.4.2.2 菌株復(fù)篩
            4.2.2.3 發(fā)酵產(chǎn)物L(fēng)C-MS分析
    4.5 本章小結(jié)
第五章 一株生香真菌的分離及鑒定
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        5.2.2 培養(yǎng)基
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 菌種分離
        5.3.2 生香真菌篩選
        5.3.3 菌種鑒定
            5.3.3.1 菌種形態(tài)觀察
            5.3.3.2 目的基因的的擴(kuò)增
            5.3.3.3 目的基因的測序及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        5.3.4 產(chǎn)物的提取
        5.3.5 GC-MS定性分析
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        5.4.1 菌種篩選和鑒定
            5.4.1.1 菌種篩選
            5.4.1.2 形態(tài)特征
            5.4.1.3 18S rRNA分子生物學(xué)鑒定及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        5.4.2 發(fā)酵產(chǎn)物鑒定
    5.5 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)及展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]索氏提取法制備高純度色酮[J]. 王穎,彭飛宏,徐文,褚朝森,王曉麗.  精細(xì)與專用化學(xué)品. 2018(09)
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[3]1-辛烯-3-醇的合成工藝優(yōu)化研究[J]. 張雷亮,李晟,郭鴿,宗彥萍,閆培良,王廣林.  山東化工. 2017(02)
[4]山蒼子油活性成分對木材真菌的抑制作用[J]. 郭丹,李兆雙,王鵬,陳尚钘,范國榮,王宗德.  林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè). 2016(03)
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[8]以甘油為碳源分批補(bǔ)料高密度發(fā)酵產(chǎn)環(huán)氧化物水解酶[J]. 陳冠宇,袁建鋒,吳綿斌,林建平,楊立榮.  高�；瘜W(xué)工程學(xué)報. 2014(03)
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博士論文
[1]五葉草莓色素合成的基因調(diào)控與香味分析[D]. 段文凱.浙江工業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]角質(zhì)降解細(xì)菌篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 梁爭文.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[2]四種香料植物內(nèi)生及根際菌中產(chǎn)香功能菌株的篩選及鑒定[D]. 儲曉.云南大學(xué) 2016
[3]內(nèi)生真菌Epichlo? bromicola菌種分離鑒定及其發(fā)酵物對擬南芥幼苗生長的影響[D]. 文先.內(nèi)蒙古大學(xué) 2015
[4]煙色煙管菌誘變提高漆酶產(chǎn)量的研究[D]. 彭滟鈔.中南林業(yè)科技大學(xué) 2014
[5]椪柑精油及其抑菌組分對柑橘采后青、綠霉菌的作用[D]. 賈雷.湘潭大學(xué) 2013
[6]香料用鳶尾引種及鳶尾酮定量分析研究[D]. 韓桂軍.西北大學(xué) 2013
[7]假紫羅蘭酮的工業(yè)制備過程研究[D]. 趙長明.北京化工大學(xué) 2000



本文編號：3729804