膠原蛋白（Collagen,COL）為動物組織成分,具有良好的可降解性、生物相容性以及低抗原活性。細(xì)菌纖維素（Bacterial cellulose,BC）具有的高結(jié)晶度、三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、良好的生物相容性和可降解性使其在生物醫(yī)藥領(lǐng)域受到了普遍關(guān)注。本論文基于組織工程技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用前景及多孔微球作為組織工程支架所具有的優(yōu)勢,以COL和BC為基體構(gòu)建了具有多級結(jié)構(gòu)及成分的COL/BC功能性多孔微球,對該微球藥物吸附及釋放行為進行了研究,并對其在骨組織工程中的應(yīng)用進行了初探。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:（1）采用酸膨脹-胃蛋白酶水解法,從豬皮中提取I型COL,同時采用SDS-PAGE、CP/MSA ¹³C NMR、FT-IR、XRD、TGA及SEM等現(xiàn)代分析技術(shù)對提取產(chǎn)物進行性能檢測及表征。最優(yōu)提取工藝為:異丙醇作為脫脂劑、w_皮塊:V_脫脂劑=1:10、胃蛋白酶用量5.0 wt%、胃蛋白酶水解時間60 h、鹽析NaCl濃度1.1 mol/L,此條件下COL提取率為86.63%。所提取的豬皮COL具有一定纖維結(jié)構(gòu),含有COL特征官... 

【文章頁數(shù)】：180 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮寫說明
1 前言
    1.1 組織工程概述
    1.2 組織支架材料
        1.2.1 天然高分子材料在組織工程中的應(yīng)用
        1.2.2 人工合成材料在組織工程中的應(yīng)用
        1.2.3 復(fù)合材料在組織工程中的應(yīng)用
        1.2.4 納米材料在組織工程中的應(yīng)用
    1.3 細(xì)菌纖維素與膠原蛋白
        1.3.1 細(xì)菌纖維素
        1.3.2 膠原蛋白
        1.3.3 BC/COL復(fù)合材料
    1.4 多孔微球支架的制備方法
        1.4.1 溶劑揮發(fā)法
        1.4.2 乳液聚合法
        1.4.3 種子溶脹聚合法
        1.4.4 反相懸浮再生法
        1.4.5 噴霧干燥法
        1.4.6 其他方法
    1.5 功能性載藥多孔微球支架的制備及其載釋藥行為
        1.5.1 藥物在高分子載體中的負(fù)載
        1.5.2 藥物在高分子載體中的釋放
    1.6 論文的提出及目的意義
    1.7 論文的研究內(nèi)容
2 膠原蛋白的制備及表征
    2.1 引言
    2.2 主要試劑及儀器
        2.2.1 試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 試劑配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 COL提取工藝
        2.3.2 COL提取工藝優(yōu)化
        2.3.3 COL檢測表征
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 COL提取工藝優(yōu)化
        2.4.2 COL性能檢測
    2.5 小結(jié)
3 細(xì)菌纖維素的制備及表征
    3.1 引言
    3.2 主要試劑及儀器
        3.2.1 試劑及培養(yǎng)基
        3.2.2 儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 紅茶菌中BC生產(chǎn)菌株的分離篩選
        3.3.2 目標(biāo)菌株的形態(tài)特征、生理生化特性和16SrRNA鑒定
        3.3.3 目標(biāo)菌株發(fā)酵產(chǎn)物性能測定
        3.3.4 BC發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 目標(biāo)菌株的形態(tài)特征、生理生化特性和16SrRNA鑒定
        3.4.2 菌株G.xylinus ZHCJ618發(fā)酵產(chǎn)物檢測表征
        3.4.3 BC發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
    3.5 小結(jié)
4 COL/BC復(fù)合材料的制備及表征
    4.1 引言
    4.2 主要試劑及儀器
        4.2.1 試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 試劑配制
    4.3 實驗方法
        4.3.1 DABC的制備
        4.3.2 CDABC的制備
        4.3.3 DABC、CDABC的表征及性能檢測
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 DABC的制備
        4.4.2 CDABC的制備
        4.4.3 DABC的表征及性能檢測
        4.4.4 CDABC的表征及性能檢測
    4.5 小結(jié)
5 COL/BC多孔微球的制備及表征
    5.1 引言
    5.2 主要試劑及儀器
        5.2.1 試劑
        5.2.2 儀器
    5.3 實驗原理
        5.3.1 CDABC溶劑的選擇
        5.3.2 COL/BC多孔微球制備原理
    5.4 實驗方法
        5.4.1 COL/BC多孔微球制備工藝研究
        5.4.2 COL/BC多孔微球的表征及性能檢測
    5.5 結(jié)果與討論
        5.5.1 COL/BC多孔微球制備工藝研究
        5.5.2 COL/BC多孔微球的表征及性能
    5.6 小結(jié)
6 COL/BC多孔微球藥物吸附及釋放行為研究
    6.1 引言
    6.2 主要試劑及儀器
        6.2.1 試劑
        6.2.2 儀器
    6.3 實驗方法
        6.3.1 BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        6.3.2 COL/BC多孔微球藥物吸附行為研究
        6.3.3 COL/BC多孔微球藥物吸附熱力學(xué)行為研究
        6.3.4 COL/BC多孔微球釋藥行為研究
    6.4 結(jié)果與討論
        6.4.1 BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        6.4.2 COL/BC多孔微球藥物吸附行為研究
        6.4.3 COL/BC多孔微球藥物吸附熱力學(xué)行為研究
        6.4.4 COL/BC多孔微球釋藥行為研究
    6.5 小結(jié)
7 COL/BC多孔微球在骨組織工程中的應(yīng)用
    7.1 引言
    7.2 主要試劑及儀器
        7.2.1 試劑
        7.2.2 儀器
    7.3 實驗方法
        7.3.1 MC3T3-E1細(xì)胞模型的建立
        7.3.2 COL/BC多孔微球細(xì)胞毒性及對小鼠MC3T3-E1細(xì)胞生長增殖的影響
        7.3.3 COL/BC多孔微球?qū)π∈驧C3T3-E1細(xì)胞粘附的影響
        7.3.4 COL/BC多孔微球?qū)π∈驧C3T3-E1細(xì)胞成骨分化的影響
    7.4 結(jié)果與討論
        7.4.1 COL/BC多孔微球細(xì)胞毒性及對小鼠MC3T3-E1細(xì)胞生長增殖的影響
        7.4.2 COL/BC多孔微球?qū)π∈驧C3T3-E1細(xì)胞粘附的影響
        7.4.3 COL/BC多孔微球?qū)π∈驧C3T3-E1細(xì)胞成骨分化的影響
    7.5 小結(jié)
8 結(jié)論與展望
    8.1 結(jié)論
    8.2 創(chuàng)新性
    8.3 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果



本文編號：3671783