目的:本研究主要目的是為了明確車(chē)前草在腸道中降尿酸的作用,進(jìn)而研究其作用機(jī)制以及主要的有效成分,為醫(yī)治高尿酸血癥提供新的方向。研究方法:車(chē)前草的提取工藝及其優(yōu)化:在85攝氏度的水浴條件下用10倍藥材量的70%的乙醇水浴回流,1h/次,共回流2次,回流后用紗布過(guò)濾取濾液,將兩次的濾液集中在一起;將濾液旋蒸成浸膏,用蒸餾水來(lái)溶解浸膏后配制成100mL的水溶液;對(duì)水溶液先用石油醚萃取,萃取兩次,每次100mL,將兩次萃取的石油醚溶液收集在一起后回收重復(fù)利用;再將水層溶液用乙酸乙酯萃取兩次,每次100mL,收集兩次萃取的乙酸乙酯層的溶液,水層溶液再用正丁醇萃取兩次,每次100mL,收集兩次萃取的正丁醇層的溶液,分別將正丁醇層以及乙酸乙酯層的溶液旋蒸成浸膏,再用甲醇溶液溶解后水浴揮干,烘干。對(duì)其提取時(shí)間、溶劑濃度、溶劑用量以及提取次數(shù)進(jìn)行條件優(yōu)化然后正交實(shí)驗(yàn)出最佳提取工藝。構(gòu)建高尿酸血癥的細(xì)胞模型:本實(shí)驗(yàn)先用不同濃度的酒精去刺激IEC-6細(xì)胞,再用液相檢測(cè)細(xì)胞上清液中尿酸的含量,篩選出最佳的造模濃度和孵育時(shí)間以達(dá)到最佳的造模條件。車(chē)前草的藥效及其作用機(jī)制的研究:將車(chē)前草按照優(yōu)化后的提取工藝提取分... 

【文章來(lái)源】：華僑大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

黃酮及其苷類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)式

第2章車(chē)前草的提娶分離以及工藝的優(yōu)化192.2.2.2供試品溶液的制備分別將乙酸乙酯層以及正丁醇層提取好的樣品用1ml的甲醇溶解，再將其置于10ml容量瓶中，加甲醇約8ml，超聲使其溶解，并用甲醇定容至刻度，做為供試品溶液。2.2.2.3對(duì)照品溶液的制備用百萬(wàn)分之一的電子天平稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品1.0mg，放入10ml的容量瓶中，加入甲醇溶液8ml，超聲使其溶解，并用甲醇定容至刻度線，作為蘆丁貯備液。2.2.2.4線性關(guān)系考察蘆�。河冒偃f(wàn)分之一的電子天平精確的稱量蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品5mg，放入50ml容量瓶中，先向其加入甲醇約40ml，超聲使其溶解，并用甲醇定容至刻度，做為蘆丁儲(chǔ)備液。精密吸取0.5、1、2、4、6、8、10ml蘆丁儲(chǔ)備液至10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得濃度分別為5、10、20、40、60、80、100μg/ml的蘆丁溶液。按色譜條件，進(jìn)樣10μl,以蘆丁溶液的濃度為橫坐標(biāo)（μg/ml），峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為：y=19.163x-14.896，R2=0.9992。表明蘆丁對(duì)照品在5-100ug/mL的范圍內(nèi)濃度與峰面積具有良好的線性關(guān)系。圖2.1HPLC檢測(cè)蘆丁對(duì)照品的標(biāo)準(zhǔn)曲線2.2.2.5精密度實(shí)驗(yàn)取濃度為100μg/ml的蘆丁溶液，按2.2.2.1的色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣5次，

華僑大學(xué)碩士學(xué)位論文222.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析2.3.1單因素試驗(yàn)結(jié)果分析2.3.1.1單因素考察提取時(shí)間對(duì)車(chē)前草提取工藝的影響在85℃的水浴條件下，10倍藥材量的70%的乙醇回流提取兩次，其它因素不變，分別按照表2.3中的提取時(shí)間水平進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果如圖2.2所示。由圖2.2可知，在乙酸乙酯層以及正丁醇層中可以看出，在隨著提取時(shí)間的增加蘆丁的提取量出現(xiàn)先增加后下降的趨勢(shì)，可以看出在每次的提取時(shí)間為120min時(shí)，其蘆丁的提取量達(dá)到最值，效果最好，所以正交設(shè)計(jì)時(shí)以提取時(shí)間為2h每次作為中心值。圖2.2提取時(shí)間對(duì)車(chē)前草提取工藝的影響2.3.1.2單因素考察提取次數(shù)對(duì)車(chē)前草提取工藝的影響選在85℃的水浴條件下，10倍藥材量的70%的乙醇回流提取，每次提取時(shí)間為2h，其它因素不變，分別按照表2.3中的提取次數(shù)水平進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果如圖2.3所示。從圖2.3中可以看出在乙酸乙酯層中蘆丁的提取量在提取2次時(shí)達(dá)到最值，而正丁醇層出現(xiàn)一直上升的趨勢(shì)，但是可以發(fā)現(xiàn)提取，兩次與提取三次的蘆丁含量差別并不是很大，如果從工藝的角度上看提取兩次的效果最佳。所以正交設(shè)計(jì)時(shí)以提取次數(shù)為2次為中心值。


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