2S白蛋白（2S albumin）是一種廣泛分布于植物種子中的低分子量儲藏蛋白。該蛋白含有8個保守半胱氨酸殘基,根據(jù)自身特性可形成兩個分子間二硫鍵和兩個分子內(nèi)二硫鍵,使所屬蛋白質(zhì)具有穩(wěn)定和緊密的結(jié)構(gòu),而且該蛋白具有較好的熱穩(wěn)定性。該蛋白家族成員具有多種功能,包括抗菌、抗癌、蛋白酶抑制劑和植物防御功能等。牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）是我國特有的一種極具觀賞價值和藥用價值的芍藥屬灌木,具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗凝血、降血糖等功效。牡丹籽粕作為牡丹籽榨油后的副產(chǎn)物,含有豐富的功能性物質(zhì),其中蛋白質(zhì)是主要的功能成分之一,含量約30%左右。對牡丹籽粕功能蛋白的研究,不僅能豐富牡丹籽蛋白的基礎(chǔ)研究,而且有助于提高籽粕的附加值,延長牡丹籽的產(chǎn)業(yè)鏈。本文以牡丹籽粕為原料,從牡丹籽粕水溶性蛋白（PSMP）中分離純化出一種牡丹類2S白蛋白（Ps-2S-Alb）,利用質(zhì)譜和從頭測序技術(shù)進(jìn)行鑒定,利用生物信息學(xué)手段對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析,同時研究了其抗氧化活性。具體內(nèi)容如下:1. 牡丹籽粕水溶性蛋白提取工藝研究。以脫脂牡丹籽粕粉為原料,采用水提法提取PSMP。分別研究了提取液濃度、... 

【文章來源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

測定蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

第三章結(jié)果與討論23第三章結(jié)果與討論3.1牡丹籽粕水溶性蛋白的提取牡丹籽粕中含有20-30%的粗蛋白，是優(yōu)質(zhì)的植物蛋白質(zhì)來源。從牡丹籽粕中提取蛋白質(zhì)，不僅可以解決植物蛋白資源短缺的問題，同時還可以實現(xiàn)牡丹籽粕的綜合利用，提高牡丹經(jīng)濟(jì)價值。采用稀鹽和緩沖系統(tǒng)的水溶液是提取蛋白質(zhì)最常用的方法，該方法具有對蛋白質(zhì)穩(wěn)定性好、溶解度大、可保存被蛋白質(zhì)生物活性等優(yōu)點。影響蛋白質(zhì)提取率的因素主要有：溫度、鹽濃度、料液比、勻漿時間等。本文主要考察提取液濃度、料液比和勻漿時間對蛋白提取率的影響，通過優(yōu)化條件來提高蛋白質(zhì)的提取率。3.1.1單因素試驗(1)料液比對蛋白提取率的影響。結(jié)果見圖3-1，料液比在1:16~1:4范圍內(nèi)，PSMP的提取率隨料液比的增大呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢，當(dāng)料液比達(dá)到1:8時，提取率最大為40.53%。隨著料液比繼續(xù)增大，蛋白提取率呈現(xiàn)下降的趨勢，該現(xiàn)象是由于在低料液比時，牡丹籽粕粉粘稠，無法與水充分混合，分子運(yùn)動和擴(kuò)散能力較差，溶解能力較低，牡丹籽粕中的蛋白質(zhì)較難分離出來。因此最終確定提取PSMP最佳料液比為1:8。圖3-1料液比對PSMP提取率的影響Fig.3-1Effectofsolid-to-liquidratioonextractionrateofPSMP(2)勻漿時間對蛋白提取率的影響。如圖3-2所示，在勻漿時間為60~180s內(nèi)，PSMP的提取率先增大后減校在勻漿時間為120s時，PSMP提取率達(dá)到最大為51.28%。當(dāng)

西北大學(xué)碩士學(xué)位論文24繼續(xù)增加勻漿時間時，PSMP提取率會逐漸降低，這可能是由于勻漿時間太長，勻漿機(jī)刀片發(fā)熱而導(dǎo)致部分蛋白質(zhì)變性聚沉，而造成蛋白提取率降低。故確定120s為最佳勻漿時間。圖3-2勻漿時間對PSMP提取率的影響Fig.3-2EffectofextractiontimeontheextractionrateofPSMP(3)提取液濃度對蛋白提取率的影響。在其他因素相同的條件下，考察不同提取液PBS濃度對PSMP提取率的影響。結(jié)果如圖3-3所示，在PBS濃度為0.01~0.05mol/L范圍內(nèi)，PSMP提取率先增大后減校當(dāng)PBS濃度為0.015mol/L時，PSMP提取率最大為41.04%。當(dāng)PBS濃度繼續(xù)增大時，蛋白質(zhì)提取率呈負(fù)相關(guān)。這可能是由于在蛋白質(zhì)水溶液中，加入少量的中性鹽，會增加蛋白質(zhì)分子表面的電荷，從而使蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度增大，因此PSMP在低濃度PBS中溶解度較高，故最佳提取液PBS濃度選擇0.015mol/L。圖3-3提取液濃度對PSMP提取率的影響Fig.3-3EffectofextractconcentrationontheextractionrateofPSMP


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