(R,R)-2,3-丁二醇是一種重要的大宗平臺化合物,有廣泛的應(yīng)用價(jià)值和前景。生物發(fā)酵法合成（R,R）-2,3-丁二醇因其原料可再生、反應(yīng)友好的優(yōu)勢而引起廣大科研人員的關(guān)注與研究。前期的研究主要是從環(huán)境中篩選高產(chǎn)（R,R）-2,3-丁二醇的菌株,隨著合成生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,以代謝工程和基因工程的技術(shù)手段為支撐,構(gòu)建高產(chǎn)（R,R）-2,3-丁二醇微生物細(xì)胞工廠是一種行之有效的途徑。本研究以大腸桿菌（Escherichia coli MG1655）作為底盤細(xì)胞,對細(xì)胞主代謝途徑、副產(chǎn)物合成途徑進(jìn)行系統(tǒng)分析,利用代謝工程策略對關(guān)鍵代謝節(jié)點(diǎn)進(jìn)行合理的遺傳改造,使用合成生物學(xué)策略設(shè)計(jì)和構(gòu)建（R,R）-2,3-丁二醇的人工合成途徑并導(dǎo)入底盤細(xì)胞獲得高產(chǎn)光學(xué)純（R,R）-2,3-丁二醇的微生物細(xì)胞工廠,并進(jìn)行發(fā)酵參數(shù)和補(bǔ)料工藝優(yōu)化。主要內(nèi)容和研究結(jié)果如下:（1）對合成副產(chǎn)物相關(guān)的一些關(guān)鍵酶基因（丁二酮還原酶基因dar、富馬酸還原酶基因frd ABCD、丙酮酸甲酸裂解酶基因pfl B、乙醇脫氫酶基因adh E、乳酸脫氫酶基因ldh A、磷酸烯醇丙酮酸合酶基因pps和磷酸乙酰轉(zhuǎn)移酶基因pta）進(jìn)行敲除改造... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

(R,R)-2,3-丁二醇的各種用途Figure1-2Varioususesof(R,R)-2,3-butanediol在化工方面，(R,R)-2,3-丁二醇經(jīng)過脫水作用生成的甲基乙基酮可以作為一種良好的

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文高產(chǎn)光學(xué)純(R,R)-2,3-丁二醇細(xì)胞工廠的構(gòu)建及發(fā)酵條件優(yōu)化12圖1-3(R,R)-2,3-丁二醇細(xì)胞工廠構(gòu)建策略Figure1-3(R,R)-2,3-butanediolcellfactoryconstructionstrategy3、以廉價(jià)的農(nóng)副產(chǎn)品棉籽粉和廣西特色的非糧木薯粉為原料，采用α-淀粉酶、糖化酶和蛋白酶的復(fù)合酶對原料進(jìn)行酶解，進(jìn)一步在發(fā)酵罐水平上對微生物發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化，探討不同的溫度、通氣量、pH值等環(huán)境參數(shù)對發(fā)酵產(chǎn)(R,R)-2,3-丁二醇的影響，提高(R,R)-2,3-丁二醇產(chǎn)量和得率。4、對分批補(bǔ)料發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化。

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文高產(chǎn)光學(xué)純(R,R)-2,3-丁二醇細(xì)胞工廠的構(gòu)建及發(fā)酵條件優(yōu)化15表2-2本研究所用到的質(zhì)粒Table2-2Plasmidswasusedinthestudy質(zhì)粒性質(zhì)來源pTrC99A大腸桿菌表達(dá)載體，Trc啟動(dòng)子，氨芐青霉素抗性實(shí)驗(yàn)室保藏pTrc99A-budB-budA-bdh攜帶budB、budA、bdh三個(gè)基因的重組表達(dá)質(zhì)粒實(shí)驗(yàn)室保藏圖2-1質(zhì)粒pTrC99AFigure2-1PlasmidpTrC99A圖2-2質(zhì)粒pTrc99A-budB-budA-bdhFigure2-2PlasmidpTrc99A-budB-budA-bdh

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3388309