牡丹籽蛋白（Paeonia suffruticosa Andr.）因其合理的氨基酸組成和潛在的功能特性而被認(rèn)為在食品工業(yè)中具有巨大的開(kāi)發(fā)潛力。因此,本文以牡丹籽蛋白為原料,研究了不同蛋白酶酶解對(duì)牡丹籽蛋白理化特性的影響,探討了不同蛋白酶水解物的功能特性和抗氧化活性;后將抗氧化活性較好的堿性蛋白酶水解物超濾分離得到不同分子量范圍的多肽組分,研究了堿性蛋白酶水解物不同超濾組分的結(jié)構(gòu)特征、化學(xué)抗氧化活性和對(duì)H₂O₂誘導(dǎo)的Hep G2細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。試驗(yàn)所得結(jié)果如下。（1）牡丹籽蛋白更易于堿性蛋白酶水解,并且堿性蛋白酶水解物具有較低的平均粒徑（231.33±36 nm）和分子量分布（<13 kDa）。本征熒光譜圖表明由不同蛋白酶水解得到的牡丹籽蛋白水解物λ_max發(fā)生明顯的紅移,說(shuō)明牡丹籽蛋白水解物的空間結(jié)構(gòu)打開(kāi)并有少量的芳香族氨基酸暴露。二級(jí)結(jié)構(gòu)含量表明五種蛋白酶水解使牡丹籽蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯的變化,尤其是α-螺旋結(jié)構(gòu),從15.01±0.36%減少到了5.72±0.69%-7.94±0.34%,使得牡丹籽蛋白的... 

【文章來(lái)源】：齊魯工業(yè)大學(xué)山東省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

齊魯工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文11表2.1蛋白酶酶活Table2.1Proteaseactivity酶的種類酶活堿性蛋白酶1.8×105U/g中性蛋白酶1.1×105U/g風(fēng)味蛋白酶1.8×105U/g木瓜蛋白酶0.5×105U/g復(fù)合蛋白酶0.1×105U/g2.4.2水解度（DH）堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、復(fù)合蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶水解TPSP的水解曲線如圖2.2所示。在水解前0.5h，所有蛋白酶水解TPSP的水解曲線隨時(shí)間的增加呈快速上升趨勢(shì)。在水解0.5h以后，中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、復(fù)合蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的水解進(jìn)程開(kāi)始變慢，直至4h時(shí)達(dá)到穩(wěn)態(tài)。而堿性蛋白酶的DH在0.5到4小時(shí)之間一直保持增大趨勢(shì)。水解物的DH依賴于所使用的蛋白酶。在水解4h后，TPSP經(jīng)堿性蛋白酶水解的DH最大，值為27.97%±0.47%，其次是木瓜蛋白酶（12.16%±0.05%），而中性蛋白酶（6.19%±0.23%）最低。因此，這些結(jié)果表明堿性蛋白酶對(duì)TPSP的水解能力強(qiáng)于其他四種蛋白酶。類似的當(dāng)堿性蛋白酶水解鷹嘴豆分離蛋白、小麥蛋白和綠豆蛋白時(shí)較其他蛋白酶同樣具有較高的水解能力，且DH最大值分別為14.67%、16.77%和23.51%[5,36,37]。這可能由于堿性蛋白酶屬于非特異性蛋白質(zhì)肽鍵內(nèi)切酶，在酶解肽鍵時(shí)特異性非常廣泛[5]。所以，這說(shuō)明與其他蛋白酶水解相比，堿性蛋白酶存在更多的催化位點(diǎn)用來(lái)制備生物活性肽。圖2.2TPSP的水解曲線Figure2.2ThehydrolysiscurvesofTPSP

第2章牡丹籽蛋白解產(chǎn)物的理化特性122.4.3牡丹籽蛋白水解物的粒徑分布和SDS-PAGE電泳分析圖2.3TPSP水解物的粒徑分布圖Figure2.3TheparticlesizedistributionofTPSPhydrolysates圖2.4TPSP水解物的平均粒徑Figure2.4TheparticlesizedistributionofTPSPhydrolysatesTPSP水解物的粒徑分布和平均粒徑如圖2.3和圖2.4所示。TPSP粒徑的特點(diǎn)是在100至10000nm之間廣泛分布，并且在粒徑分布（PSD）中觀察到四個(gè)峰（圖2.3）。中性蛋白酶和復(fù)合蛋白酶水解物的PSD顯示三個(gè)峰，其中一個(gè)峰的粒徑范圍>5000nm。堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解物的PSD僅在100-500nm處顯示兩個(gè)峰。堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、復(fù)合蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶水解物的平均粒徑（圖2.4）分別為231.33±36nm、346.13±31nm、296.73±25nm、336.23±27nm和364.83±34nm。顯然，與TPSP（512.06nm）相比，TPSP水解物的平均粒徑明顯減小（P<0.05）。而且堿性蛋白酶水解物的平均粒

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]酶解牡丹籽粕蛋白制備抗氧化肽的工藝優(yōu)化[J]. 閻震,郭溆,張金寶,王青,程安瑋,賀圣文,孫金月.  食品工業(yè)科技. 2018(07)
[2]牡丹籽酶解制備降血糖肽工藝的響應(yīng)面優(yōu)化[J]. 顏輝,蔡豪,賈俊強(qiáng),江明珠,吳瓊英.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(14)

碩士論文
[1]牡丹籽油及蛋白的制備及其性質(zhì)研究[D]. 龐雪風(fēng).武漢輕工大學(xué) 2014
[2]酶法制備玉米高F值寡肽及其抗疲勞活性的研究[D]. 劉金偉.山東輕工業(yè)學(xué)院 2012



本文編號(hào)：3373378