發(fā)布時(shí)間：2021-08-30 19:18

　　鐵皮石斛具有較高的藥用價(jià)值,具有“藥中黃金”、“救命仙草”的美譽(yù)。廣西植物資源豐富,但野生鐵皮石斛資源處于瀕危狀態(tài),為了更好地開發(fā)應(yīng)用鐵皮石斛,本文對(duì)廣西野生鐵皮石斛多糖進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定和活性研究。采用熱水浸提法,得到粗多糖。通過單因素實(shí)驗(yàn)確定了提取溫度、料液比及提取時(shí)間三種因素的水平,進(jìn)而通過響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)探究多糖提取的最佳條件。粗多糖經(jīng)過脫色、除蛋白,上柱分離,分別過DEAE-52纖維素柱和Sephadex G-100凝膠柱,分離純化得到兩個(gè)中性多糖組分（DOP1和DOP2）,通過原子力顯微鏡、紅外光譜、高效凝膠色譜、高效液相色譜、氣質(zhì)聯(lián)用、核磁共振對(duì)多糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,并首次在廣西鐵皮石斛中分離到一種寡糖。對(duì)DOP1進(jìn)行硫酸化和乙�；揎�,取代度分別為1.20和0.64,紅外光譜顯示具有相應(yīng)的特征峰。以抗壞血酸為對(duì)照,采用三種方法來評(píng)價(jià)多糖及其衍生物的抗氧化活性。以5-氟尿嘧啶為對(duì)照,采用MTT法考察它們對(duì)癌細(xì)胞的抑制作用。其清除率或抑制率為修飾多糖>粗多糖>純化多糖。對(duì)于不同的抗氧化實(shí)驗(yàn)或不同癌細(xì)胞,硫酸化修飾和乙�；揎椄饔懈叩�,顯示出不同的效果。本研究對(duì)鐵皮石斛多糖的功... 

【文章來源】：廣西民族大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

溫度和料液比相互

20圖2.7溫度和時(shí)間相互作用對(duì)鐵皮石斛多糖提取率的影響圖2.8料液比和時(shí)間相互作用對(duì)鐵皮石斛多糖提取率的影響2.5小結(jié)采用熱水浸提法提取多糖，實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單方便。不同多糖在不同濃度的醇溶液中溶解度不同，按80%的醇濃度沉淀得到部分粗多糖，若改變醇沉?xí)r乙醇濃度，可能仍會(huì)有多糖沉淀，而多糖具體含量還有待實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探究。冷凍干燥得到粗多糖，提取率31.65%，高于其他品種的石斛多糖提取率；多糖含量42%，需進(jìn)行純化工作。對(duì)影響多糖得率的四種因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，根據(jù)結(jié)果確定了提取溫度、料液比及提取時(shí)間三種因素的水平，進(jìn)而通過響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)探究提取率的最佳條件。利用Design-Expert軟件得到提取模型，提取溫度一次項(xiàng)、提取溫度二次項(xiàng)、料液比一次項(xiàng)、料液比二次項(xiàng)、時(shí)間二次項(xiàng)、溫度與料液比項(xiàng)極顯著，時(shí)間一次項(xiàng)、溫度時(shí)間項(xiàng)顯著，料液比時(shí)間項(xiàng)不顯著。根據(jù)F值可知各因素對(duì)多糖得率的影響大小順序?yàn)椋毫弦罕?gt;溫度>時(shí)間。通過3D曲面和等高線分析驗(yàn)證，溫度和料液比相互作用對(duì)鐵皮石斛多糖的提取率影響極顯著，溫度和時(shí)間相互作用對(duì)多糖得率顯著，而料液比和時(shí)間相互作用對(duì)多糖得率影響不顯著，模擬得到最佳提取條件：提取溫度70.3℃，料液比1:36.9，提取時(shí)間2.18h，此時(shí)提取率為39.51%。重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)對(duì)提取條件略做改動(dòng)，在70℃，料液比1:37，提取2.18小時(shí)，提取2次，三次實(shí)驗(yàn)多糖平均得率是39.38%，稍低于模擬所得提取率，說明該條件可用于石斛多糖提齲

20圖2.7溫度和時(shí)間相互作用對(duì)鐵皮石斛多糖提取率的影響圖2.8料液比和時(shí)間相互作用對(duì)鐵皮石斛多糖提取率的影響2.5小結(jié)采用熱水浸提法提取多糖，實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單方便。不同多糖在不同濃度的醇溶液中溶解度不同，按80%的醇濃度沉淀得到部分粗多糖，若改變醇沉?xí)r乙醇濃度，可能仍會(huì)有多糖沉淀，而多糖具體含量還有待實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探究。冷凍干燥得到粗多糖，提取率31.65%，高于其他品種的石斛多糖提取率；多糖含量42%，需進(jìn)行純化工作。對(duì)影響多糖得率的四種因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，根據(jù)結(jié)果確定了提取溫度、料液比及提取時(shí)間三種因素的水平，進(jìn)而通過響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)探究提取率的最佳條件。利用Design-Expert軟件得到提取模型，提取溫度一次項(xiàng)、提取溫度二次項(xiàng)、料液比一次項(xiàng)、料液比二次項(xiàng)、時(shí)間二次項(xiàng)、溫度與料液比項(xiàng)極顯著，時(shí)間一次項(xiàng)、溫度時(shí)間項(xiàng)顯著，料液比時(shí)間項(xiàng)不顯著。根據(jù)F值可知各因素對(duì)多糖得率的影響大小順序?yàn)椋毫弦罕?gt;溫度>時(shí)間。通過3D曲面和等高線分析驗(yàn)證，溫度和料液比相互作用對(duì)鐵皮石斛多糖的提取率影響極顯著，溫度和時(shí)間相互作用對(duì)多糖得率顯著，而料液比和時(shí)間相互作用對(duì)多糖得率影響不顯著，模擬得到最佳提取條件：提取溫度70.3℃，料液比1:36.9，提取時(shí)間2.18h，此時(shí)提取率為39.51%。重復(fù)驗(yàn)證試驗(yàn)對(duì)提取條件略做改動(dòng)，在70℃，料液比1:37，提取2.18小時(shí)，提取2次，三次實(shí)驗(yàn)多糖平均得率是39.38%，稍低于模擬所得提取率，說明該條件可用于石斛多糖提齲

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]廣西產(chǎn)拳卷地錢的化學(xué)成分及活性研究[D]. 牛思琪.廣西民族大學(xué) 2019
[2]重樓多糖的化學(xué)修飾及體外活性研究[D]. 蔡艷妮.陜西理工大學(xué) 2018
[3]K4多糖及其硫酸化衍生物結(jié)構(gòu)和生物活性研究[D]. 邱美玲.江南大學(xué) 2018
[4]鐵皮石斛多糖的提取、抗氧化活性及其多糖/介孔二氧化硅納米粒的制備研究[D]. 陳立弟.深圳大學(xué) 2017
[5]鐵皮石斛多糖提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性研究[D]. 邱現(xiàn)創(chuàng).山西大學(xué) 2017
[6]鐵皮石斛多糖結(jié)構(gòu)及其硫酸化衍生物活性研究[D]. 樂晗.遵義醫(yī)學(xué)院 2017
[7]金釵石斛多糖的結(jié)構(gòu)鑒定及其乙�；土蛩峄苌锏纳锘钚匝芯縖D]. 靳燦.遵義醫(yī)學(xué)院 2017
[8]靈芝孢子粉多糖的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定[D]. 王亞濤.上海海洋大學(xué) 2017
[9]霍山鐵皮石斛多糖DOPA-1的結(jié)構(gòu)特征及對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響[D]. 王琳煒.江蘇大學(xué) 2017
[10]霍山石斛多糖研究[D]. 司華陽.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 2017



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