磷脂囊泡是由兩親性的磷脂分子在水相中自組裝形成的球狀結(jié)構(gòu),其結(jié)構(gòu)與膜組分和細(xì)胞相接近,因此可被用作簡單的細(xì)胞模型。磷脂囊泡可用于模擬細(xì)胞內(nèi)的酶催化反應(yīng)、蛋白質(zhì)表達(dá)等代謝過程。磷脂囊泡融合可實現(xiàn)物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸,進(jìn)而模擬細(xì)胞間的信息交流。本論文基于巨型磷脂囊泡（GUVs）和大磷脂囊泡（LUVs）的融合,在磷脂囊泡內(nèi)部實現(xiàn)了酶催化反應(yīng)和蛋白質(zhì)表達(dá)。本論文通過乳液法制備摻雜10 mass%正電荷磷脂的GUVs,其膜表面Zeta電位為25.43±0.87 m V;采用推泡法制備分別摻雜5 mass%、10 mass%、15mass%、20 mass%負(fù)電荷磷脂的LUVs,其膜表面Zeta電位分別為-5.46±1.24m V、-7.11±0.20 m V、-9.95±0.94 m V、-19.10±1.31 m V。兩種囊泡溶液按體積比為1:1混合,通過靜電相互作用二者可實現(xiàn)融合。結(jié)果表明,GUV內(nèi)部熒光強(qiáng)度隨著LUVs中負(fù)電荷磷脂的增加而增強(qiáng),融合平衡時間隨著LUVs中負(fù)電荷磷脂的增加而縮短。但LUV中負(fù)電荷磷脂的摻雜量太多會導(dǎo)致融合過程中GUVs不穩(wěn)定,容易發(fā)生破裂。綜合考慮,本論文采用摻雜1... 

【文章來源】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

生物膜結(jié)構(gòu)示意圖[28]

哈爾濱工業(yè)大學(xué)工學(xué)碩士學(xué)位論文3圖1-2人造細(xì)胞示意圖[35]1.2.2磷脂囊泡磷脂囊泡是由兩親性的磷脂分子自組裝形成的內(nèi)外部都是水相的泡狀結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)與膜組分接近于真實細(xì)胞，可在其內(nèi)部介導(dǎo)酶催化、蛋白質(zhì)表達(dá)等代謝反應(yīng)，來模擬細(xì)胞的功能。Monta等人[36]在空氣-水界面制備了脂質(zhì)雙層膜并對其電化學(xué)性能進(jìn)行了測定。實驗表明，除膜電阻比生物膜高，其他性質(zhì)均與生物膜相同。因此，磷脂囊泡可作為最簡單的細(xì)胞模型。1965年，Bangham等人首次在實驗中觀察到磷脂囊泡，同時其具有和生物細(xì)胞相同的包封功能[37]。之后研究人員對磷脂囊泡的性能和應(yīng)用研究進(jìn)行了探討。Marrink等人[38]運(yùn)用分子動力學(xué)來模擬磷脂囊泡的形成過程。如圖1-3所示，a-f為不同時間點(diǎn)磷脂囊泡的形成狀態(tài)。Kaler[39]等人成功制得磷脂囊泡，并通過低溫透射電子顯微鏡和中子小角散射測定了囊泡的尺寸分布。圖1-3脂質(zhì)DPPC聚集成囊泡的過程示意圖[38]a）0ns；b）4ns；c）20ns；d）80ns；e）200ns；f）240ns根據(jù)磷脂囊泡的直徑大小，可將磷脂囊泡分為小磷脂囊泡（Smallunilamellarvesicle，SUV，小于0.2μm）、大磷脂囊泡（Largeunilamellarvesicle，LUV，0.2-1μm）和巨型磷脂囊泡（Giantunilamellarvesicle，GUV，大于1μm）。具體尺寸

哈爾濱工業(yè)大學(xué)工學(xué)碩士學(xué)位論文3圖1-2人造細(xì)胞示意圖[35]1.2.2磷脂囊泡磷脂囊泡是由兩親性的磷脂分子自組裝形成的內(nèi)外部都是水相的泡狀結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)與膜組分接近于真實細(xì)胞，可在其內(nèi)部介導(dǎo)酶催化、蛋白質(zhì)表達(dá)等代謝反應(yīng)，來模擬細(xì)胞的功能。Monta等人[36]在空氣-水界面制備了脂質(zhì)雙層膜并對其電化學(xué)性能進(jìn)行了測定。實驗表明，除膜電阻比生物膜高，其他性質(zhì)均與生物膜相同。因此，磷脂囊泡可作為最簡單的細(xì)胞模型。1965年，Bangham等人首次在實驗中觀察到磷脂囊泡，同時其具有和生物細(xì)胞相同的包封功能[37]。之后研究人員對磷脂囊泡的性能和應(yīng)用研究進(jìn)行了探討。Marrink等人[38]運(yùn)用分子動力學(xué)來模擬磷脂囊泡的形成過程。如圖1-3所示，a-f為不同時間點(diǎn)磷脂囊泡的形成狀態(tài)。Kaler[39]等人成功制得磷脂囊泡，并通過低溫透射電子顯微鏡和中子小角散射測定了囊泡的尺寸分布。圖1-3脂質(zhì)DPPC聚集成囊泡的過程示意圖[38]a）0ns；b）4ns；c）20ns；d）80ns；e）200ns；f）240ns根據(jù)磷脂囊泡的直徑大小，可將磷脂囊泡分為小磷脂囊泡（Smallunilamellarvesicle，SUV，小于0.2μm）、大磷脂囊泡（Largeunilamellarvesicle，LUV，0.2-1μm）和巨型磷脂囊泡（Giantunilamellarvesicle，GUV，大于1μm）。具體尺寸

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]如何看待生命起源[J]. 李淼.  小康. 2019(22)
[3]諾貝爾獎級科學(xué)成就究竟是怎樣取得的?——綠色熒光蛋白的發(fā)現(xiàn)、表達(dá)與開發(fā)[J]. 周程.  安徽大學(xué)學(xué)報(哲學(xué)社會科學(xué)版). 2016(04)
[4]細(xì)胞膜:結(jié)構(gòu)的魅力[J]. 馬延.  生命世界. 2015(01)
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[10]生物膜與細(xì)胞進(jìn)化[J]. 周廣泰,任衛(wèi)東.  青海師范學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版). 1982(01)

碩士論文
[1]高可溶性綠色熒光蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)分析[D]. 張俊華.聊城大學(xué) 2019



本文編號：3270942