蒜頭果內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)神經(jīng)酸油脂的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 17:09
國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物蒜頭果是廣西及云南特色林產(chǎn)資源,其蒜頭果油中富含的神經(jīng)酸為超長(zhǎng)鏈單不飽和脂肪酸,具有多種生理藥理活性,經(jīng)濟(jì)價(jià)值高,被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。本文在建立5種混合脂肪酸的定性及定量分析基礎(chǔ)之上,利用從蒜頭果枝、葉及果實(shí)中分離的內(nèi)生真菌對(duì)神經(jīng)酸結(jié)晶母液進(jìn)行了發(fā)酵產(chǎn)富含神經(jīng)酸微生物油脂的研究。結(jié)果如下:1.神經(jīng)酸結(jié)晶母液含有的脂肪酸主要有硬脂酸、油酸、花生酸、芥酸和神經(jīng)酸。為了跟蹤監(jiān)測(cè)蒜頭果內(nèi)生真菌發(fā)酵神經(jīng)酸結(jié)晶母液產(chǎn)微生物油脂中這5種脂肪酸的變化,建立了用氣相色譜法同時(shí)定量測(cè)定這5種脂肪酸組分的分析方法。采用Rtx-Wax@柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm),升溫程序?yàn)槌跏紲囟?80℃,保留1 min,以5 ℃/min升至240℃,保留9 min。結(jié)果顯示該法準(zhǔn)確、可靠,可用于神經(jīng)酸結(jié)晶母液發(fā)酵過程監(jiān)控及后續(xù)工藝優(yōu)化的測(cè)定。2.采用組織貼片和研磨涂布平板培養(yǎng)法對(duì)蒜頭果健康的枝、葉、果肉、果殼及果仁內(nèi)生真菌進(jìn)行分離純化。結(jié)果分離得到內(nèi)生真菌58株。58株菌株的菌絲體經(jīng)蘇丹黑-B染色后鏡檢觀察油脂粒著色情況初篩得到產(chǎn)油脂含量較高的菌株19株。初篩菌株經(jīng)搖瓶液體培養(yǎng)...
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1蒜頭果果實(shí)結(jié)構(gòu)??-
析時(shí)長(zhǎng)、分離度方面考慮,得到以下結(jié)果,以初始溫度180°C,保留1?min,之后以5?°C/min??升溫至240?°C,保持9min,此升溫程序,混合物分離效果較好,分析時(shí)長(zhǎng)22min,如??圖2-1所示。??b??80000?-??60000?-??c??〇>?40000?-?e?????c?|??20000?-?a?丨?1?I??〇」UULJL??4?6?8?10?12?14?16?18?20?22?24??t?/?(min)??a.硬脂酸甲酯;b.油酸甲酯;c.花生酸甲酯;d.芥酸甲酯;e.神經(jīng)酸甲酯??圖2-1五組分標(biāo)準(zhǔn)樣品混合氣相色譜圖??a.?methyl?oleate;?b.?methyl?stearate;?c.?methyl?arachidate;?d.?methyl?erucate;?d.?methyl?nervonate??Figure?2-1?GC?spectra?of?five?components??2.4.2氣相色譜外標(biāo)法測(cè)定??2.4.2.1線性關(guān)系??準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0和9.0?mL于10?mL容量瓶??中,以正己烷為溶劑,配制成系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)0.45?—微孔過濾??膜過濾后于GC進(jìn)樣分析,進(jìn)樣量1.0?pL。以色譜峰峰面積為縱坐標(biāo),其質(zhì)量濃度(mg/mL)??為橫坐標(biāo)
a.神經(jīng)酸結(jié)晶母液b.發(fā)酵后微生物油脂??1.硬脂酸甲酯;2.油酸甲酯;3.花生酸甲酯;4.芥酸曱酯;5.神經(jīng)酸甲酯??圖2-2神經(jīng)酸結(jié)晶母液發(fā)酵前后氣相色譜圖??a.?nervonic?acid?crystallization?mother?liquid;?b.?after?the?fermentation?of?microbial?oils??1.?methyl?oleate;?2.?methyl?stearate;?3.?methyl?arachidate;?4.?methyl?erucate;?5.?methyl?nervonate??Figure?2-2?Nervonic?acid?crystallization?mother?liquid?before?and?after?fermentation?of?GC??如圖2-2所示,神經(jīng)酸結(jié)晶母液經(jīng)菌株STGR-6發(fā)酵后,計(jì)算其菌體中各脂肪酸含??量可得油酸明顯減少,其原因在于油酸作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在菌體生長(zhǎng)過程中被消耗。神經(jīng)酸??含量在油脂中的比例有所增加,而硬脂酸和花生酸在經(jīng)過發(fā)酵后含量過低,故后期不在??考察干菌體中硬脂酸和花生酸的含量。??2.5本章小結(jié)??本章根據(jù)神經(jīng)酸結(jié)晶母液微生物發(fā)酵體系的分析檢測(cè)要求,建立了氣相色譜的脂肪??酸分析方法,得出結(jié)果如下:??研究了氣相色譜法對(duì)神經(jīng)酸結(jié)晶母液生物發(fā)酵體系中的硬脂酸甲酯、油酸甲酯、花??生酸甲酯、芥酸甲酯和神經(jīng)酸甲酯的同時(shí)測(cè)定。確定的色譜條件為:色譜柱:Rtx-Wax@??柱(30mx〇.25mm
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國(guó)富含神經(jīng)酸的元寶楓籽油應(yīng)用研究現(xiàn)狀及前景[J]. 王性炎,謝勝菊,王高紅. 中國(guó)油脂. 2018(12)
[2]蒜頭果中植物內(nèi)生真菌煙曲霉的抗菌活性研究[J]. 李娟,陳中華,華梅,原曉龍,虞泓,王毅. 西部林業(yè)科學(xué). 2018(04)
[3]植物內(nèi)生菌研究進(jìn)展[J]. 方珍娟,張曉霞,馬立安. 長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版). 2018(10)
[4]蒜頭果內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物抑制人類致病菌活性的研究[J]. 肖支葉,華梅,原曉龍,邱堅(jiān),鄭科,王毅. 廣西植物. 2018(07)
[5]神經(jīng)酸對(duì)帕金森病模型小鼠運(yùn)動(dòng)障礙的緩解作用及機(jī)制研究[J]. 鄭輝,孫作乾,王志亮,魏正風(fēng),馮炎,張興柱,王付蒼,史永強(qiáng),高肇林. 中國(guó)藥房. 2017(19)
[6]神經(jīng)酸研究現(xiàn)狀及前景[J]. 趙立言,于炎冰,張黎. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志. 2017(03)
[7]蒜頭果的內(nèi)生真菌多樣性分析[J]. 王毅,王娟,王四海,李云琴,原曉龍,陳中華. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(09)
[8]響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化蒜頭果油中神經(jīng)酸甘油酯皂化工藝[J]. 周琴芬,李杰,談滿良,欒連軍. 中國(guó)油脂. 2016(08)
[9]黨參內(nèi)生菌轉(zhuǎn)化人參根總皂苷為稀有人參皂苷F2和C-K的研究[J]. 崔磊,金英今,尹成日. 延邊大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(01)
[10]馬尾松(Pinus massoniana)內(nèi)生真菌的產(chǎn)油脂效果[J]. 鄧慧華,洪滔,吳承禎,謝安強(qiáng),林晗,洪偉. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2014(03)
博士論文
[1]蒜頭果有效成分及其生物活性研究[D]. 唐婷范.廣西大學(xué) 2013
[2]珍稀植物蒜頭果保護(hù)生物學(xué)研究[D]. 賴家業(yè).四川大學(xué) 2006
碩士論文
[1]產(chǎn)油脂絲狀真菌的篩選及其產(chǎn)油脂條件的優(yōu)化[D]. 李元森.山東輕工業(yè)學(xué)院 2009
本文編號(hào):2973190
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-1蒜頭果果實(shí)結(jié)構(gòu)??-
析時(shí)長(zhǎng)、分離度方面考慮,得到以下結(jié)果,以初始溫度180°C,保留1?min,之后以5?°C/min??升溫至240?°C,保持9min,此升溫程序,混合物分離效果較好,分析時(shí)長(zhǎng)22min,如??圖2-1所示。??b??80000?-??60000?-??c??〇>?40000?-?e?????c?|??20000?-?a?丨?1?I??〇」UULJL??4?6?8?10?12?14?16?18?20?22?24??t?/?(min)??a.硬脂酸甲酯;b.油酸甲酯;c.花生酸甲酯;d.芥酸甲酯;e.神經(jīng)酸甲酯??圖2-1五組分標(biāo)準(zhǔn)樣品混合氣相色譜圖??a.?methyl?oleate;?b.?methyl?stearate;?c.?methyl?arachidate;?d.?methyl?erucate;?d.?methyl?nervonate??Figure?2-1?GC?spectra?of?five?components??2.4.2氣相色譜外標(biāo)法測(cè)定??2.4.2.1線性關(guān)系??準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0和9.0?mL于10?mL容量瓶??中,以正己烷為溶劑,配制成系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)0.45?—微孔過濾??膜過濾后于GC進(jìn)樣分析,進(jìn)樣量1.0?pL。以色譜峰峰面積為縱坐標(biāo),其質(zhì)量濃度(mg/mL)??為橫坐標(biāo)
a.神經(jīng)酸結(jié)晶母液b.發(fā)酵后微生物油脂??1.硬脂酸甲酯;2.油酸甲酯;3.花生酸甲酯;4.芥酸曱酯;5.神經(jīng)酸甲酯??圖2-2神經(jīng)酸結(jié)晶母液發(fā)酵前后氣相色譜圖??a.?nervonic?acid?crystallization?mother?liquid;?b.?after?the?fermentation?of?microbial?oils??1.?methyl?oleate;?2.?methyl?stearate;?3.?methyl?arachidate;?4.?methyl?erucate;?5.?methyl?nervonate??Figure?2-2?Nervonic?acid?crystallization?mother?liquid?before?and?after?fermentation?of?GC??如圖2-2所示,神經(jīng)酸結(jié)晶母液經(jīng)菌株STGR-6發(fā)酵后,計(jì)算其菌體中各脂肪酸含??量可得油酸明顯減少,其原因在于油酸作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在菌體生長(zhǎng)過程中被消耗。神經(jīng)酸??含量在油脂中的比例有所增加,而硬脂酸和花生酸在經(jīng)過發(fā)酵后含量過低,故后期不在??考察干菌體中硬脂酸和花生酸的含量。??2.5本章小結(jié)??本章根據(jù)神經(jīng)酸結(jié)晶母液微生物發(fā)酵體系的分析檢測(cè)要求,建立了氣相色譜的脂肪??酸分析方法,得出結(jié)果如下:??研究了氣相色譜法對(duì)神經(jīng)酸結(jié)晶母液生物發(fā)酵體系中的硬脂酸甲酯、油酸甲酯、花??生酸甲酯、芥酸甲酯和神經(jīng)酸甲酯的同時(shí)測(cè)定。確定的色譜條件為:色譜柱:Rtx-Wax@??柱(30mx〇.25mm
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國(guó)富含神經(jīng)酸的元寶楓籽油應(yīng)用研究現(xiàn)狀及前景[J]. 王性炎,謝勝菊,王高紅. 中國(guó)油脂. 2018(12)
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[5]神經(jīng)酸對(duì)帕金森病模型小鼠運(yùn)動(dòng)障礙的緩解作用及機(jī)制研究[J]. 鄭輝,孫作乾,王志亮,魏正風(fēng),馮炎,張興柱,王付蒼,史永強(qiáng),高肇林. 中國(guó)藥房. 2017(19)
[6]神經(jīng)酸研究現(xiàn)狀及前景[J]. 趙立言,于炎冰,張黎. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志. 2017(03)
[7]蒜頭果的內(nèi)生真菌多樣性分析[J]. 王毅,王娟,王四海,李云琴,原曉龍,陳中華. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(09)
[8]響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化蒜頭果油中神經(jīng)酸甘油酯皂化工藝[J]. 周琴芬,李杰,談滿良,欒連軍. 中國(guó)油脂. 2016(08)
[9]黨參內(nèi)生菌轉(zhuǎn)化人參根總皂苷為稀有人參皂苷F2和C-K的研究[J]. 崔磊,金英今,尹成日. 延邊大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(01)
[10]馬尾松(Pinus massoniana)內(nèi)生真菌的產(chǎn)油脂效果[J]. 鄧慧華,洪滔,吳承禎,謝安強(qiáng),林晗,洪偉. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2014(03)
博士論文
[1]蒜頭果有效成分及其生物活性研究[D]. 唐婷范.廣西大學(xué) 2013
[2]珍稀植物蒜頭果保護(hù)生物學(xué)研究[D]. 賴家業(yè).四川大學(xué) 2006
碩士論文
[1]產(chǎn)油脂絲狀真菌的篩選及其產(chǎn)油脂條件的優(yōu)化[D]. 李元森.山東輕工業(yè)學(xué)院 2009
本文編號(hào):2973190
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