協同藥物組合可以通過協同地干擾生物網絡來實現各種疾病的治療,并且協同治療被認為是治療疾病的先進策略。明確協同治療機制在復雜疾病的治療中起著至關重要的作用。目前,主要是通過有限的成分進行生物實驗,觀察其藥理現象來實現協同作用的研究。但是,由于其復雜性,以及缺乏快速、簡便、且重現性良好的篩選方法,準確確定協同作用成分仍然是一個挑戰(zhàn)。因此我們課題組建立了多室電泳分離系統(MCESS)結合高效液相色譜聯用質譜(HPLC-MS/MS)技術,實現快速篩選潛在的協同作用成分。多室電泳分離系統通過膜分離,組成多個腔室。在生理條件和低電壓下,使靶標/潛在協同作用成分復合物從樣品室快速地帶電遷移到接收室中。將接收室中的靶標與潛在協同作用成分進行解離后,選用HPLC-MS/MS定性和定量潛在協同作用成分作為候選藥物。在整個篩選過程中不僅保留了靶標酶的原始三維結構,而且生理條件有利于維持靶標原始活性。本文通過選用人血清白蛋白和與其結合的已知的西藥成分吲哚美辛和二氟尼柳,驗證了所建立的多室電泳分離系統的可行性。結果顯示我們篩選已知的靶標抑制劑時,在該系統中靶標的遷移率達到70-80%,并且具有良好的重現性,RSD值在0.3-6.6%之間。最后,將所建立的方法應用從五味子萃取液中篩選α-葡萄糖苷酶的協同作用抑制劑。篩選出九種成分作為潛在的α-葡萄糖苷酶的協同作用抑制劑。綜上所述,該方法是篩選與靶蛋白具有協同作用的組分的有效方法,對復雜疾病的協同治療提供候選組合藥物和臨床藥物協同機制的研究具有重要的意義。
【學位單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：TQ460.1;O658.9
【部分圖文】：

圖２．超濾結合ＬＣ－ＭＳ技術篩選降血脂湯中天然脂酶抑制劑的方案圖

圖３．中空纖維篩選配體技術與ＬＣ－ＭＳ聯用方法的示意圖

圖４．酶固定化磁珠法篩選中藥中抑制劑的工作流程示意圖
【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 李德強;肖媛媛;戴榮源;張志清;單愛蓮;;靶分子親和-質譜聯用技術在中藥活性成分篩選中的應用進展[J];中國臨床藥理學雜志;2015年21期

2 李會軍;安婧婧;周建良;李萍;;靶分子親和-質譜聯用技術應用于中藥等復雜體系中活性成分的篩選[J];中國藥科大學學報;2009年02期

本文編號：2884757