協(xié)同藥物組合可以通過協(xié)同地干擾生物網(wǎng)絡(luò)來實現(xiàn)各種疾病的治療,并且協(xié)同治療被認為是治療疾病的先進策略。明確協(xié)同治療機制在復雜疾病的治療中起著至關(guān)重要的作用。目前,主要是通過有限的成分進行生物實驗,觀察其藥理現(xiàn)象來實現(xiàn)協(xié)同作用的研究。但是,由于其復雜性,以及缺乏快速、簡便、且重現(xiàn)性良好的篩選方法,準確確定協(xié)同作用成分仍然是一個挑戰(zhàn)。因此我們課題組建立了多室電泳分離系統(tǒng)(MCESS)結(jié)合高效液相色譜聯(lián)用質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)技術(shù),實現(xiàn)快速篩選潛在的協(xié)同作用成分。多室電泳分離系統(tǒng)通過膜分離,組成多個腔室。在生理條件和低電壓下,使靶標/潛在協(xié)同作用成分復合物從樣品室快速地帶電遷移到接收室中。將接收室中的靶標與潛在協(xié)同作用成分進行解離后,選用HPLC-MS/MS定性和定量潛在協(xié)同作用成分作為候選藥物。在整個篩選過程中不僅保留了靶標酶的原始三維結(jié)構(gòu),而且生理條件有利于維持靶標原始活性。本文通過選用人血清白蛋白和與其結(jié)合的已知的西藥成分吲哚美辛和二氟尼柳,驗證了所建立的多室電泳分離系統(tǒng)的可行性。結(jié)果顯示我們篩選已知的靶標抑制劑時,在該系統(tǒng)中靶標的遷移率達到70-80%,并且具有良好的重現(xiàn)性,RSD值在0.3-6.6%之間。最后,將所建立的方法應用從五味子萃取液中篩選α-葡萄糖苷酶的協(xié)同作用抑制劑。篩選出九種成分作為潛在的α-葡萄糖苷酶的協(xié)同作用抑制劑。綜上所述,該方法是篩選與靶蛋白具有協(xié)同作用的組分的有效方法,對復雜疾病的協(xié)同治療提供候選組合藥物和臨床藥物協(xié)同機制的研究具有重要的意義。
【學位單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：TQ460.1;O658.9
【部分圖文】：

圖２．超濾結(jié)合ＬＣ－ＭＳ技術(shù)篩選降血脂湯中天然脂酶抑制劑的方案圖

圖３．中空纖維篩選配體技術(shù)與ＬＣ－ＭＳ聯(lián)用方法的示意圖

圖４．酶固定化磁珠法篩選中藥中抑制劑的工作流程示意圖
【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 李德強;肖媛媛;戴榮源;張志清;單愛蓮;;靶分子親和-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在中藥活性成分篩選中的應用進展[J];中國臨床藥理學雜志;2015年21期

2 李會軍;安婧婧;周建良;李萍;;靶分子親和-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)應用于中藥等復雜體系中活性成分的篩選[J];中國藥科大學學報;2009年02期

本文編號：2884757