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大連厚葉海帶褐藻聚糖硫酸酯的分離純化及其抗炎作用研究

發(fā)布時間:2020-11-02 12:00
   褐藻聚糖硫酸酯(Fucoidan)是一種從褐藻中提取的具有多種生物活性的水溶性硫酸雜多糖。本文以大連厚葉海帶Fucoidan為原料,經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換柱分離純化得到F1,F2兩個組分。其回收率分別是23.25%,25.19%,硫酸基團(tuán)含量分別是2.94%,41.34%,總糖含量分別是75.00%,44.91%。采用高效液相色譜分析其單糖組成,F1主要含有甘露糖,F2主要含有巖藻糖。采用傅里葉紅外光譜分析,F1硫酸基團(tuán)分布在C2、C3位置上,F2硫酸基團(tuán)分布在巖藻糖C4位置上。動物實驗研究結(jié)果表明:DF、F1、F2的低和高劑量組均不同程度降低了IL-1β、IL-6、TNF-α水平,升高了IL-10水平。與模型組相比,DF高低劑量組、F1高低劑量組、F2高劑量組極顯著降低了IL-6、TNF-α水平,顯著提高了IL-10水平;F1高低劑量組、F2高劑量組極顯著降低了IL-1β水平,在各實驗組中,F2高劑量組對IL-1β、IL-6指標(biāo)降低最多效果最好。同時與模型組相比,DF高劑量組,F1、F2的低和高劑量組均極顯著降低了MDA活力,DF低劑量組顯著降低了MDA活力,其中F2高劑量組降低最多效果最好;相較于模型組,DF、F1、F2低和高劑量組均極顯著提高了SOD、GSH-Px水平,F1高劑量組提高效果最好。利用RT-PCR技術(shù)檢測各組分對炎癥相關(guān)基因COX-2、iNOS、IκB-α、NF-κB的mRNA表達(dá),結(jié)果表明與模型組比較,DF高低劑量組、F1高劑量組、F2低劑量組極顯著降低COX-2 mRNA的表達(dá)水平。F1高劑量組、F2低、高劑量組極顯著降低了iNOS mRNA的表達(dá),DF低劑量組、F1低劑量組顯著降低了iNOS mRNA的表達(dá),其中F1高劑量組的降低效果最好。同時與模型組相比,DF、F1、F2低和高劑量均極顯著升高IκB-αmRNA的表達(dá)。DF高劑量組、F1高劑量組及F2高低劑量組極顯著降低NF-κB mRNA的表達(dá),DF低劑量組及F1低劑量組顯著降低NF-κB mRNA的表達(dá),且F1高劑量組的降低水平最多,抑制NF-κB mRNA的表達(dá)效果最好,表明大連厚葉海帶褐藻聚糖硫酸酯能夠在炎癥基因水平上調(diào)整抑制胃炎炎癥,改善炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位單位】:大連海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:TQ281
【部分圖文】:

曲線,梯度洗脫,曲線,傅里葉紅外光譜法


F12.2.5 傅里葉紅外光譜法分析準(zhǔn)確稱取 DF 純化后各組分 2 mg,加入適量溴化鉀反復(fù)研磨,壓制成透明均勻的薄片。用 Nicolet-470 型紅外光譜儀掃描 4000~400cm-1波長范圍內(nèi)的吸收值51,52]。2.2.613C 核磁共振波譜分析利用 Bruker AVANCE III 核磁共振波譜儀在頻率為 500MHz、溫度為 25 ℃的條件下,對純化后各組分進(jìn)行13C NMR 核磁共振分析[51,52]。2.3 結(jié)果分析2.3.1 大連厚葉海帶 Fucoidan 分離純化結(jié)果

高效液相色譜,高效液相色譜,標(biāo)準(zhǔn)品


圖 2-2 標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖Fig.2-2 HPLC of standardManRhaGlu-UAGal-UAGluGalXylFuc時間 time/min

高效液相色譜,高效液相色譜,標(biāo)準(zhǔn)品


標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2867020

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