在人體的正常代謝中,將產(chǎn)生生物活性自由基。過量的自由基或過慢的自由基清除可導(dǎo)致加速衰老過程并誘發(fā)炎癥,免疫紊亂,惡性腫瘤和其他疾病。人工抗氧化劑通常有副作用,長期攝入可導(dǎo)致一系列疾病,如肝損傷和腫瘤等。海洋生物蛋白源的抗氧化肽可有效的消除內(nèi)源和外源自由基物質(zhì),且具有品種多、副作用小等特點(diǎn),有望成為安全高效的天然抗氧化劑。長蛇鯔,為廣西北部灣經(jīng)濟(jì)魚類之一,長蛇鯔屬,狗母魚科,年產(chǎn)量較大,作為一種海洋不易保存的魚類,在加工過程中經(jīng)常被當(dāng)成廢棄物或低值飼料,這大大降低了長蛇鯔魚的使用價(jià)值,并且造成了一定的環(huán)境污染。以長蛇魷魚肉蛋白為原料制備生物活性肽,可為工業(yè)化長蛇鯔魚資源的產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù)。利用六種不同的商業(yè)化蛋白酶,水解長蛇鯔魚肉蛋白,以1,2-二苦基-2-三硝基苯亞胼基(DPPH·)、沒食子酚超氧(O2-·)自由基清除率和Fe3+還原能力的活性為指標(biāo),探討不同酶水解條件下,不同蛋白酶的水解產(chǎn)物的抗氧化性能。結(jié)果表明,胰蛋白酶酶解產(chǎn)物水解度(DH)為13%時(shí),蛋白濃度為1 mg/L的酶解產(chǎn)物,對(duì)1,2-二苦基-2-三硝基苯亞肼基(DPPH·)、沒食子酚超氧自由基(O2-·)清除和Fe3+還原能力的抗氧化能力綜合性最強(qiáng),分別為91.41%、19.64%及1.08 Abs,優(yōu)化得到胰蛋白酶酶解長蛇鯔魚肉蛋白的最佳酶解條件為:酶用量為8000U/g、pH為7.0、溫度為40 ℃、底物濃度為25g/L,水解時(shí)間為2h。在優(yōu)化的工藝條件下水解長蛇鯔魚肉蛋白,采用凝膠過濾色譜分析水解產(chǎn)物的分子量分布,再使用微濾、超濾對(duì)酶解產(chǎn)物進(jìn)行分離,采用10 KDa和5KDa的超濾膜對(duì)酶解產(chǎn)物進(jìn)行超濾,發(fā)現(xiàn)超濾得到的分子量≤5KDa的長蛇鯔魚肉蛋白酶解產(chǎn)物具有更強(qiáng)的抗氧化活性,蛋白濃度為1 mg/L的透過液,對(duì)DPPH·自由基、沒食子酚超氧自由基(O2-·)清除和Fe3+還原能力的活性,分別為94.45%、44.54%及1.32Abs,使用反相高效液相色譜對(duì)分子量≤5 KDa的酶解產(chǎn)物進(jìn)行氨基酸組成分析,其氨基酸種類豐富,含有以下14種氨基酸:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、蘇氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、酪氨酸(Tyr)、半胱氨酸(Cys)、纈氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、脯氨酸(Pro)。以分子量≤5KDa的長蛇鯔魚酶解產(chǎn)物蛋白為肽源,利用鋅離子螯合率為指標(biāo),考察反應(yīng)肽鋅質(zhì)量比、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)體系pH值和反應(yīng)時(shí)間對(duì)螯合率的影響,并進(jìn)行正交試驗(yàn)優(yōu)化,得到的最佳組合條件為:肽鋅質(zhì)量比2:1、溫度45℃、pH=6.5、螯合時(shí)間為60min,得到最大螯合率為:89.23%,且肽螯合鋅離子后肽的抗氧化能力增強(qiáng),在蛋白濃度為1 mg/L時(shí),肽鋅螯合物對(duì)DPPH·自由基、超氧(O2--)自由基清除率和Fe3+還原能力的抗氧化活性,分別為97.59%、69.13%及1.72Abs。
【學(xué)位單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TQ936.16
【部分圖文】：

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文邐長蛇栔魚肉蛋白酶解制備抗氧ｆｔr賴難芯垮義系認(rèn)盜醒跗鴆交乖幕Х從Σ鍶繽跡保彼盡；钚匝踉謁拗鞣烙⑸鋦腥局釁皰義現(xiàn)匾饔�，但其过度睗弯澩残留可以攻火嫺胞膜、蛋白质、ＤＮＡ和茰O锘钚源蠓皺義獻(xiàn)櫻郟擔(dān)�，�(dān)梗蒎

本文編號(hào)：2813163