【摘要】：本學(xué)位論文設(shè)計及合成了兩例DNA靶向型熒光指示劑:HoeSR和HoeSR-1;并通過光譜測試和熒光成像等測試,考察了兩例探針在研究細胞核微觀結(jié)構(gòu)及功能方面的應(yīng)用性。HoeSR和HoeSR-1分別由Hoechst與不同磺酸基四甲基羅丹明通過“click反應(yīng)”共價連接而成;其中Hoechst具有DNA小溝槽靶向性,而酰胺化修飾后的磺酸基四甲基羅丹明具有良好的熒光性質(zhì)和pH敏感性。研究表明兩例細胞核熒光指示劑可特異性定位到活細胞DNA上,并具有較低的染色背景,可實現(xiàn)對活細胞的DNA微觀結(jié)構(gòu)的展示及細胞核DNA附近的酸堿微環(huán)境的檢測。其中HoeSR具有結(jié)合DNA后稀疏發(fā)光的性質(zhì);可用于細胞核DNA的超分辨成像研究,揭示了有絲分裂期細胞核DNA的精細結(jié)構(gòu)特征。而HoeSR-1具有雙熒光發(fā)射峰,其比率值在pH值屬于6.00~9.00的變化范圍內(nèi)具有較高的酸堿敏感性,適合用于細胞核內(nèi)pH值的研究。通過利用HoeSR-1染色的固定細胞獲取熒光比率值擬合曲線vs活細胞中熒光比率值的變化,揭示了正常生理狀態(tài)下活細胞內(nèi)細胞核pH值在8.50~9.00的范圍內(nèi)。本論文設(shè)計的兩例熒光指示劑具有較強實用性,為研究細胞核DNA微觀結(jié)構(gòu)及生理環(huán)境提供了重要工具。
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TQ617.3

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