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紅藻硫酸多糖泡騰片及其抗食物過(guò)敏活性的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-30 07:05
【摘要】:近年來(lái),食物過(guò)敏人數(shù)持續(xù)上升,已經(jīng)嚴(yán)重危害到過(guò)敏人群的日常生活,引起了全球范圍內(nèi)的廣泛關(guān)注。為控制食物過(guò)敏人群的持續(xù)攀升,開(kāi)發(fā)出一種安全的藥物或保健品已經(jīng)成為相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn),海洋紅藻具有多種生物活性,其中從龍須菜和紫菜中提取的龍須菜硫酸多糖和紫菜硫酸多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用,能夠預(yù)防食物過(guò)敏性疾病。泡騰片產(chǎn)品能夠快速崩解,具有起效迅速、生物利用度高且方便攜帶的特點(diǎn),將泡騰片應(yīng)用在抗過(guò)敏領(lǐng)域并開(kāi)發(fā)出一種功能性產(chǎn)品將是一個(gè)創(chuàng)新的選擇。本文利用龍須菜硫酸多糖及紫菜硫酸多糖制備出一種紅藻硫酸多糖泡騰片,并對(duì)其抗食物過(guò)敏活性進(jìn)行研究。本研究通過(guò)高溫壓力處理結(jié)合乙醇沉淀等方法得到龍須菜硫酸多糖和紫菜硫酸多糖,總糖含量分別為97.04%、98.17%,還原糖占總糖比例分別為31.52%、25.18%,黏度分別為0.08dL/g、0.10 dL/g,硫酸根含量分別為10.16%、12.34%,紅外光譜結(jié)果分析顯示,兩種紅藻硫酸多糖均存在硫酸根活性基團(tuán)。采用酸堿分開(kāi)制粒的方法制備紅藻硫酸多糖泡騰片,最終確定泡騰片配方(質(zhì)量百分比)為:龍須菜硫酸多糖5%、紫菜硫酸多糖5%、乳糖30%、甘露醇13%、檸檬酸10%、酒石酸10%、碳酸氫鈉20%、甜菊糖苷3%、聚乙烯吡咯烷酮-K30 4%。此配方下形成顆粒粒度為26.40%、休止角為23.62°,形成的片劑崩解時(shí)限為53.33 s。利用體外細(xì)胞模型評(píng)價(jià)和體內(nèi)動(dòng)物模型評(píng)價(jià)紅藻硫酸多糖泡騰片抗食物過(guò)敏作用。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,紅藻硫酸多糖泡騰片能夠顯著抑制RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒及組胺釋放。體內(nèi)小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,紅藻硫酸多糖泡騰片能夠顯著緩解小鼠過(guò)敏反應(yīng)癥狀,顯著抑制OVA特異性IgE、組胺及肥大細(xì)胞蛋白酶-1水平,顯著抑制Th2型細(xì)胞因子IL-4、IL-13水平,顯著促進(jìn)Th1型細(xì)胞因子IFN-γ和Treg相關(guān)細(xì)胞因子IL-10、TGF-β水平。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,紅藻硫酸多糖泡騰片能夠顯著抑制DC細(xì)胞、Th細(xì)胞、B細(xì)胞、MC細(xì)胞的數(shù)量,并促進(jìn)Treg細(xì)胞的數(shù)量。綜上所述,本文成功制備了紅藻硫酸多糖泡騰片,并對(duì)紅藻硫酸多糖泡騰片的抗食物過(guò)敏活性及其作用機(jī)制進(jìn)行了研究,可為相關(guān)片劑的開(kāi)發(fā)提供參考和支持。
【學(xué)位授予單位】:集美大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TQ460.1
【圖文】:

流程圖,泡騰片,硫酸多糖,紅藻


參照 Kawai 所用的硫酸-氯化鋇方法測(cè) GLSP(hp)和 PHSP(hp)硫酸根含量[137]。以硫標(biāo)準(zhǔn)品并設(shè)置濃度梯度,并根據(jù)添加 5%氯化鋇-5%明膠時(shí)的 OD360與添加 5%明膠360的差值制作標(biāo)曲,計(jì)算 GLSP(hp)和 PHSP(hp)硫酸根含量。2.2 紅藻硫酸多糖泡騰片的制備與分析1)紅藻硫酸多糖泡騰片的制備將所用原料分別粉碎,過(guò) 100 目篩備用。采用酸堿分開(kāi)制粒法,將乳糖、甘露醇糖苷按照配方稱取并充分混合,等分為兩份,一份加入無(wú)水檸檬酸、酒石酸、GLS PHSP(hp)充分混合,另一份加入碳酸氫鈉充分混合。用 75%的乙醇溶液溶解 PVP-K3粘合劑,分別粘合酸粉和堿粉制得兩份軟材,并分別過(guò) 20 目篩造粒。在 50℃鼓風(fēng)內(nèi)烘干 4 h,過(guò) 40 目篩整粒,得到酸粒、堿粒。將酸粒、堿粒混合均勻,經(jīng)壓片機(jī)到泡騰片。工藝流程見(jiàn)圖 2-1。固 定 紅 藻 硫 酸 多 糖 泡 騰 片 中 的 活 性 成 分 紅 藻 硫 酸 多 糖 含 量 為 GLSP(hp):PHSP(hp)=1:1)、甜味劑甜菊糖苷含量為 3%,依據(jù)泡騰片的評(píng)價(jià)指標(biāo),采素實(shí)驗(yàn)及正交試驗(yàn)對(duì)其他輔料進(jìn)行篩選并確定最終配方。

示意圖,休止角,示意圖,物料


圖 2-2 休止角測(cè)定示意圖Fig. 2-1 Sketch diagram of angle of repose物料放置在恒溫恒濕箱中,設(shè)置溫度 25℃于稱量瓶底部平鋪一定量(m1)物料,精電子天平中稱量吸濕后物料的重量(m2)吸濕率(%)=(m2-m1) /m1*100%得到的顆粒粒度越小越適合壓片,壓片后依次從上到下疊放置于水平桌面上,稱取,來(lái)回晃動(dòng)篩網(wǎng),計(jì)算能不能通過(guò) 20 目以下方式計(jì)算粒度:粒度(%)=m1/m*100%崩解時(shí)限是泡騰片最重要的評(píng)價(jià)指標(biāo),泡

紅外光譜圖,紅外光譜圖,總糖,半乳糖


520,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3-2,由此計(jì)算出GLSP(hp)和PHSP(hp)還原糖在其總糖中的占比分別為31.52%、25.18%。圖 3-2 半乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 3-2 The standard of curve of galactosey = 0.9791x + 0.0942R2 = 0.99930123450 1 2 3 4 5DO306Galactose (mg/mL)y = 0.7902x + 0.1291R2 = 0.9979012340 1 2 3 4 5DO205Galactose (mg/mL)

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