發(fā)布時(shí)間：2020-07-02 15:16

【摘要】：羅耳阿太菌胞外多糖(AEPS)是以玉米黃漿為氮源、玉米淀粉為碳源培養(yǎng)的羅耳阿太菌經(jīng)過(guò)分離純化所得到的一種胞外多糖。經(jīng)初步研究其對(duì)多種重金屬具有很好的螯合效果,并且與化學(xué)螯合藥物相比更具有安全性。為研發(fā)一種安全可靠的排鉛制劑,本論文中利用發(fā)酵生產(chǎn)的AEPS作為吸附劑,研究其對(duì)鉛離子的螯合能力及對(duì)小鼠的促排鉛作用如下:1根據(jù)單因素試驗(yàn)的測(cè)定結(jié)果設(shè)計(jì)AEPS與鉛離子螯合的正交試驗(yàn),正交試驗(yàn)表明影響吸附的主次因素依次是AEPS初始濃度,pH,螯合時(shí)間,螯合溫度。當(dāng)AEPS的初始濃度為600 mg/L;pH為8;螯合時(shí)間為1.5 h;螯合溫度為35℃時(shí),吸附率最高為97.85%。2利用掃描電子顯微鏡(SEM)分析顯示AEPS吸附鉛離子后改變了其表面結(jié)構(gòu)。傅立葉紅外光譜(FTIR)分析表明鉛離子的吸附主要與AEPS的—OH和C=O有關(guān),且吸附鉛離子后改變了AEPS的結(jié)構(gòu)。3利用模擬胃腸環(huán)境法對(duì)AEPS-Pb的生物穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果顯示,AEPS螯合鉛離子在胃環(huán)境中不穩(wěn)定,而在腸環(huán)境中較穩(wěn)定。4 AEPS用于減輕鉛暴露小鼠的器官損傷。48只昆明小白鼠(雄)隨機(jī)分為空白對(duì)照組,模型組,陽(yáng)性對(duì)照組,羅耳阿太菌胞外多糖低劑量組、中劑量組和高劑量組。通過(guò)分析體重增長(zhǎng)率和內(nèi)臟指數(shù)表明,AEPS使鉛暴露的小鼠保持正常的體重增長(zhǎng)。通過(guò)試劑盒測(cè)定的血清中的生化指標(biāo)(T-SOD,CAT,MDA)顯示AEPS增加了鉛暴露小鼠血清中T-SOD的活性。通過(guò)火焰原子吸收測(cè)量腦,肝,腎,睪丸和糞便中的鉛濃度。各器官中鉛累積的減少率分別為76.65%(腦),60.42%(肝),78.43%(腎)和56.47%(睪丸),并且數(shù)據(jù)顯示大量鉛隨糞便排出。結(jié)果證明AEPS可以防止鉛暴露小鼠器官中鉛的積累。腦,肝,腎和睪丸的組織學(xué)評(píng)估還顯示,AEPS顯著減輕鉛中毒引起的肝和腎損傷,并有效保護(hù)神經(jīng)元和精子細(xì)胞。我們認(rèn)為AEPS在消化系統(tǒng)中與小鼠攝取的鉛螯合,然后通過(guò)糞便排出,因此代表了一種有前景的鉛中毒解毒方法。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：TQ464
【圖文】：

3.4 SEM 分析結(jié)果SEM分析結(jié)果如圖3-6所示，從圖3-6中可以看出在相同放大倍數(shù)條件下觀察到AEPS吸附鉛離子前后的微觀結(jié)構(gòu)明顯不同。吸附鉛離子前的 AEPS 表面呈劃痕樣粗糙的薄片結(jié)構(gòu)，整體呈現(xiàn)形狀較為規(guī)整；而 AEPS 吸附鉛離子后表面粗糙化，呈現(xiàn)出多孔空的片狀結(jié)構(gòu)，同時(shí)樣品邊緣形成不規(guī)則的凌亂結(jié)構(gòu)，表面的粗糙化是由鉛離子經(jīng) AEPS 吸附后而均勻的附著所引起，其表面物質(zhì)主要為鉛元素。

1.80±0.17f13.22±0.77f22.61±1.45f0.12±0.01e－ － － 0.92±0.18d6.64±1.24c3.06±0.40b0.07±0.01c48.73 49.79 86.450.98±0.14e8.64±0.43e11.86±1.04e0.09±0.01d45.40 34.64 47.550.74±0.09c7.21±0.64d8.68±1.41d0.07±0.01c58.86 45.40 61.620.42±0.07b5.23±0.59b4.88±0.94c0.05±0.01b76.65 60.42 78.43中數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（n=8）形式列出。同列不同小寫(xiě)字母表示差異極顯著（P<0.臟器切片 腦切片 3-8 和圖 3-9 分別是小鼠腦海馬切片和大腦皮層切片的鏡檢結(jié)果，分析圖 3知，NC 神經(jīng)元細(xì)胞飽滿，胞漿豐富。MC 神經(jīng)元細(xì)胞的數(shù)量和層次明顯減少胞核固縮，神經(jīng)突減少、變短。陽(yáng)性組大腦神經(jīng)元可見(jiàn)退行性變，部分錐體縮小，軸突變短，比較 MC，神經(jīng)元分布數(shù)量有增加，提示具有神經(jīng)元保護(hù)神經(jīng)退行性變比較明顯，細(xì)胞胞體固縮，但受損程度比 MC 有一定程度的減元數(shù)量有所增加，比較 MC，具有神經(jīng)保護(hù)作用。HD 中神經(jīng)元數(shù)量較多，比加神經(jīng)元數(shù)量，同時(shí)神經(jīng)元體積較大，證實(shí)可以有效保護(hù)神經(jīng)元。

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