【摘要】：生物活性肽又稱功能肽,根據(jù)其結(jié)構(gòu)性質(zhì)及氨基酸組成和序列的不同具有不同的生物活性,如抗氧化、增強(qiáng)免疫、降血壓及降血糖等。蜂蛹為胡蜂、黃蜂、黑蜂、土蜂等野蜂的幼蟲和蛹,含有蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)以及黃酮類等生物活性物質(zhì),其中蛋白質(zhì)是其主要活性物質(zhì),具有抗氧化、降血壓、增強(qiáng)免疫和抗腫瘤等生物活性。但目前對(duì)蜂蛹多肽的研究和開發(fā)相對(duì)滯后,有關(guān)蜂蛹多肽的制備、分離純化及生物活性的研究少,基于此,本文系統(tǒng)地研究蜂蛹營(yíng)養(yǎng)成分和活性成分;采用堿性蛋白酶酶解法制備多肽,并應(yīng)用單因素和響應(yīng)面法優(yōu)化蛋白水解條件;采用陰離子交換劑DEAE-52對(duì)蜂蛹多肽進(jìn)行分離純化,研究其氨基酸組成和純化組分,并探討純化組分的抗氧化活性,為蜂蛹多肽功能食品的研究與應(yīng)用提供基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容如下:(1)蜂蛹主要成分和營(yíng)養(yǎng)成分分析。采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法研究蜂蛹粉末中水分、灰分、蛋白質(zhì)、脂肪、總糖和黃酮含量。研究發(fā)現(xiàn)蜂蛹粉主要由水分、灰分、蛋白質(zhì)、脂肪、總糖和黃酮組成,其含量分別為15.15%、3.42%、48.13%、19.81%、10.13%和44.70 mg/100 g。蜂蛹粉末中含有18種氨基酸,氨基酸總量為42.46%,其中E/T%為37.09%,E/N%為70.65%,基本符合理想蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。蜂蛹脂肪中主要有油酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸和硬脂酸,其中含量最高的為不飽和脂肪酸——油酸,占粗脂肪總量的26.62%�？梢�,蜂蛹粉中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富,值得進(jìn)一步深入研究和開發(fā)利用。(2)蜂蛹多肽的酶解制備工藝研究。以蜂蛹粉為原料,采用索氏提取法提取蜂蛹蛋白,篩選出最佳蛋白酶,并研究其工藝。研究發(fā)現(xiàn),堿性蛋白酶為制備蜂蛹多肽的最佳蛋白酶。單因素實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)其最佳提取條件為酶濃度0.32g/L、底物濃度2 g/L、pH8.5和溫度為40℃。響應(yīng)面法研究發(fā)現(xiàn)其最佳提取工藝為酶濃度0.31 g/L、pH為8.71和溫度44℃,此條件下蜂蛹多肽水解度為14.46%,與預(yù)測(cè)值接近。(3)蜂蛹多肽的初步純化及抗氧化研究。采用陰離子交換劑DEAE-52對(duì)酶解后的蜂蛹多肽進(jìn)行初步純化,并研究其抗氧化活性。體外抗氧化實(shí)驗(yàn)表明,純化組分Ⅳ清除ABTS~+·能力最強(qiáng);Trinece-SDS-PAGE凝膠電泳分析表明,蜂蛹多肽純化組分Ⅳ主要是由小于3.3 kDa的多肽組成;氨基酸研究發(fā)現(xiàn),組分Ⅳ含有18種氨基酸,與原料相比其氨基酸含量顯著提高;抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,蜂蛹多肽純化組分Ⅳ可有效清除DPPH·、ABTS~+·、·OH和螯合Fe~(2+)能力,其EC_(50)分別為0.74、0.67、3.02和0.75 mg/mL,可顯著抑制β-胡蘿卜素/亞油酸氧化體系,且還原能力顯著強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照肌肽�？梢�,經(jīng)堿性蛋白酶酶解后的蜂蛹多肽具有較強(qiáng)的抗氧化活性。
【圖文】：

圖 3.1 酶濃度和 pH 對(duì)蜂蛹多肽水解度影響的等高線圖和相應(yīng)曲面圖.1 Contour map and corresponding surface diagram of enzyme concentrationthe hydrolytic degree of bee pupa polypeptide

圖 3.2 酶濃度和溫度對(duì)蜂蛹多肽水解度影響的等高線圖和相應(yīng)曲面圖re. 3.2 Contour map and corresponding surface diagram of the influence of econcentration and temperature on the polypeptide hydrolysis of bee pupa
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：TQ936.16

【參考文獻(xiàn)】

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1 盧紅沖;吳平;陳迪想;鐘方旭;陳西U，

本文編號(hào)：2687406