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木鱉果假種皮類胡蘿卜素的提取純化及其納米粒的制備

發(fā)布時(shí)間:2020-05-13 09:11
【摘要】:木鱉果(Momordica cochinchinensis Spreng.),葫蘆科苦瓜屬草本植物。因其假種皮內(nèi)含有大量的類胡蘿卜素(CAG)而備受人們關(guān)注,然而這類物質(zhì)穩(wěn)定性差且難溶于水,極大的限制了其在食品工業(yè)中的應(yīng)用。因此,怎樣高效利用這類物質(zhì)是我們當(dāng)前必須要研究的內(nèi)容。為此,本研究采用超聲輔助溶劑法對(duì)木鱉果假種皮內(nèi)的類胡蘿卜素進(jìn)行粗提,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上結(jié)合正交試驗(yàn)優(yōu)化了提取條件及粗提物的皂化條件,并利用薄層色譜法和柱層析進(jìn)行分離純化,通過明膠與阿拉伯膠之間的復(fù)合凝聚作用將純化的木鱉果假種皮類胡蘿卜素進(jìn)行包埋。主要試驗(yàn)結(jié)果如下:1.超聲輔助溶劑提取類胡蘿卜素,溶劑為無水乙醇:乙酸乙酯(1:1),一次提取,最優(yōu)條件為超聲功率60 W,超聲溫度65℃,超聲時(shí)間60 min,液料比25:1(mL/g),在此條件下得到的類胡蘿卜素提取量為(2.232±0.11)mg/g。在抗氧化能力測定中,類胡蘿卜素清除DPPH自由基與ABTS自由基的IC50值分別為33.5 μg/mL、26.13 μg/mL,說明類胡蘿卜素具有較強(qiáng)的抗氧化能力。2.利用KOH-乙醇溶液對(duì)類胡蘿卜素粗提物進(jìn)行皂化,最優(yōu)條件為皂化濃度3 mol/L,皂化溫度50℃,皂化時(shí)間150 min,皂化得率為(77.75±0.52)%。皂化后樣品中分別含有番茄紅素5411.37 μg/g、β-胡蘿卜素4635.51μg/g、玉米黃素32.79μg/g、葉黃素87.62 μg/g。通過薄層色譜法確定最佳洗脫劑為石油醚:乙酸乙酯(100:1),經(jīng)過硅膠柱純化后類胡蘿卜素含量由純化前的1.02%提高到3.28%,這表明硅膠能夠較好分離純化類胡蘿卜素。3.通過對(duì)復(fù)合物性質(zhì)的研究確定明膠:阿拉伯膠比例為1:1,復(fù)合凝聚反應(yīng)pH為4.89。以粒徑、多分散指數(shù)(PDI)、Zeta電位及包封率為指標(biāo),確定了 CAG-NPs的制備條件為壁材濃度0.5%、芯材濃度0.5%、乳化劑Tween 80:Span 80(1:1,w/w)總濃度0.5%、固化劑用量15 U/g明膠,在此條件下制備的納米粒平均粒徑為318 nm、PDI為0.262、包封率為89.3%,SEM圖像顯示其呈現(xiàn)較好的球形顆粒狀。穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明,光照、氧氣、溫度都對(duì)類胡蘿卜素產(chǎn)生一定程度的破壞,尤其對(duì)光照極不穩(wěn)定,而CAG-NPs能夠有效增強(qiáng)其穩(wěn)定性。
【圖文】:

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,超聲波


°'^50邐400邐450邐500邐S50逡逑<nm)逡逑圖2.1木鱉果類胡蘿卜素最大吸收波長的測定逡逑Figure邋2.1邋Determination邋of邋Maximum邋absorbtive邋wavelength邋of邋carotenoids邋of邋gac邋aril逡逑2.3.2邋(3-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑閣2.2所示為p-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)曲線,//程為y=0.0246x+0.0026,邋R2=0.9999,擬合逡逑度較好,可用于測定類胡蘿卜素含量。逡逑0.7逡逑y邋(>.0246xMM)(?26邐?逡逑0:5.邐K2娜9邋.逡逑<邐0.4逡逑S03逡逑窆邋0.2邐,,逡逑0.!邋^逡逑0.0逡逑0邐5邐10邐15邐20邐25邋M)逡逑Wi邋W邋i農(nóng)丨U邋(邋Mg邋mL邋i逡逑圖2.2邋(3-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Figure邋2.2邋Standard邋curve邋of邋p-carotene逡逑2.3.3超聲波輔助溶劑提取逡逑2.3.3.1提取溶劑的確定逡逑由于有些植物具有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁,破壁較為困難,有機(jī)溶劑不能將提取物從細(xì)胞逡逑組織中徹底溶出(許穎穎等,2016)。超聲波可利用超聲過程產(chǎn)生的空化作用,即通逡逑過溶劑中微小泡核的形成、發(fā)展和崩潰,在細(xì)胞表面引導(dǎo)液體的噴射,導(dǎo)致細(xì)胞破裂,逡逑從而提高目標(biāo)物質(zhì)的提取效率(金思等.2017)。因此,本試驗(yàn)采用了超聲波輔肋溶逡逑劑提取法提取木鱉果假種皮類胡蘿卜素。如圖2.3所示

提取量,類胡蘿卜素,次數(shù)


乙酸乙酯_(2邋:丨):6-正己烷:W酮:無水乙醇(2邋:邋1邋:邋1邋);邋7-正己烷:乙酸乙酯(丨:1)逡逑2.3.3.2提取次數(shù)的確定逡逑由圖2.4可以看出類胡蘿卜素提取量隨著提取次數(shù)的增加而略有增加。?次提取逡逑類胡蘿卜素量為2.162mg/g,三次提取量為2.265mg/g,僅增加4.8%。通過數(shù)據(jù)分析逡逑表明,提取次數(shù)對(duì)類胡蘿卜素提取量影響無顯著性差異。同時(shí)出于節(jié)約溶劑、減輕后逡逑續(xù)處理廢液工作負(fù)擔(dān)的考慮,選擇1次為最佳提取次數(shù)。逡逑3逡逑a邐a邐a逡逑:—丁邐—r—逡逑如?逡逑E逡逑^邋!?逡逑m邋|逡逑I邐2邐T逡逑提取次數(shù)逡逑圖2.4提取次數(shù)對(duì)類胡蘿卜素提取量的影響逡逑Figure邋2.4邋Effect邋of邋the邋number邋of邋extractions邋on邋carotenoids邋extraction逡逑2.3.3.3提取單因素試驗(yàn)結(jié)果逡逑(1)超聲功率對(duì)CAG提取量的影響逡逑試驗(yàn)結(jié)果如圖2.5(a)所示,在超聲功率為50?70邋W時(shí),,類胡蘿卜素提取量隨著功逡逑16逡逑
【學(xué)位授予單位】:北京林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TB383.1;O657.72;TQ28

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