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納米醇質(zhì)體的抑菌增效及作用機(jī)理研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-12 11:57
【摘要】:丁香酚屬于植物體內(nèi)的次生代謝物質(zhì),能在常溫下?lián)]發(fā)、且具有一定芳香氣味,是一類食用安全性較高的物質(zhì)。丁香酚不僅能夠矯正食品的異味、賦予香氣,而且具有抗菌生物活性,在果蔬防腐保鮮方面具有較好的應(yīng)用前景。納米醇質(zhì)體是一種特殊結(jié)構(gòu)的納米粒,具有獨(dú)特的表面效應(yīng)和量子尺寸效應(yīng),可以負(fù)載丁香酚制備成丁香酚-納米醇質(zhì)體。納米醇質(zhì)體易于在表皮滲透且具有良好的緩釋作用,從而可以顯著提高丁香酚的作用時(shí)效。本論文的主要研究結(jié)果如下:(1)制備丁香酚-納米醇質(zhì)體的最佳工藝為:丁香酚濃度0.5%,磷脂濃度2%,乙醇濃度30%,制備出的丁香酚-納米醇質(zhì)體平均粒徑44.21 nm、PDI 0.189、電位為㧟40.3 mV。抑菌活性實(shí)驗(yàn)表明,44.21 nm粒徑的丁香酚-納米醇質(zhì)體對(duì)菌絲的抑菌活性最佳。(2)最低抑菌濃度實(shí)驗(yàn)表明丁香酚-納米醇質(zhì)體對(duì)菌絲的最低抑制濃度為95μL/L,丁香酚處理組為79μL/L。納米粒的包埋緩釋效應(yīng)使得丁香酚-納米醇質(zhì)體的最低抑菌濃度略增加。丁香酚-納米醇質(zhì)體和非納米醇質(zhì)體對(duì)對(duì)香蕉炭疽菌、草莓炭疽菌、葡萄炭疽菌、枇杷炭疽菌的菌絲及孢子萌發(fā)抑菌活性表明:丁香酚-納米醇質(zhì)體的菌絲抑制率比非納米醇質(zhì)體分別高5.17%、3.93%、6.1%、2.75%。丁香酚-納米醇質(zhì)體的孢子抑制率比非納米醇質(zhì)體分別高11.52%、7.82%、2.54%、10.47%。進(jìn)一步對(duì)枇杷體內(nèi)的抑菌性進(jìn)行驗(yàn)證,在接種后6 d,對(duì)照組和非納米醇質(zhì)體組發(fā)病率均為100%,而納米醇質(zhì)體組發(fā)病率為80%。對(duì)病斑直徑的抑制結(jié)果可知,在針刺接種炭疽菌后,丁香酚-納米醇質(zhì)體處理組病斑直徑小于非納米醇質(zhì)體處理組。在6 d時(shí),10 mL的非納米醇質(zhì)體熏蒸處理后病斑直徑抑制率為52.24%,而丁香酚-納米醇質(zhì)體處理組的病斑直徑抑制率為85.75%,提高了33.51%。(3)納米醇質(zhì)體熒光染料追蹤實(shí)驗(yàn)表明,納米醇質(zhì)體在表皮滲透深度深于非納米醇質(zhì)體和丁香酚組。通過GC-MS檢測(cè)表皮不同部位丁香酚含量,在內(nèi)表皮,納米醇質(zhì)體組的丁香酚含量比非納米醇質(zhì)體組和丁香酚組高了31.3%、91.42%。表明納米醇質(zhì)體有較好的滲透特性及將藥物丁香酚送至組織內(nèi)部而起抑菌活性作用。利用納米醇質(zhì)體較好的滲透特性,通過對(duì)香蕉內(nèi)表皮針刺接種炭疽菌孢子,在培養(yǎng)4 d,非納米醇質(zhì)體抑制率為4.5%,而納米醇質(zhì)體的抑制率為62.35%,提高了57.85%。因此,納米醇質(zhì)體有良好的滲透性,可將藥物丁香酚到達(dá)病菌寄生部位(內(nèi)表層)而達(dá)到抑菌效果。(4)納米醇質(zhì)體的緩釋性研究表明,納米醇質(zhì)體有效提高了丁香酚對(duì)炭疽菌的抑菌時(shí)效。將相等丁香酚含量的丁香酚、非納米混合液和丁香酚-納米醇質(zhì)體分別置于空氣中暴露0-10 h后,再用于抑制菌絲生長實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明表明丁香酚和非納米混合液經(jīng)4 h揮發(fā)后,殘余的丁香酚完全失去了抑菌效應(yīng),而丁香酚-納米醇質(zhì)體在空氣中暴露8 h后,殘余的抑菌效率還有40.84%以上。孢子生長抑制實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明,納米醇質(zhì)體表現(xiàn)出更好的抑菌效果,對(duì)孢子生長的抑制效果達(dá)到42 h,且相比較于丁香酚組和非納米醇質(zhì)體組抑制孢子時(shí)間分別有效延長了18 h和13 h。且12 h后培養(yǎng)基中丁香酚含量持續(xù)高于非納米醇質(zhì)體組與丁香酚溶液組,從而可以說明丁香酚-納米醇質(zhì)體具有較好的緩釋性。通過以上內(nèi)容初步闡明了納米醇質(zhì)體的抑菌增效及其機(jī)理,并進(jìn)一步研究其比丁香酚乳化劑防治效應(yīng)增加的機(jī)制,可為植物精油應(yīng)用于果蔬防腐提供借鑒意義和技術(shù)依據(jù)。
【圖文】:

粒徑分布,質(zhì)體,丁香酚,納米


圖 2-1 丁香酚-納米醇質(zhì)體粒徑分布圖Fig 2-1 Size distribution of the eugenol nanoparticles圖 2-2 丁香酚-納米醇質(zhì)體電位分布圖Fig 2-2 Zeta potential distribution of the eugenol nanoparticles

丁香酚,質(zhì)體,納米


14圖 2-2 丁香酚-納米醇質(zhì)體電位分布圖Fig 2-2 Zeta potential distribution of the eugenol nanoparticles在磷脂濃度 2%,,乙醇濃度 30%,丁香酚濃度 0.5%條件下制備丁香酚-納米醇質(zhì)體,納米粒的粒徑分布如圖 2-1 所示,粒徑分布為單一的波峰,粒徑分布均中,說明丁香酚-納米醇質(zhì)體均一性良好。納米粒的 Zeta 電位分布如圖 2-2 所示,Zeta 電位在-40 mV 以上,電位分布為單一的波峰,分布集中,說明丁香酚-納米醇質(zhì)體溶液穩(wěn)定性較好。2.3.3 不同粒徑的丁香酚-納米醇質(zhì)體的抑菌活性影響選用上述制備的最佳條件丁香酚濃度 0.5%,磷脂濃度 2%。乙醇濃度分別為 20%、22%、24%、26%、28%、30%分為七組。粒徑分別為 83.8 nm、77.21 nm、70.32 nm、68.32 nm、55.5 nm、44.21 nm。以不加精油組為對(duì)照組,采用生長速率法測(cè)定抑菌
【學(xué)位授予單位】:浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:TQ654.2

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本文編號(hào):2660183

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