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優(yōu)良乙醇發(fā)酵菌株應(yīng)用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-04-07 03:04
【摘要】:人們對(duì)乙醇的需求日益增加,酒精發(fā)酵工業(yè)更多將研究放在提高生產(chǎn)效益,降低企業(yè)生產(chǎn)成本。釀酒酵母是乙醇發(fā)酵中的常用菌,釀酒酵母的性能對(duì)乙醇發(fā)酵起著至關(guān)重要的作用,一株優(yōu)良的釀酒酵母菌株能大大提高乙醇發(fā)酵產(chǎn)量。酒精濃醪發(fā)酵技術(shù)是一項(xiàng)有前景的技術(shù),并能提高酒精廠綜合效益,優(yōu)化酒精濃醪發(fā)酵條件,有利于乙醇產(chǎn)量的提高。改良活性干酵母發(fā)酵工藝,提高活性干酵母的產(chǎn)率,得到更高質(zhì)量的活性干酵母產(chǎn)品,可促進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量的提高和酵母的廣泛應(yīng)用。因此本論文將著重對(duì)以上方面進(jìn)行研究,以此提高乙醇發(fā)酵水平。本論文首先對(duì)玉米培養(yǎng)基的濃醪發(fā)酵過程進(jìn)行跟蹤檢測(cè),通過比較乙醇發(fā)酵過程中殘留還原糖含量,確定乙醇發(fā)酵終點(diǎn)為72h,此時(shí)殘還原糖含量基本達(dá)到2%以下并無明顯后續(xù)變化;將本實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)存的經(jīng)過誘變選育的17株釀酒酵母菌株同時(shí)應(yīng)用于乙醇發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中,并對(duì)其進(jìn)行跟蹤檢測(cè),通過比較乙醇發(fā)酵過程中殘留還原糖含量和發(fā)酵結(jié)束時(shí)的乙醇產(chǎn)量,發(fā)現(xiàn)在17株釀酒酵母中,H1、H3、H7、H17四株釀酒酵母菌株表現(xiàn)較好,這四個(gè)菌所接入的發(fā)酵培養(yǎng)基,在發(fā)酵結(jié)束時(shí),發(fā)酵液中殘留還原糖含量較低,乙醇產(chǎn)量較高,均優(yōu)于其他13個(gè)發(fā)酵樣品,因此,篩選出四株較為優(yōu)良的釀酒酵母用于接下來的實(shí)驗(yàn)中。改變酵母培養(yǎng)時(shí)液體YPD培養(yǎng)基的葡萄糖添加量、乙醇添加量和發(fā)酵液中的接菌量以及發(fā)酵培養(yǎng)基的初始糖濃度,優(yōu)化乙醇發(fā)酵條件。測(cè)定發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液中殘留還原糖含量和產(chǎn)乙醇量,分析對(duì)比數(shù)值差異。研究發(fā)現(xiàn),酒精濃醪發(fā)酵的最優(yōu)條件是:酵母培養(yǎng)液體YPD培養(yǎng)基中不添加葡萄糖,添加乙醇6%,發(fā)酵液中接菌量為1*108 cfu/mL,發(fā)酵培養(yǎng)基的初糖濃度是220 g/L;钚愿山湍钢苽溥^程中,離心條件、保護(hù)劑的選擇和復(fù)水活化條件是影響成品質(zhì)量的因素。改變離心速率、時(shí)間和復(fù)水活化的活化液葡萄糖含量、溫度、時(shí)間,分析對(duì)比發(fā)現(xiàn):最佳離心條件是4500 r/min、10 min,最佳保護(hù)劑是乳糖,最適復(fù)水活化條件是:用水稀釋數(shù)為1:25、復(fù)水活化液葡萄糖含量為5%、復(fù)水活化溫度為45℃、復(fù)水活化時(shí)間為30 min。將制得的活性干酵母和鮮酵母同時(shí)應(yīng)用于發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中,通過對(duì)發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液中成分分析,可知在相同條件下進(jìn)行發(fā)酵,二者在發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液中殘留還原糖含量和乙醇含量較為接近,因此,活性干酵母代替鮮酵母用于高濃度酒精發(fā)酵中是可行的。
【圖文】:

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,葡萄糖,比色管


圖2-1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Fig.邋2-1邋The邋standard邋curve邋of邋glucose逡逑②樣品測(cè)定:預(yù)實(shí)驗(yàn):1、樣品液適當(dāng)稀釋,取稀釋液l.0邋mL于15邋mL比色管中,逡逑加入DNS試劑2.0邋mL,沸水浴加熱5邋min,取出比色管用流動(dòng)水冷卻20邋min,用逡逑足到15邋mL刻度并混勻,分別取200邋pL加入96孔板中,用酶標(biāo)儀在540邋nm波逡逑測(cè)定吸光度,,分析數(shù)據(jù),若吸光度太大,要對(duì)樣品稀釋液再進(jìn)行稀釋,直至稀釋逡逑光度合適以備使用。逡逑正式實(shí)驗(yàn):預(yù)實(shí)驗(yàn)中選擇合適的樣品稀釋液,取稀釋液1.0邋mL于15邋mL比色管逡逑確加入DNS試劑2.0邋mL,沸水浴加熱5邋min,取出比色管用流動(dòng)水冷卻20邋min,逡逑補(bǔ)足到15邋mL刻度并混勻,分別。玻埃白蚣尤耄梗犊装逯校妹笜(biāo)儀在540nm波逡逑測(cè)定吸光度,記錄數(shù)值,根據(jù)還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中還原糖的含量。逡逑1.4乙醇含量的測(cè)定(重鉻酸鉀比色法)逡逑提前打開旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀開關(guān),設(shè)置溫度為45°C,進(jìn)行預(yù)熱,預(yù)熱結(jié)束后,將發(fā)酵結(jié)逡逑樣品溶液經(jīng)離心處理后所得上清液吸。0邋mL液體放入蒸發(fā)瓶中,固定于旋轉(zhuǎn)蒸逡逑一端;將一空蒸發(fā)瓶固定于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的另一端,用于接收被蒸發(fā)出的有機(jī)溶劑。逡逑

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,乙醇,比色管


邐1.2逡逑還原糖濃度(mg/mL)逡逑圖2-1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑Fig.邋2-1邋The邋standard邋curve邋of邋glucose逡逑②樣品測(cè)定:預(yù)實(shí)驗(yàn):1、樣品液適當(dāng)稀釋,取稀釋液l.0邋mL于15邋mL比色管中,逡逑準(zhǔn)確加入DNS試劑2.0邋mL,沸水浴加熱5邋min,取出比色管用流動(dòng)水冷卻20邋min,用逡逑水補(bǔ)足到15邋mL刻度并混勻,分別。玻埃板澹穑碳尤耄梗犊装逯,用酶標(biāo)儀在540邋nm波逡逑長(zhǎng)下測(cè)定吸光度,分析數(shù)據(jù),若吸光度太大,要對(duì)樣品稀釋液再進(jìn)行稀釋,直至稀釋逡逑液吸光度合適以備使用。逡逑正式實(shí)驗(yàn):預(yù)實(shí)驗(yàn)中選擇合適的樣品稀釋液,取稀釋液1.0邋mL于15邋mL比色管逡逑中,準(zhǔn)確加入DNS試劑2.0邋mL,沸水浴加熱5邋min,取出比色管用流動(dòng)水冷卻20邋min,逡逑用水補(bǔ)足到15邋mL刻度并混勻,分別。玻埃白蚣尤耄梗犊装逯,用酶標(biāo)儀在540nm波逡逑長(zhǎng)下測(cè)定吸光度
【學(xué)位授予單位】:天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:TQ920.6;TQ223.122

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本文編號(hào):2617362

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