蘋果Md TFL1可抑制成花、推遲營養(yǎng)生長向生殖生長的轉(zhuǎn)變,且前人研究表明不同蘋果屬資源成花特性與Md TFL1表達水平顯著相關,但原因和相關調(diào)控機制有待解析。本研究以不同負載量‘長富2號’為材料（負載量高為大年樹,負載量低為小年樹）,結(jié)合外源GA₃處理,檢測花芽生理分化期GAs含量和Md TFL1的表達模式,同時克隆不同成花特性蘋果屬資源Md TFL1-2啟動子序列,分析其變異特征。本研究有助于解析不同蘋果屬資源Md TFL1-2的表達特征及其與成花能力的關系,對改善蘋果成花特性和改良成花調(diào)控技術均具有重要的理論和實踐意義。1. 以不同負載量的9年生‘長富2號’為材料,結(jié)合外源GA₃處理,檢測了花芽生理分化期短枝頂芽中內(nèi)源GAs含量和Md TFL1的表達模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn),小年樹花芽的長、寬、鮮重以及翌年成花率顯著高于大年樹,GA₁₊₃、GA₄₊₇含量顯著低于大年樹,Md TFL1-1、Md TFL1-2的表達水平均呈先上升后下降的趨勢,且盛花期后70 d大年樹中Md TFL1-2的表達量再次高于小年樹...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 研究背景
    1.2 植物成花途徑
    1.3 蘋果花芽分化研究進展
        1.3.1 蘋果花芽分化過程
        1.3.2 蘋果花芽分化生理和分子研究進展
    1.4 TFL1研究進展
    1.5 研究目的與意義
第二章 不同負載量和GA3處理對花芽生理分化期Md TFL1-2 基因表達的影響
    2.1 試驗材料
    2.2 試驗方法
        2.2.1 樹體生長發(fā)育指標、內(nèi)源激素含量和成花率測定
        2.2.2 試驗材料RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和實時熒光定量分析
        2.2.3 數(shù)據(jù)處理及圖表制作
    2.3 試驗結(jié)果與分析
        2.3.1 不同果實負載量的‘長富2號’樹體生長、內(nèi)源激素含量和成花相關指標的統(tǒng)計
        2.3.2 不同果實負載量對Md TFL1-2、成花相關基因和GA合成代謝相關基因表達量的影響
        2.3.3 GA₃處理對‘長富2號’樹體生長、內(nèi)源激素含量和成花相關指標的影響
        2.3.4 GA₃ 處理對Md TFL1-2、成花相關基因和GA合成代謝相關基因表達量的影響
    2.4 討論
第三章 蘋果屬MdTFL1-2基因編碼區(qū)和啟動子序列變異特征分析
    3.1 材料
    3.2 試驗方法
        3.2.1 不同蘋果屬資源DNA、RNA的提取、反轉(zhuǎn)錄和實時熒光定量分析
        3.2.2 不同蘋果屬資源MdTFL1-2編碼區(qū)和啟動子的克隆與序列分析
    3.3 試驗結(jié)果
        3.3.1 不同蘋果屬資源MdTFL1-2基因編碼區(qū)克隆及序列分析
        3.3.2 不同蘋果屬資源MdTFL1-2基因啟動子區(qū)克隆及序列分析
    3.4 討論
第四章 蘋果屬MdTFL1-2啟動子序列變異對其表達水平的影響
    4.1 材料
    4.2 試驗方法
        4.2.1 啟動子活性分析
        4.2.2 不同變異類型的MdTFL1-2的表達分析
        4.2.3 擬南芥遺傳株系的轉(zhuǎn)化
        4.2.4 酵母單雜篩庫
        4.2.5 轉(zhuǎn)錄因子的分離與驗證
    4.3 試驗結(jié)果
        4.3.1 啟動子活性分析
        4.3.2 MdTFL1-2啟動子變異類型對其表達水平的影響
        4.3.3 不同轉(zhuǎn)基因擬南芥陽性株系的統(tǒng)計
        4.3.4 MdTFL1-2候選上游轉(zhuǎn)錄因子的篩選
        4.3.5 MdTFL1-2與候選上游轉(zhuǎn)錄因子的初步驗證
    4.4 討論
第五章 MdTFL1-2與互作蛋白的驗證
    5.1 材料
    5.2 試驗方法
        5.2.1 酵母雙雜交試驗
        5.2.2 雙分子熒光互補試驗
        5.2.3 亞細胞定位試驗
        5.2.4 MdNAC090的表達特性分析
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 Md TFL1-2與Md NAC090、Md PP2C12和Md PATL6 蛋白互作的初步驗證
        5.3.2 雙分子熒光互補試驗驗證Md TFL1-2與Md NAC090 的蛋白互作
        5.3.3 MdNAC090的亞細胞定位分析
        5.3.4 MdNAC090的表達特性分析
    5.4 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
個人簡歷



本文編號：4037264