蘋果Md TFL1可抑制成花、推遲營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)變,且前人研究表明不同蘋果屬資源成花特性與Md TFL1表達(dá)水平顯著相關(guān),但原因和相關(guān)調(diào)控機(jī)制有待解析。本研究以不同負(fù)載量‘長(zhǎng)富2號(hào)’為材料（負(fù)載量高為大年樹,負(fù)載量低為小年樹）,結(jié)合外源GA₃處理,檢測(cè)花芽生理分化期GAs含量和Md TFL1的表達(dá)模式,同時(shí)克隆不同成花特性蘋果屬資源Md TFL1-2啟動(dòng)子序列,分析其變異特征。本研究有助于解析不同蘋果屬資源Md TFL1-2的表達(dá)特征及其與成花能力的關(guān)系,對(duì)改善蘋果成花特性和改良成花調(diào)控技術(shù)均具有重要的理論和實(shí)踐意義。1. 以不同負(fù)載量的9年生‘長(zhǎng)富2號(hào)’為材料,結(jié)合外源GA₃處理,檢測(cè)了花芽生理分化期短枝頂芽中內(nèi)源GAs含量和Md TFL1的表達(dá)模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn),小年樹花芽的長(zhǎng)、寬、鮮重以及翌年成花率顯著高于大年樹,GA₁₊₃、GA₄₊₇含量顯著低于大年樹,Md TFL1-1、Md TFL1-2的表達(dá)水平均呈先上升后下降的趨勢(shì),且盛花期后70 d大年樹中Md TFL1-2的表達(dá)量再次高于小年樹...

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 研究背景
    1.2 植物成花途徑
    1.3 蘋果花芽分化研究進(jìn)展
        1.3.1 蘋果花芽分化過程
        1.3.2 蘋果花芽分化生理和分子研究進(jìn)展
    1.4 TFL1研究進(jìn)展
    1.5 研究目的與意義
第二章 不同負(fù)載量和GA3處理對(duì)花芽生理分化期Md TFL1-2 基因表達(dá)的影響
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 樹體生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)、內(nèi)源激素含量和成花率測(cè)定
        2.2.2 試驗(yàn)材料RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)熒光定量分析
        2.2.3 數(shù)據(jù)處理及圖表制作
    2.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 不同果實(shí)負(fù)載量的‘長(zhǎng)富2號(hào)’樹體生長(zhǎng)、內(nèi)源激素含量和成花相關(guān)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)
        2.3.2 不同果實(shí)負(fù)載量對(duì)Md TFL1-2、成花相關(guān)基因和GA合成代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響
        2.3.3 GA₃處理對(duì)‘長(zhǎng)富2號(hào)’樹體生長(zhǎng)、內(nèi)源激素含量和成花相關(guān)指標(biāo)的影響
        2.3.4 GA₃ 處理對(duì)Md TFL1-2、成花相關(guān)基因和GA合成代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響
    2.4 討論
第三章 蘋果屬M(fèi)dTFL1-2基因編碼區(qū)和啟動(dòng)子序列變異特征分析
    3.1 材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 不同蘋果屬資源DNA、RNA的提取、反轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)熒光定量分析
        3.2.2 不同蘋果屬資源MdTFL1-2編碼區(qū)和啟動(dòng)子的克隆與序列分析
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 不同蘋果屬資源MdTFL1-2基因編碼區(qū)克隆及序列分析
        3.3.2 不同蘋果屬資源MdTFL1-2基因啟動(dòng)子區(qū)克隆及序列分析
    3.4 討論
第四章 蘋果屬M(fèi)dTFL1-2啟動(dòng)子序列變異對(duì)其表達(dá)水平的影響
    4.1 材料
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 啟動(dòng)子活性分析
        4.2.2 不同變異類型的MdTFL1-2的表達(dá)分析
        4.2.3 擬南芥遺傳株系的轉(zhuǎn)化
        4.2.4 酵母單雜篩庫(kù)
        4.2.5 轉(zhuǎn)錄因子的分離與驗(yàn)證
    4.3 試驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 啟動(dòng)子活性分析
        4.3.2 MdTFL1-2啟動(dòng)子變異類型對(duì)其表達(dá)水平的影響
        4.3.3 不同轉(zhuǎn)基因擬南芥陽(yáng)性株系的統(tǒng)計(jì)
        4.3.4 MdTFL1-2候選上游轉(zhuǎn)錄因子的篩選
        4.3.5 MdTFL1-2與候選上游轉(zhuǎn)錄因子的初步驗(yàn)證
    4.4 討論
第五章 MdTFL1-2與互作蛋白的驗(yàn)證
    5.1 材料
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 酵母雙雜交試驗(yàn)
        5.2.2 雙分子熒光互補(bǔ)試驗(yàn)
        5.2.3 亞細(xì)胞定位試驗(yàn)
        5.2.4 MdNAC090的表達(dá)特性分析
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 Md TFL1-2與Md NAC090、Md PP2C12和Md PATL6 蛋白互作的初步驗(yàn)證
        5.3.2 雙分子熒光互補(bǔ)試驗(yàn)驗(yàn)證Md TFL1-2與Md NAC090 的蛋白互作
        5.3.3 MdNAC090的亞細(xì)胞定位分析
        5.3.4 MdNAC090的表達(dá)特性分析
    5.4 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4037264