魚類精子活力的影響因素復(fù)雜多樣,其中水通道蛋白和p H是重要的影響因素。水通道蛋白是一種位于生物細(xì)胞膜上的內(nèi)在膜蛋白,可以控制水分子及其他小分子物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞,對生物體的正常生理活動至關(guān)重要。目前在哺乳類中共發(fā)現(xiàn)13種水通道蛋白,其中有8種在魚類生殖系統(tǒng)中被發(fā)現(xiàn)。有研究表明,AQP7在心肌細(xì)胞中能轉(zhuǎn)運(yùn)甘油提供能量;AQP7對精子轉(zhuǎn)運(yùn)水的能力并無影響,可能通過運(yùn)輸甘油來提供能量基質(zhì)來影響精子活力;AQP8在調(diào)節(jié)精子體積和線粒體內(nèi)活性氧簇運(yùn)輸方面十分重要。關(guān)于p H對魚類精子活力的影響,以往研究多集中在外界不同p H對精子活力的影響,對精液自身p H與精子活力關(guān)系研究的較少。在我國大菱鲆(Scophthalmus maximus)是重要的海水經(jīng)濟(jì)魚類,本論文以大菱鲆為研究對象,闡明AQP7、AQP8在大菱鲆精子發(fā)育及成熟過程中的表達(dá)特征及對精子活力的影響機(jī)制,同時通過對大菱鲆精子活力的檢測和評價,探究精液活力與p H的關(guān)系。主要結(jié)果如下:1)獲得AQP7基因全長共1315bp,獲得了AQP8部分片段共584bp;AQP7、AQP8mRNA在精巢表達(dá)情況從2期到5期先升高后降低,其最高峰分別為...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 水通道蛋白的發(fā)現(xiàn)
    1.2 水通道蛋白的分類
    1.3 水通道蛋白的結(jié)構(gòu)
    1.4 研究進(jìn)展
    1.5 魚類中的研究
    1.6 pH值對精子活力的影響
    1.7 研究意義
第二章 大菱鲆水通道蛋白 7、8 的克隆及表達(dá)
    2.1 研究背景
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 試劑和儀器
        2.2.3 大菱鲆AQP7、8 基因克隆
        2.2.4 AQP7序列分析及進(jìn)化樹構(gòu)建
        2.2.5 AQP7、AQP8在大菱鲆繁殖期精巢中的熒光定量檢測
        2.2.6 AQP7、AQP8在大菱鲆繁殖期精巢中的原位雜交檢測
        2.2.7 AQP7免疫印跡和免疫組化
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 AQP7實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.2 AQP8實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 討論
第三章 大菱鲆精子運(yùn)動特征與精液pH的相關(guān)性研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 親魚來源
        3.1.2 藥品及儀器
        3.1.3 采集方法
        3.1.4 精子質(zhì)量檢測
        3.1.5 統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 大菱鲆精子活化率與運(yùn)動特征參數(shù)
        3.2.2 大菱鲆精液pH與精子運(yùn)動特征參數(shù)
        3.2.3 大菱鲆精液pH與精子活化率
        3.2.4 精子壽命
        3.2.5 大菱鲆精液pH與精子壽命
        3.2.6 甘油對精子激活后精子壽命的影響
    3.3 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷及攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果



本文編號：3795792