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凡納濱對蝦微粒體谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶3基因克隆及其功能分析

發(fā)布時間:2023-04-21 01:02
  【目的】明確凡納濱對蝦微粒體谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶3(LvMGST3)在機體抗逆境脅迫與抵御病原體侵染過程中的功能作用,為有效提高對蝦的抗脅迫能力和抗病力提供理論依據(jù)!痉椒ā坎捎肦ACE克隆LvMGST3基因c DNA序列,以EditSeq、ExPASy、SignalP 5.0、TMHMM 2.0、Clustal X和MEGA 6.0等在線軟件進行生物信息學分析,再應(yīng)用半定量PCR進行組織表達量分析。凡納濱對蝦分別進行氨氮脅迫(20.00 mg/L)及脂多糖(LPS,8μg/g)刺激后,采用實時熒光定量PCR檢測分析LvMGST3基因的表達響應(yīng)情況!窘Y(jié)果】LvMGST3基因cDNA序列全長826 bp,包含85 bp的5’端非編碼區(qū)(5’-UTR)、321 bp的3’端非編碼區(qū)(3’-UTR)和420 bp的開放閱讀框(ORF),在ploy(A)尾前端15個核苷酸處存在加尾信號AATAAA。LvMGST3基因編碼139個氨基酸殘基,包含MGST3亞家族共有的保守結(jié)構(gòu)域FNCX1QRX2H,此序列為FNCYQRAH。LvMGST3蛋白分子量為15.53 kD,理論等電點(pI)為9.38,...

【文章頁數(shù)】:10 頁

【文章目錄】:
0 引言
1 材料與方法
    1.1 供試凡納濱對蝦
    1.2 凡納濱對蝦總RNA提取及c DNA合成
    1.3 Lv MGST3基因c DNA序列克隆
    1.4 Lv MGST3基因序列分析
    1.5 Lv MGST3基因組織分布特征分析
    1.6 氨氮脅迫及LPS刺激后Lv MGST3基因表達差異分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 Lv MGST3基因c DNA序列分析結(jié)果
    2.2 Lv MGST3蛋白生物信息學分析結(jié)果
    2.3 Lv MGST3基因同源性及系統(tǒng)發(fā)育進化樹分析結(jié)果
    2.4 Lv MGST3基因在凡納濱對蝦各組織中的表達分析結(jié)果
    2.5 氨氮脅迫下Lv MGST3基因的表達變化特征
    2.6 LPS刺激后Lv MGST3基因的表達變化特征
3 討論
4 結(jié)論



本文編號:3795517

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