一、微衛(wèi)星標記在刺參人工繁育中親本識別的應(yīng)用親子鑒定最早應(yīng)用于司法鑒定領(lǐng)域，隨著其技術(shù)發(fā)展成熟，現(xiàn)在已經(jīng)廣泛地應(yīng)用到動物學、植物學及生態(tài)學等相關(guān)領(lǐng)域。在水產(chǎn)動物遺傳育種中，隨著現(xiàn)代生物科技的不斷發(fā)展，親子鑒定也廣泛的為良種選育、系譜追蹤提供技術(shù)支持，應(yīng)用親子鑒定技術(shù)鑒別個體身份，清晰系譜信息有著極為重要的現(xiàn)實意義。本研究選取8個高多態(tài)性的微衛(wèi)星位點，對240頭刺參幼體和14頭疑似親本進行親緣關(guān)系的鑒定。通過檢測，8個微衛(wèi)星位點共得到53個等位基因，平均等位基因數(shù)為6.63；觀察雜合度在0.730-0.902之間；各位點的多態(tài)信息含量為0.696-0.836。通過親緣關(guān)系分析軟件CERVUS3.0分析，微衛(wèi)星位點累積排除概率分別為0.9934，0.9997，0.99999�；谂懦▊�體基因型判定，有37個子代有1個候選親本，194個子代有2個及以上候選親本；基于似然法判定，置信度為80%時，有198個子代個體找到最似親本。綜合排除法和似然法的親權(quán)鑒定，成功為229個子代個體找到它們的親本，鑒定成功率達95%以上，研究結(jié)果可為刺參良種選育中混養(yǎng)群體優(yōu)勢性狀溯源、系譜明晰提供便捷可靠的工具... 

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
上海海洋大學 李雪燕碩士學位論文答辯委員會成員名單
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1 刺參（Apostichopus japonicus）概述
    2 微衛(wèi)星標記在刺參人工繁育中親本識別的應(yīng)用
        2.1 微衛(wèi)星標記技術(shù)
        2.2 利用微衛(wèi)星標記進行親緣關(guān)系鑒定
        2.3 親子鑒定方法的簡介
        2.4 影響親子鑒定準確性的因素
        2.5 親子鑒定的目的和意義
    3 刺參對溫度適應(yīng)的研究
        3.1 溫度對刺參生長的影響
        3.2 刺參在夏眠過程中的調(diào)控
    4 表觀遺傳調(diào)控
        4.1 表觀遺傳學
        4.2 表觀遺傳調(diào)控相關(guān)基因
        4.3 實時熒光定量 PCR
        4.4 研究的目的和意義
第二章 微衛(wèi)星標記在刺參人工繁育中親本識別的應(yīng)用
    1 材料與方法
        1.1 實驗樣品
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 實驗方法
            1.4.1 成參 DNA 的提取
            1.4.2 幼參 DNA 的提取
            1.4.3 微衛(wèi)星位點
            1.4.4 PCR 擴增條件
        1.5 電泳檢測與條帶統(tǒng)計
            1.5.1 配制非變性聚丙烯酰胺膠
            1.5.2 凝膠電泳
        1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    2 實驗結(jié)果
        2.1 DNA 的提取檢測及位點擴增結(jié)果
        2.2 微衛(wèi)星位點擴增結(jié)果分析
        2.3 排除概率和累積排除概率
        2.4 基于排除法的親子鑒定結(jié)果
        2.5 基于似然法的親子鑒定結(jié)果
    3 討論
第三章 表觀遺傳調(diào)控相關(guān)基因在不同脅迫溫度下的表達
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑
        1.3 實驗樣品
        1.4 總 RNA 提取
        1.5 逆轉(zhuǎn)錄合成 cDNA 模板
        1.6 Real-time PCR
            1.6.1 引物
            1.6.2 real-time PCR 反應(yīng)體系
        1.7 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 RNA 提取與反轉(zhuǎn)錄
        2.2 不同溫度脅迫下的刺參表觀調(diào)控相關(guān)基因的表達
    3 討論
第四章 刺參表觀遺傳調(diào)控基因在不同脅迫時間下的表達
    1 材料與方法
        1.1 實驗樣品
        1.2 總 RNA 的提取
        1.3 逆轉(zhuǎn)錄合成 cDNA 模板
        1.4 Real-time PCR
        1.5 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 RNA 提取與反轉(zhuǎn)錄
        2.2 高溫脅迫過程中表觀遺傳調(diào)控基因的表達
    3 討論
    4 小結(jié)
參考文獻
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【參考文獻】：
期刊論文
[1]黑龍江野鯉與德國鏡鯉雜交組合的親子鑒定分析[J]. 葛會爭,賈智英,李池陶,柏盈盈,武耀,石連玉.  上海海洋大學學報. 2012(04)
[2]微衛(wèi)星標記在不同殼色蝦夷扇貝家系親權(quán)鑒定的適用性[J]. 程鵬,楊愛國,吳彪,周麗青,李霞.  水生生物學報. 2011(05)
[3]大菱鲆親子鑒定的微衛(wèi)星多重PCR技術(shù)建立及應(yīng)用[J]. 苗貴東,杜民,楊景峰,徐營,樊廷俊,陳松林.  中國海洋大學學報(自然科學版). 2011(Z1)
[4]微衛(wèi)星標記在穿山甲個體識別中的應(yīng)用[J]. 高賽飛,于冬梅,王瑩,彭建軍.  生物技術(shù)通報. 2010(12)
[5]基于微衛(wèi)星位點的人工圈養(yǎng)豚鹿親子關(guān)系鑒定[J]. 余建秋,王強,劉選珍,鄧家波,趙波,牛李麗,連虹,阮向東.  獸類學報. 2010(02)
[6]刺參基因組DNA提取的探討[J]. 孫孝德,孫國華,楊建敏,吉成龍,王衛(wèi)軍,宋志樂.  生物技術(shù)通報. 2010(03)
[7]薩羅羅非魚（Sarotherodon melanotheron）與其他5種羅非魚遺傳多樣性比較研究[J]. 李學軍,李愛景,李思發(fā),蔡完其.  海洋與湖沼. 2010(01)
[8]DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的表達調(diào)控及主要生物學功能[J]. 蘇玉,王溪,朱衛(wèi)國.  遺傳. 2009(11)
[9]微衛(wèi)星DNA標記在大口黑鱸親權(quán)鑒定中的應(yīng)用[J]. 何小燕,白俊杰,劉小林,樊佳佳,何小平,李勝杰,葉星.  西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2009(08)
[10]Abscisic Acid-mediated Epigenetic Processes in Plant Development and Stress Responses[J]. Viswanathan Chinnusamy.  Journal of Integrative Plant Biology. 2008(10)

碩士論文
[1]應(yīng)用微衛(wèi)星確定中國西門塔爾牛親緣關(guān)系[D]. 賀建寧.中國農(nóng)業(yè)科學院 2010



本文編號：3666487