熱激反應(yīng)相關(guān)基因?qū)C(jī)體在高溫及缺氧應(yīng)激條件下啟動(dòng)熱休克反應(yīng)具有重要作用。本研究通過(guò)簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增、轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)查找并結(jié)合SMART-RACE技術(shù)成功克隆得到5條熱休克及免疫調(diào)控相關(guān)基因:熱休克轉(zhuǎn)錄因子1（heat shock transcriptional factor 1,HSF1）、熱休克因子結(jié)合蛋白1（heat shock factor binding protein 1,HSBP1）、熱休克蛋白90（heat shock protein 90,HSP90）、同種移植炎癥因子1（allograft inflammatory factor 1,AIF-1）和紫色酸性磷酸酯酶（Purple acid phosphatase,PAP）,并分別命名為HdHSF1、HdHSBP1、HdHSP90、HdAIF-1和HdPAP。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)分析雜色鮑若干熱激反應(yīng)基因在高溫和缺氧應(yīng)激過(guò)程中的變化。通過(guò)培養(yǎng)雜色鮑血細(xì)胞,運(yùn)用RNAi技術(shù)對(duì)HdHSF1干擾后,檢測(cè)其它熱休克相關(guān)基因的表達(dá)情況并作分析。主要的研究結(jié)果如下:（1）HdHSF1的cDNA全長(zhǎng)為2134 bp,編碼5... 

【文章來(lái)源】：集美大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
基因名稱英文縮略詞表
第1章 引言
    1.1 應(yīng)激及應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生
        1.1.1 應(yīng)激的類型
        1.1.2 熱應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生
        1.1.3 缺氧應(yīng)激的發(fā)生
    1.2 熱休克轉(zhuǎn)錄因子1的熱啟動(dòng)調(diào)控作用
    1.3 熱休克因子結(jié)合蛋白1參與熱休克調(diào)控
    1.4 熱休克蛋白的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用
    1.5 熱激信號(hào)傳導(dǎo)途徑
    1.6 生物耐熱性獲得
    1.7 本研究的目的與意義
    1.8 主要研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線
        1.8.1 主要研究?jī)?nèi)容
        1.8.2 主要技術(shù)路線
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑和儀器
        2.1.3 引物
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 總RNA的提�。≧DP法）和去除DNA的污染
        2.2.2 合成RT-PCR cDNA第一鏈和PCR擴(kuò)增獲取基因cDNA片段
        2.2.3 SMART-RACE技術(shù)獲取基因全長(zhǎng)
        2.2.4 割膠純化基因片段
        2.2.5 與質(zhì)粒載體連接
        2.2.6 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及篩選
        2.2.7 質(zhì)粒插入片段的檢測(cè)
        2.2.8 質(zhì)粒測(cè)序
        2.2.9 目的基因的生物信息學(xué)分析
        2.2.10 RNA干擾實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系及條件
第3章 結(jié)果
    3.1 雜色鮑各組織總RNA的抽提結(jié)果
    3.2 HdHSF1、HdHSBP1、HdHSP90、HdAIF-1 和HdPAP基因序列分析
    3.3 HdHSF1、HdHSBP1、HdHSP90、HdAIF-1 和HdPAP基因各組織表達(dá)
    3.4 熱休克及免疫相關(guān)基因在應(yīng)激情況下的表達(dá)
        3.4.1 高溫和缺氧應(yīng)激下熱休克及免疫相關(guān)基因的表達(dá)
        3.4.2 其它若干熱休克相關(guān)基因的應(yīng)激表達(dá)情況
    3.5 熱休克及免疫相關(guān)基因在HdHSF1干擾下的表達(dá)情況
第4章 討論
    4.1 熱休克轉(zhuǎn)錄因子 1、熱休克因子結(jié)合蛋白1和熱休克蛋白 90
    4.2 同種移植炎癥因子 1
    4.3 紫色酸性磷酸酯酶
    4.4 其它熱休克相關(guān)蛋白
第5章 結(jié)論和展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文和研究成果
    1. 發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
    2. GenBank注冊(cè)的功能基因


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蛋雞常用抗熱應(yīng)激的添加劑[J]. 張君.  養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn). 2012(04)
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博士論文
[1]刺參Apostichopus japonicus （Selenka）對(duì)溫度脅迫響應(yīng)分子機(jī)理的基礎(chǔ)研究[D]. 趙歡.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011
[2]刺參（Apostichopus Japonicus）對(duì)溫度變化的生態(tài)生理學(xué)響應(yīng)機(jī)制[D]. 紀(jì)婷婷.中國(guó)海洋大學(xué) 2009

碩士論文
[1]雜色鮑若干免疫相關(guān)基因的克隆和分析[D]. 王寶珍.集美大學(xué) 2009
[2]若干大黃魚(yú)性腺發(fā)育相關(guān)基因的克隆與表達(dá)[D]. 周鵬.集美大學(xué) 2009
[3]雜色鮑sod、cat和mpeg基因的克隆與分析[D]. 張克烽.集美大學(xué) 2007
[4]大黃魚(yú)抗病功能基因的克隆與分析[D]. 謝芳靖.集美大學(xué) 2007
[5]環(huán)境脅迫對(duì)凡納濱對(duì)蝦行為和生理活動(dòng)的影響[D]. 周小壯.暨南大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3642330