高遷移率族蛋白2（High-mobility group box 2,HMGB2）是一類非組蛋白染色質(zhì)結(jié)合蛋白。其參與很多生理過程,如轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)、重組、分化以及胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等。新近的研究表明,哺乳動物HMGB2可識別病毒DNA,從而在核酸調(diào)節(jié)的抗病毒先天免疫應(yīng)答中發(fā)揮“哨兵”作用。然而,到目前為止,對于魚類HMGB2在抗病毒免疫應(yīng)答中的作用知之甚少。草魚（Ctenopharyngodon idella）是我國重要的淡水養(yǎng)殖魚類,然而,由草魚出血病病毒（Grass carp reovirus,GCRV）引起的草魚出血病給草魚養(yǎng)殖業(yè)帶來了重大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究克隆了Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的c DNA全長序列,初步研究了其抗病毒免疫功能并揭示了其動態(tài)亞細(xì)胞定位調(diào)控機(jī)制。取得的主要結(jié)果包括:1.Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的c DNA均編碼213個氨基酸,包含2個N端的box結(jié)構(gòu)域和1個C端尾巴結(jié)構(gòu)域。2.Ci HMGB2a和Ci HMGB2b在草魚組織中廣泛表達(dá);而GCRV感染引起了Ci HMGB2a和Ci HMGB2b在脾臟和頭腎組織中顯著上調(diào)。3.在C... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 草魚出血病概述
        1.1.1 草魚養(yǎng)殖概況
        1.1.2 草魚養(yǎng)殖概況草魚出血病及其防治策略
    1.2 魚類先天性免疫概述
        1.2.1 先天性免疫的模式識別受體
        1.2.2 IFN調(diào)節(jié)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.2.3 HMGBs
    1.3 研究的目的和意義
        1.3.1 本研究的目的
        1.3.2 本研究的意義
第二章 草魚HMGB2蛋白抗病毒功能及其動態(tài)亞細(xì)胞定位誘導(dǎo)機(jī)制研究
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 RNA提取與c DNA合成
        2.2.3 引物設(shè)計
        2.2.4 Ci HMGB2a/b全長c DNA克隆
        2.2.5 組織樣品采集
        2.2.6 載體構(gòu)建
        2.2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染、篩選與病毒刺激
        2.2.8 實時熒光定量檢測相應(yīng)基因的表達(dá)
        2.2.9 抗病毒活性試驗
        2.2.10 實驗材料共聚焦熒光顯微鏡檢測亞細(xì)胞定位
        2.2.11 實驗材料活細(xì)胞工作站檢測
        2.2.12 實驗材料蛋白提取和WB試驗
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 全長Ci HMGB2a、Ci HMGB2b的序列分析
        2.3.2 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的組織分布
        2.3.3 GCRV感染后Ci HMGB2a和Ci HMGB2b在脾臟和頭腎組織中的時序表達(dá)
        2.3.4 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b過表達(dá)對Ci TRIF, Ci IPS-1, Ci My D88, Ci IFN-I, Ci Mx1應(yīng)對GCRV刺激的影響
        2.3.5 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的抗病毒活性
        2.3.6 Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的亞細(xì)胞定位
        2.3.7 GCRV感染引起Ci HMGB2a和Ci HMGB2b的核質(zhì)遷移
        2.3.8 活細(xì)胞工作站檢測Ci HMGB2b的核質(zhì)遷移現(xiàn)象
        2.3.9 Ci HMGB2b結(jié)構(gòu)域及其嵌合體的亞細(xì)胞定位
        2.3.10 GCRV刺激對Ci HMGB2b結(jié)構(gòu)域和嵌合體蛋白亞細(xì)胞定位的影響
    2.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]草魚呼腸孤病毒分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 李永剛,曾偉偉,王慶,殷亮,王英英,石存斌,吳淑勤.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(04)
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碩士論文
[1]草魚RIG-I基因應(yīng)對GCRV感染及病毒和細(xì)菌類似物刺激的功能研究[D]. 陳利軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013



本文編號：3540226