馬氏珠母貝是最重要的海水珍珠貝，然而至今還不能從分子水平徹底闡明珍珠的形成。珍珠的形成屬于生物礦化過程（biomineralization），是由一系列基質(zhì)蛋白指導CaCO3結晶的過程，但關于它們在分子水平上的作用機理，多個基質(zhì)蛋白相互之間的關系，與其他物種相關蛋白之間的進化關系，表達水平的調(diào)控，目前的研究成果都無法給與充分的解釋。本實驗主要完成2方面的工作：（1）考察多種環(huán)境因子對馬氏珠母貝一種重要基質(zhì)蛋白基因表達模式的影響；（2）發(fā)現(xiàn)一種新的殼基質(zhì)蛋白，并進一步預測和分析其結構和功能。我們擬通過開展這樣的工作，為研究貝殼和珍珠的形成機理做出初步的研究。利用5’RACE技術，克隆出一種馬氏珠母貝殼基質(zhì)蛋白基因的cDNA全長，通過預測該蛋白質(zhì)序列，發(fā)現(xiàn)其N端含有一段19個氨基酸組成的信號肽，含有典型的Gly-rich區(qū)和C端RKKKY保守序列，同源性分析表明，這是一個新發(fā)現(xiàn)的Shematrin家族成員，和Shematrin-2同屬一個亞家族，故命名為Shematrin-2β。進一步的比對發(fā)現(xiàn)，Shematrin-2β和MSI7有著局部高度匹配的區(qū)域，推測二者在進化上有著特殊的關系。氨基... 

【文章來源】：廣東海洋大學廣東省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Nacrein作用機理模式圖

可能會賦予其與 Ca2+極強的結合能力。N 端和 C 端各一個 Cys 可能也意味著子內(nèi)或者分子間的二硫鍵。N16[10]是經(jīng)過 pH 呈弱堿性的 10%EDTA-4Na 脫鈣處理后獲得的水不溶性（WISM），分子量 16kDa，故因此而得名 N16。該家族首次發(fā)現(xiàn) 3 個成員 131，299 和 299 個氨基酸，信號肽均為 N 端的 23 個氨基酸。RT-PCR 結果顯示外套膜背部區(qū)域（dorsal region）含量極高，而在邊緣區(qū)域（edge region）含量明該蛋白可能參與珍珠層的形成。氨基酸組分分析顯示，含量最高的為 Gsn 和 Cys，除此以外，芳香族氨基酸含量也很高，酸性氨基酸主要聚集在 4 級結構分析顯示，該蛋白含有大量的 β 轉(zhuǎn)角（β-turn），一定量的 β 折疊和旋（α-helix）。體外結晶模擬實驗顯示，游離狀態(tài)下的 N16 能夠抑制結晶過旦結合在 WISM 底質(zhì)上，則能夠誘導珍珠層所特有的文石晶體的結晶。從另，N16 并沒有調(diào)節(jié)碳酸鈣晶體多態(tài)性的作用。盡管 N16 能夠結合 Ca2+，但其其他 Ca2+-binding 蛋白具有特征性的相關結構域，據(jù)推測有 3 種可能性：（區(qū)域可能參與與 Ca2+結合；（2）硫酸鹽側(cè)鏈的作用；（3）Asn-Gly（NG）用。

圖 1.4 Prismalin-14 功能區(qū)示意圖[1unctional domain mode發(fā)現(xiàn)的酸性最強的殼基質(zhì)蛋白，有可Asp 所占比例高達 60.4%，其次為 Gl前對 Aspein 的作用尚不清楚，但其所的 Ca2+結合能力。有眾多的成員，最初在馬氏珠母貝中和黑蝶貝中均發(fā)現(xiàn)大量的 Shematrin- 的氨基酸組成和序列有著顯著地 2 大 員 該 motif 有 著 一 定 的 差 異 ）Y 序列。雖然很多研究人員都認為該，該家族的很多成員也參與珍珠層的沖液抽提，HPLC 純化而獲得的一種要基質(zhì)蛋白，不像其他基質(zhì)蛋白通過抑核位點，通過與離子的相互作用以及對

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Construction of cDNA subtractive library from pearl oyster （Pinctada fucata Gould） with red color shell by SSH[J]. 管云雁,黃良民,何毛賢.  Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2011(03)



本文編號：3493582