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翹嘴鱖(Siniperca chuatsi)生肌調(diào)節(jié)因子MRF4和Myf5的克隆及其表達(dá)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-19 12:09
  生肌調(diào)節(jié)因子(Myogenic regulatory factors,MRFs)家族的成員包含四種基因,分別為MRF4,Myf5,Myogenin和MyoD,它們的功能區(qū)都具有相似的堿性螺旋-環(huán)-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)結(jié)構(gòu)域,是一個(gè)螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)模式(helix-loop-helix motif)及其上游區(qū)域富含堿性氨基酸區(qū)域(basic region)所組成的結(jié)構(gòu)域。生肌調(diào)節(jié)因子蛋白以同源或異源二聚體形式與DNA上E-box序列(CANNTG)結(jié)合而啟動(dòng)下游肌肉相關(guān)基因(如肌球蛋白輕鏈)的轉(zhuǎn)錄。生肌調(diào)節(jié)因子作為一種轉(zhuǎn)錄因子在肌肉的發(fā)育分化過程中發(fā)揮重要作用。本研究克隆獲得了翹嘴鱖生肌調(diào)節(jié)因子MRF4和Myf5基因cDNA全序列,分析了四種生肌調(diào)節(jié)因子基因在翹嘴鱖各種組織器官、胚胎發(fā)育以及胚后生長(zhǎng)發(fā)育階段的表達(dá)譜,研究了短期饑餓后再投喂對(duì)四種生肌調(diào)節(jié)因子的表達(dá)影響,主要結(jié)果如下:1、采用RACE克隆方法,在翹嘴鱖中克隆得到了生肌調(diào)節(jié)因子MRF4和Myf5的全序列,通過氨基酸序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),它們?cè)赽HLH功能區(qū)域都非常保守,該區(qū)域由52氨基酸組成... 

【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:102 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

翹嘴鱖(Siniperca chuatsi)生肌調(diào)節(jié)因子MRF4和Myf5的克隆及其表達(dá)研究


圖1-3生肌調(diào)節(jié)因子的結(jié)構(gòu)特征??Fig.?1-3?The?structure?characteristics?of?myogenic?regulatory?factors??

示意圖,示意圖,生肌調(diào)節(jié)因子,肌肉


?兩個(gè)保守區(qū)?1??圖1-3生肌調(diào)節(jié)因子的結(jié)構(gòu)特征??Fig.?1-3?The?structure?characteristics?of?myogenic?regulatory?factors??MyoD家族蛋白的發(fā)現(xiàn)對(duì)于揭開肌肉發(fā)生過程中細(xì)胞決定和細(xì)胞分化的分子機(jī)理有??著重要作用。MyoD與Myf5兩者主要是在肌肉的前體細(xì)胞中分化為成肌細(xì)胞過程中??起重要作用,而Myogenin與MRF4的作用主要表現(xiàn)在由成肌細(xì)胞的變化向終末骨骼??肌肌纖維的分化過程中[58]。研究表明,生肌調(diào)節(jié)因子在肌肉發(fā)生的過程中起著核心調(diào)控??的作用,許多因子對(duì)生肌調(diào)節(jié)因子的作用起著協(xié)同和拮抗作用。這些因子與生肌調(diào)節(jié)因??子相互作用之后,從而形成一個(gè)非常復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),共同支配調(diào)控肌肉的發(fā)生和生長(zhǎng)??發(fā)育。生肌調(diào)節(jié)因子家族成員通過激活肌肉特異性基因轉(zhuǎn)錄的形式調(diào)控肌肉形成和發(fā)??育。生肌調(diào)節(jié)因子只有與自身或其它bHLH因子形成二聚體后才能與成肌相關(guān)基因結(jié)??8??

翹嘴鱖,菌液,擴(kuò)增片段,基因


?S—?IBs??^■^^■-^53?I??圖2-1總RNA條帶?圖2-2基因組DNA條帶??Fig.?2-1?Examination?of?total?RNA?Fig.?2-2?Examination?of?genomic?DNA??M?1?2?3?4?M?1?2?3?4??C,?■?■??:COO〇P—750?bp—B??乃〇?500?bp—q?V-*1'…??250?bp-^^^^^^9?250bp-l?,??A.編碼區(qū)擴(kuò)增片段?B.啟動(dòng)子和5'擴(kuò)增片段?C.3'擴(kuò)增片段??圖2-3忽嘴敏MRF4和Myf5基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳分析??Fig.?2-3?Electrophoresis?an

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]翹嘴鱖的人工繁殖與胚胎發(fā)育觀察[J]. 劉希良,賓石玉,王開卓,陳敦學(xué),成嘉,張建社,褚武英.  廣西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(02)
[2]鯉Myf-6基因的克隆及其表達(dá)分析[J]. 林亞秋,吉紅,鄭玉才,邱翔,王樹香,劉茂琪.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2010(09)
[3]魚類肌肉組織發(fā)生和分化相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 成嘉,褚武英,張建社.  生命科學(xué)研究. 2010(04)
[4]大眼鱖和斑鱖肌肉營(yíng)養(yǎng)成分分析[J]. 符貴紅,褚武英,成嘉,劉芳,劉臻,張建社.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(34)
[5]豬OLR1基因克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 劉春偉,孫超.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2008(05)
[6]大口黑鱸Myf5基因cDNA和基因組序列的克隆與分析[J]. 郭玉函,白俊杰,勞海華,葉星,羅建仁.  中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2008(04)
[7]大口黑鱸MyoD cDNA的克隆和序列分析[J]. 于凌云,白俊杰,葉星,李勝杰.  生物技術(shù)通報(bào). 2008(S1)
[8]牛MRF4基因的電子克隆與分析[J]. 張力鵬,張東,蔡欣.  中國(guó)牛業(yè)科學(xué). 2007(06)
[9]肌肉發(fā)生相關(guān)基因的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控研究[J]. 張宇,李海,孔建銘,韓登橋,連正興.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(10)
[10]胚胎發(fā)育中骨骼肌組織的形成及調(diào)控[J]. 張江麗.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2007(21)

博士論文
[1]牙鲆成肌因子myogenin和MRF4的研究[D]. 徐芃.中國(guó)科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2007



本文編號(hào):3351385

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