傳染性造血器官壞死病毒（Infectious hematopietic necrosis virus,IHNV）引起的鮭鱒魚類傳染性造血器官壞死�。↖nfectious hematopietic necrosis,IHN）是對鮭鱒魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)危害較為嚴重的一類病毒性疾病,主要危害鮭鱒魚的魚苗及當年魚種,感染后的致死率可以達到100%。IHN已被世界動物衛(wèi)生組織（Office International des Epizooties,OIE）規(guī)定為必須申報的動物疫病,也是我國動物疫病名錄中規(guī)定的二類動物疫病。由于魚種苗的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善,疫苗未能對其進行有效保護,無法解決魚種苗的患病問題。因此,相關治療性藥物的開發(fā)顯得更加迫切。目前,水產(chǎn)上仍未有防治IHNV的專用抗病毒藥物,而本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)天然產(chǎn)物牛蒡子苷元對IHNV具有一定的抑制效果。在此基礎上,本研究以牛蒡子苷元為先導化合物,設計合成了一系列牛蒡子苷元衍生物。通過體外細胞篩選模型評價衍生物的抗病毒活性,結合比較分子力場分析（Comparative molecular field analysis,Co MFA）模型闡述衍生物... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：148 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 文獻綜述
    1.1 傳染性造血器官壞死病簡介
        1.1.1 IHN病原學
        1.1.2 病癥和病理變化
        1.1.3 流行病學特征
        1.1.4 IHN的診斷
        1.1.5 IHN的防治
    1.2 定量構效關系研究進展
        1.2.1 QSAR的發(fā)展歷程
        1.2.2 QSAR的建模方法
        1.2.3 QSAR在藥物化學中的應用
    1.3 牛蒡子苷元研究進展
        1.3.1 抗病毒作用
        1.3.2 抗炎作用
        1.3.3 抗蟲
        1.3.4 抗腫瘤
        1.3.5 其他藥理活性
    1.4 細胞自噬研究進展
        1.4.1 細胞自噬的種類
        1.4.2 細胞自噬的常用檢測方法
        1.4.3 細胞自噬抗病毒的研究進展
    1.5 選題的目的和意義
第二章 牛蒡子苷元衍生物的合成
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試劑與儀器
        2.1.2 牛蒡子苷元衍生物的合成
    2.2 結果與分析
        2.2.1 衍生物1的結構表征
        2.2.2 衍生物2-20的結構表征
        2.2.3 衍生物21-29的結構表征
        2.2.4 衍生物30-34的結構表征
        2.2.5 衍生物35-57的結構表征
    2.3 討論
        2.3.1 反應條件的優(yōu)化
        2.3.2 牛蒡子苷元衍生優(yōu)化在藥物研發(fā)中的應用
    2.4 小結
第三章 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV構效關系研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 細胞和病毒
        3.1.2 試劑和儀器
        3.1.3 細胞培養(yǎng)、病毒滴度檢測及增殖
        3.1.4 牛蒡子苷元衍生物毒性檢測
        3.1.5 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初篩檢測
        3.1.6 牛蒡子苷元衍生物對IHNV增殖的作用
        3.1.7 活性衍生物復篩檢測
        3.1.8 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性3D-QSAR模型的構建
    3.2 結果與分析
        3.2.1 牛蒡子苷元衍生物對EPC細胞最大安全濃度結果
        3.2.2 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初篩檢測結果
        3.2.3 抗IHNV衍生物對病毒增殖的抑制結果
        3.2.4 3D-QSAR數(shù)據(jù)集結果
        3.2.5 分子疊加結果
        3.2.6 CoMFA統(tǒng)計結果
        3.2.7 CoMFA模型等勢圖結果
    3.3 討論
        3.3.1 牛蒡子苷元側鏈羥基上碳鏈長度對衍生物抗IHNV活性作用
        3.3.2 氮雜環(huán)對衍生物抗IHNV活性作用
    3.4 小結
第四章 抗IHNV潛在藥物的設計、合成與活性研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試劑與儀器
        4.1.2 模型指導的牛蒡子苷元衍生物的合成
        4.1.3 細胞、病毒和實驗魚
        4.1.4 新牛蒡子苷元衍生物毒性檢測
        4.1.5 新牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性檢測
        4.1.6 衍生物EOA離體抗IHNV活性復篩檢測
        4.1.7 衍生物EOA對 IHNV誘導的EPC細胞凋亡的作用
        4.1.8 衍生物EOA在體抗病毒活性檢測
    4.2 結果與分析
        4.2.1 新牛蒡子苷元衍生物的結構表征
        4.2.2 新牛蒡子苷元衍生物對EPC細胞毒性結果
        4.2.3 牛蒡子苷元衍生物抗IHNV活性初篩檢測結果
        4.2.4 抗IHNV衍生物對病毒增殖的抑制結果
        4.2.5 活性衍生物復篩結果
        4.2.6 衍生物EOA抑制IHNV誘導的細胞凋亡
        4.2.7 衍生物EOA在體抗IHNV活性
    4.3 討論
        4.3.1 新合成衍生物抗IHNV構效關系
        4.3.2 IHNV感染引起的EPC細胞凋亡
        4.3.3 EOA可能是免疫抑制劑
    4.4 小結
第五章 衍生物EOA抗 IHNV機制研究
    5.1 材料與方法
        5.1.1 細胞和病毒
        5.1.2 藥物
        5.1.3 試劑、抗體和儀器
        5.1.4 超速離心檢測
        5.1.5 衍生物EOA對 IHNV感染過程的作用
        5.1.6 IHNV復制時間的檢測
        5.1.7 自噬激活劑、抑制劑對IHNV的作用
        5.1.8 自噬熒光檢測
        5.1.9 自噬泡的觀察
        5.1.10 EOA對LC3真核表達檢測
        5.1.11 EOA對 JNK通路蛋白的作用
        5.1.12 JNK激活劑、抑制劑對IHNV的作用
        5.1.13 JNK激活劑、抑制劑對JNK通路蛋白的作用
    5.2 結果與分析
        5.2.1 EOA不直接作用于病毒粒子
        5.2.2 EOA作用于病毒復制早期
        5.2.3 自噬激活劑雷帕霉素有抗IHNV活性
        5.2.4 EOA誘導EPC細胞自噬
        5.2.5 JNK激活劑茴香霉素有抗IHNV活性
        5.2.6 衍生物EOA通過激活JNK通路從而誘導細胞自噬
    5.3 討論
        5.3.1 衍生物EOA通過作用宿主細胞從而達到抗病毒效果
        5.3.2 IHNV能夠引起EPC細胞自噬
        5.3.3 JNK信號通路對細胞自噬的調控作用
    5.4 小結
第六章 結論
參考文獻
附錄
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]牛蒡子苷元藥理作用的研究進展[J]. 王哲,王佳賀.  中國醫(yī)藥導報. 2018(32)
[2]傳染性造血器官壞死病核酸疫苗的構建及其抗性基因對環(huán)境細菌抗性的影響[J]. 李淵,趙景壯,劉淼,盧彤巖,任廣明,尹家勝,紀鋒,徐黎明.  中國水產(chǎn)科學. 2018(01)
[3]香菇多糖提取物體外抗IHNV的機制[J]. 任廣明,徐黎明,趙景壯,尹家勝,盧彤巖.  水產(chǎn)學雜志. 2017(05)
[4]QSAR方法的研究進展及其應用[J]. 趙亞玲,黃方.  毒理學雜志. 2017(03)
[5](—)-牛蒡苷元及其對映異構體的不對稱合成新方法[J]. 吳平,徐凱,付瑩,康廷國,竇德強,翟延君.  有機化學. 2016(05)
[6]Survivin基因在牛蒡子苷元增強人肺癌H460細胞化療敏感性中的作用[J]. 王煥勤,王靜.  國際呼吸雜志. 2015 (06)
[7]魚類傳染性造血器官壞死病毒RT-LAMP檢測方法的建立及應用[J]. 劉淼,徐黎明,盧彤巖,趙景壯,曹永生,劉紅柏,尹家勝,張金鳳,馮劍.  中國水產(chǎn)科學. 2014(05)
[8]牛蒡子苷元抗腫瘤血管生成作用研究[J]. 何凡,孫小玲,宿亞柳,孫東,康廷國.  中藥藥理與臨床. 2014(04)
[9]傳染性造血器官壞死病病毒高效RT-PCR檢測方法的建立[J]. 徐黎明,劉紅柏,徐進,盧彤巖.  水生生物學報. 2013(06)
[10]遺傳算法研究進展[J]. 馬永杰,云文霞.  計算機應用研究. 2012(04)

博士論文
[1]牛蒡子苷元作用魚類單殖吸蟲靶標及機制研究[D]. 涂笑.西北農(nóng)林科技大學 2019
[2]宿主細胞對小反芻獸疫病毒天然免疫應答機制的研究[D]. 馬曉霞.中國農(nóng)業(yè)科學院 2018
[3]香豆素類化合物抗鯉春病毒血癥病毒活性及作用機制研究[D]. 劉鐳.西北農(nóng)林科技大學 2018
[4]肉桂醛—氨基酸希夫堿的合成、抑菌活性及定量構效關系研究[D]. 王慧.東北林業(yè)大學 2018
[5]QSAR研究在生命分析化學和環(huán)境化學中的應用[D]. 趙春燕.蘭州大學 2006

碩士論文
[1]東莨菪內酯酚醚衍生物合成及其殺螨活性的構效關系[D]. 賴婷.西南大學 2018
[2]EPC抗氧化應激通路Nrf2/ARE對鯉春病毒的響應[D]. 楊毅.華中農(nóng)業(yè)大學 2014



本文編號：3202783