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鏡鯉鱗被發(fā)育相關(guān)基因(FGF1a/FGFR1a)的克隆與分析

發(fā)布時(shí)間:2021-05-23 20:34
  通過(guò)特異調(diào)取與鱗被發(fā)育的相關(guān)基因,得到了FGF/FGFR、EDA/EDAR、TPT1等基因。從中選擇FGF1a/FGFR1a一對(duì)基因,開展了克隆和分析研究。研究利用中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院的鯉魚EST數(shù)據(jù)庫(kù),設(shè)計(jì)包含CDS全長(zhǎng)的特異引物,得到FGF1a/FGFR1a基因的全長(zhǎng)CDS。分別克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn):1.鏡鯉FGF1a基因全長(zhǎng)的CDS包含444個(gè)堿基,其編碼一個(gè)含有146個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),包含一個(gè)受體結(jié)合位點(diǎn)。2.鏡鯉FGF1a基因編碼的氨基酸序列與其他物種比對(duì),結(jié)果顯示鏡鯉與斑馬魚相似度最高,達(dá)85.03%,而與其親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的人類、老鼠、非洲爪蟾蜍及雞的相似度較低,分別是49.68%、49.68%、44.59%、45.22%,總體看來(lái),不同物種間該基因具有保守性。3.各個(gè)組織RT-PCR顯示:FGF1a基因在鏡鯉的心臟、腎臟、腮、肌肉、肝臟和皮膚中均有表達(dá),且在皮膚中的表達(dá)尤為明顯。4.原位雜交技術(shù)發(fā)現(xiàn):FGF1a基因在魚剛長(zhǎng)鱗片的皮膚上表達(dá)較高,表明該基因可能參與鱗被發(fā)育;同時(shí)在幼魚尾鰭、背鰭和腹鰭中也有特異的高表達(dá)信號(hào),表明該基因也可能參與鰭條的發(fā)育過(guò)程。5.鏡鯉FGFR1a基因全長(zhǎng)... 

【文章來(lái)源】:河南師范大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】:46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
目錄
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 鱗被發(fā)育的研究現(xiàn)狀
    1.2 魚類的鱗
    1.3 鱗被研究的目的
    1.4 鱗被發(fā)育的研究進(jìn)展
        1.4.1 鱗被發(fā)育相關(guān)因子的發(fā)現(xiàn)
        1.4.2 鱗的發(fā)育模式
    1.5 鯉魚中的天然突變體---鏡鯉
    1.6 以斑馬魚作為鱗被發(fā)育研究模式生物的優(yōu)點(diǎn)
第二章 FGF1a 基因的克隆與分析
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料的獲取與管理
        2.1.2 主要儀器設(shè)備及試劑
    2.2 FGF1a 基因的克隆與表達(dá)
        2.2.1 FGF1a 基因的調(diào)取
        2.2.2 FGF1a 基因 CDS 全長(zhǎng)的克隆
        2.2.3 基因序列及進(jìn)化樹分析
        2.2.4 原位雜交檢測(cè)基因在皮膚中的表達(dá)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 FGF1a 基因全長(zhǎng) CDS 的序列分析
        2.3.2 FGF1a 在各組織中的表達(dá)
        2.3.3 FGF1a 基因在皮膚中的表達(dá)
    2.4 討論
第三章 FGFR1a 基因的克隆與分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    3.2 FGFR1a 基因的克隆與表達(dá)
        3.2.1 FGFR1a 基因的調(diào)取
        3.2.2 FGFR1a 基因 CDS 全長(zhǎng)的克隆
        3.2.3 基因序列及進(jìn)化樹分析
        3.2.4 原位雜交檢測(cè)基因在皮膚中的表達(dá)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 FGFR1a 基因全長(zhǎng) CDS 的序列分析
        3.3.2 FGFR1a 在各組織中的表達(dá)
    3.4 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鯉魚Ectodysplasin-A(Eda)基因生物信息學(xué)及功能分析[J]. 王陽(yáng)陽(yáng),蔣麗,程安達(dá),張保勇,馬龍,李恒德,孫效文.  生物技術(shù)通報(bào). 2013(11)
[2]魚類中鱗被發(fā)育的研究進(jìn)展及展望[J]. 蔣麗,張保勇,李恒德,徐鵬,孫效文.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(34)
[3]人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2Ⅲc及其突變型重組腺病毒的獲得和在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 張勇倉(cāng),李麗玲,陳小佳,秦麗,郭淑軍,劉蘭,徐麗慧,洪岸.  生物工程學(xué)報(bào). 2010(03)
[4]總RNA提取方法的比較與分析[J]. 林玲,楊燕凌,何海福,汪世華.  武夷科學(xué). 2009(00)
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本文編號(hào):3202937

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