鳙對茜素絡(luò)合物標(biāo)記的應(yīng)激響應(yīng)及其標(biāo)記放流效果的研究
發(fā)布時間:2021-04-25 19:34
近年來,由于城市河流污染加重,水利設(shè)施的過度興建,違法捕魚日益嚴(yán)重等原因?qū)е卖~類資源大幅度減少,為了恢復(fù)生態(tài)環(huán)境與魚類資源量,增殖放流活動日漸重要。放流效果的監(jiān)測與評估需要有效的回捕數(shù)量,而放流魚類的回捕率與標(biāo)記方法的選擇密切相關(guān)。茜素絡(luò)合物(alizarin complexone,ALC)是一種可用于魚類人工增殖放流的熒光標(biāo)記物質(zhì)。該物質(zhì)對于大規(guī)模的人工增殖放流活動,有價格低廉、標(biāo)記存留時間長等優(yōu)點,為放流效果的評估提供了相對簡便和廉價的檢測手段。但一定濃度的茜素絡(luò)合物浸泡標(biāo)記,對魚體有一定毒性,濃度越大,死亡率通常也會更高,且魚體對ALC的耐受性存在種間差異和個體大小差異,因此,本研究選用不同的標(biāo)記條件對鳙進(jìn)行標(biāo)記,根據(jù)ALC對魚類可能產(chǎn)生的應(yīng)激響應(yīng)及標(biāo)記效果,確定較適宜的標(biāo)記條件,進(jìn)行大規(guī)模標(biāo)記放流,并初步評估灞河城市段流域的增殖放流的效果。主要結(jié)果如下:1、茜素絡(luò)合物適宜作為鳙熒光標(biāo)記的藥物使用,根據(jù)熒光標(biāo)記效果及其應(yīng)激反應(yīng)結(jié)果,發(fā)現(xiàn)對鳙進(jìn)行熒光標(biāo)記較適宜的浸泡濃度是100mg/L,浸泡時間是48h。2、通過對比不同熒光下不同耳石的標(biāo)記效果,發(fā)現(xiàn)微耳石是檢測茜素絡(luò)合物對鳙熒光標(biāo)...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 鳙的生物學(xué)特性與其研究進(jìn)展
1.1.1 鳙的生物學(xué)特征
1.1.2 黃河流域四大家魚的資源現(xiàn)狀
1.2 增殖放流
1.2.1 增殖放流簡介
1.2.2 增殖放流的標(biāo)記方法
1.3 茜素絡(luò)合物
1.4 生物標(biāo)志物
1.4.1 抗氧化指標(biāo)
1.4.2 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)
1.4.3 CYP1A
1.4.4 應(yīng)激蛋白
1.4.5 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)
1.5 研究的目的與意義
第二章 茜素絡(luò)合物對鳙耳石的標(biāo)記效果
2.1 引言
2.2 試驗材料與方法
2.2.1 試驗對象
2.2.2 試驗試劑與儀器
2.2.3 浸泡試驗及采樣
2.2.4 耳石的摘取與觀察
2.2.5 數(shù)據(jù)分析
2.3 試驗結(jié)果與分析
2.3.1 熒光標(biāo)記效果的等級界定
2.3.2 茜素絡(luò)合物的浸泡濃度和鳙的浸泡密度的優(yōu)化及用于熒光檢測的耳石類型的確定
2.3.3 茜素絡(luò)合物的較適浸泡時間的優(yōu)化
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第三章 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的影響
3.1 引言
3.2 試驗材料與方法
3.2.1 試驗對象
3.2.2 試驗試劑與儀器
3.2.3 暴露試驗與采樣
3.2.4 總RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
3.2.5 引物設(shè)計
3.2.6 引物PCR檢測
3.2.7 實時定量PCR
3.2.8 抗氧化酶、GPT、GOT等酶活測定
3.2.9 組織樣本HE染色
3.2.10 數(shù)據(jù)分析
3.3 試驗結(jié)果與分析
3.3.1 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙體長體重的影響
3.3.2 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙CAT酶活力的影響
3.3.3 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙Gpx酶活力的影響
3.3.4 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙SOD酶活力的影響
3.3.5 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙H2O2 含量的影響
3.3.6 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙MDA含量的影響
3.3.7 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙GST酶活力的影響
3.3.8 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙GPT、GOT酶活力的影響
3.3.9 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙肝臟中應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)的影響
3.3.10 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙肌肉中應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)的影響
3.3.11 茜素絡(luò)合物對鳙肝臟組織學(xué)的影響
3.3.12 茜素絡(luò)合物對鳙微耳石標(biāo)記的影響
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第四章 灞河城市段流域鳙增殖放流的初步評價
4.1 引言
4.2 試驗材料與方法
4.2.1 試驗對象
4.2.2 試驗試劑與儀器
4.2.3 放流前鳙的耳石標(biāo)記效果與生長情況跟蹤監(jiān)測檢測
4.2.4 放流地點的選擇
4.2.5 回捕時間及所使用網(wǎng)具
4.2.6 耳石的摘取與觀察
4.2.7 肥滿度及每日相對增長率
4.2.8 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果
4.3.1 放流情況
4.3.2 鳙放流回捕的耳石標(biāo)記情況
4.3.3 鳙放流回捕的生長情況
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
5.1 主要結(jié)論
5.2 創(chuàng)新點
5.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]茜素絡(luò)合物對鯉仔魚耳石標(biāo)記特征研究[J]. 邱晨,姜濤,陳修報,劉洪波,楊健. 水產(chǎn)學(xué)報. 2018(11)
[2]膠南近海金烏賊生長特性、資源分布及增殖放流效果初步評價[J]. 牛超,張秀梅,丁鵬偉,單斌斌. 中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2017(07)
[3]茜素絡(luò)合物對半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)苗種耳石的染色標(biāo)記效果[J]. 徐永江,柳學(xué)周,史寶,翟介明. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2016(06)
[4]抗氧化系統(tǒng)在脂肪分化中的作用研究新進(jìn)展[J]. 孫全貴,王釗,張潔舲,海春旭,王欣. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(24)
[5]滇池放流鰱鳙魚生長情況跟蹤[J]. 張麗媛,安莉,楊劍虹,肖勇. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2015(11)
[6]茜素絡(luò)合物對唐魚耳石標(biāo)記效果以及生長和存活率的影響[J]. 王正鯤,趙天,林小濤,許忠能,孫軍,劉明中. 生態(tài)學(xué)雜志. 2015(01)
[7]長江三峽大壩—葛洲壩江段經(jīng)濟魚類增殖放流效果初步評價[J]. 王軍紅,姜偉,唐錫良,黃濤,陳磊,高勇. 淡水漁業(yè). 2014(06)
[8]蠅蛆抗菌肽對鳙魚生長性能的影響[J]. 丘繼新,劉邦輝,方彰勝,謝駿,王廣軍,余德光. 河北漁業(yè). 2014(08)
[9]基于微衛(wèi)星標(biāo)記對長江中上游胭脂魚增殖放流效果的評估[J]. 成為為,汪登強,危起偉,王成友,杜浩,吳金明,李雷. 中國水產(chǎn)科學(xué). 2014(03)
[10]甲殼類生物增殖放流標(biāo)志技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 高煥,閻斌倫,賴曉芳,蔡生力. 海洋湖沼通報. 2014(01)
博士論文
[1]漁業(yè)增殖放流及開發(fā)策略優(yōu)化[D]. 徐海龍.上海海洋大學(xué) 2015
[2]圓口銅魚應(yīng)激生理機制及緩解策略研究[D]. 趙建華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
碩士論文
[1]銅、鎘及其聯(lián)合暴露對稀有鮈鯽氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的影響[D]. 余秋果.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]雙酚A對稀有鮈鯽氧化應(yīng)激及精巢組織細(xì)胞連接損傷的研究[D]. 陶詩雨.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[3]茜素紅S對中華倒刺鲃幼魚的染色效果以及對其氧化應(yīng)激響應(yīng)[D]. 霍來江.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]山東沿海主要增殖放流種類攝食習(xí)性、回捕率及放流效益分析[D]. 謝周全.上海海洋大學(xué) 2015
[5]不同蛋白源飼料對團(tuán)頭魴生長、消化、抗應(yīng)激及基因表達(dá)的影響[D]. 鄧偉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]山東半島南部海蜇增殖放流效果評價[D]. 張金浩.煙臺大學(xué) 2013
[7]生物絮團(tuán)作為鳙餌料的研究與應(yīng)用[D]. 李朝兵.上海海洋大學(xué) 2012
[8]熒光標(biāo)記斑馬魚稚魚耳石的效果及其對抗氧化酶活力的影響[D]. 許莉佳.西南大學(xué) 2012
[9]褐牙鲆標(biāo)志技術(shù)與增殖放流試驗研究[D]. 劉奇.中國海洋大學(xué) 2009
本文編號:3159967
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 鳙的生物學(xué)特性與其研究進(jìn)展
1.1.1 鳙的生物學(xué)特征
1.1.2 黃河流域四大家魚的資源現(xiàn)狀
1.2 增殖放流
1.2.1 增殖放流簡介
1.2.2 增殖放流的標(biāo)記方法
1.3 茜素絡(luò)合物
1.4 生物標(biāo)志物
1.4.1 抗氧化指標(biāo)
1.4.2 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)
1.4.3 CYP1A
1.4.4 應(yīng)激蛋白
1.4.5 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)
1.5 研究的目的與意義
第二章 茜素絡(luò)合物對鳙耳石的標(biāo)記效果
2.1 引言
2.2 試驗材料與方法
2.2.1 試驗對象
2.2.2 試驗試劑與儀器
2.2.3 浸泡試驗及采樣
2.2.4 耳石的摘取與觀察
2.2.5 數(shù)據(jù)分析
2.3 試驗結(jié)果與分析
2.3.1 熒光標(biāo)記效果的等級界定
2.3.2 茜素絡(luò)合物的浸泡濃度和鳙的浸泡密度的優(yōu)化及用于熒光檢測的耳石類型的確定
2.3.3 茜素絡(luò)合物的較適浸泡時間的優(yōu)化
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第三章 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的影響
3.1 引言
3.2 試驗材料與方法
3.2.1 試驗對象
3.2.2 試驗試劑與儀器
3.2.3 暴露試驗與采樣
3.2.4 總RNA的提取與反轉(zhuǎn)錄
3.2.5 引物設(shè)計
3.2.6 引物PCR檢測
3.2.7 實時定量PCR
3.2.8 抗氧化酶、GPT、GOT等酶活測定
3.2.9 組織樣本HE染色
3.2.10 數(shù)據(jù)分析
3.3 試驗結(jié)果與分析
3.3.1 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙體長體重的影響
3.3.2 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙CAT酶活力的影響
3.3.3 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙Gpx酶活力的影響
3.3.4 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙SOD酶活力的影響
3.3.5 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙H2O2 含量的影響
3.3.6 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙MDA含量的影響
3.3.7 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙GST酶活力的影響
3.3.8 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙GPT、GOT酶活力的影響
3.3.9 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙肝臟中應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)的影響
3.3.10 茜素絡(luò)合物標(biāo)記對鳙肌肉中應(yīng)激相關(guān)基因表達(dá)的影響
3.3.11 茜素絡(luò)合物對鳙肝臟組織學(xué)的影響
3.3.12 茜素絡(luò)合物對鳙微耳石標(biāo)記的影響
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第四章 灞河城市段流域鳙增殖放流的初步評價
4.1 引言
4.2 試驗材料與方法
4.2.1 試驗對象
4.2.2 試驗試劑與儀器
4.2.3 放流前鳙的耳石標(biāo)記效果與生長情況跟蹤監(jiān)測檢測
4.2.4 放流地點的選擇
4.2.5 回捕時間及所使用網(wǎng)具
4.2.6 耳石的摘取與觀察
4.2.7 肥滿度及每日相對增長率
4.2.8 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果
4.3.1 放流情況
4.3.2 鳙放流回捕的耳石標(biāo)記情況
4.3.3 鳙放流回捕的生長情況
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
5.1 主要結(jié)論
5.2 創(chuàng)新點
5.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]茜素絡(luò)合物對鯉仔魚耳石標(biāo)記特征研究[J]. 邱晨,姜濤,陳修報,劉洪波,楊健. 水產(chǎn)學(xué)報. 2018(11)
[2]膠南近海金烏賊生長特性、資源分布及增殖放流效果初步評價[J]. 牛超,張秀梅,丁鵬偉,單斌斌. 中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2017(07)
[3]茜素絡(luò)合物對半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)苗種耳石的染色標(biāo)記效果[J]. 徐永江,柳學(xué)周,史寶,翟介明. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2016(06)
[4]抗氧化系統(tǒng)在脂肪分化中的作用研究新進(jìn)展[J]. 孫全貴,王釗,張潔舲,海春旭,王欣. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(24)
[5]滇池放流鰱鳙魚生長情況跟蹤[J]. 張麗媛,安莉,楊劍虹,肖勇. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2015(11)
[6]茜素絡(luò)合物對唐魚耳石標(biāo)記效果以及生長和存活率的影響[J]. 王正鯤,趙天,林小濤,許忠能,孫軍,劉明中. 生態(tài)學(xué)雜志. 2015(01)
[7]長江三峽大壩—葛洲壩江段經(jīng)濟魚類增殖放流效果初步評價[J]. 王軍紅,姜偉,唐錫良,黃濤,陳磊,高勇. 淡水漁業(yè). 2014(06)
[8]蠅蛆抗菌肽對鳙魚生長性能的影響[J]. 丘繼新,劉邦輝,方彰勝,謝駿,王廣軍,余德光. 河北漁業(yè). 2014(08)
[9]基于微衛(wèi)星標(biāo)記對長江中上游胭脂魚增殖放流效果的評估[J]. 成為為,汪登強,危起偉,王成友,杜浩,吳金明,李雷. 中國水產(chǎn)科學(xué). 2014(03)
[10]甲殼類生物增殖放流標(biāo)志技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 高煥,閻斌倫,賴曉芳,蔡生力. 海洋湖沼通報. 2014(01)
博士論文
[1]漁業(yè)增殖放流及開發(fā)策略優(yōu)化[D]. 徐海龍.上海海洋大學(xué) 2015
[2]圓口銅魚應(yīng)激生理機制及緩解策略研究[D]. 趙建華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
碩士論文
[1]銅、鎘及其聯(lián)合暴露對稀有鮈鯽氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的影響[D]. 余秋果.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]雙酚A對稀有鮈鯽氧化應(yīng)激及精巢組織細(xì)胞連接損傷的研究[D]. 陶詩雨.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[3]茜素紅S對中華倒刺鲃幼魚的染色效果以及對其氧化應(yīng)激響應(yīng)[D]. 霍來江.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]山東沿海主要增殖放流種類攝食習(xí)性、回捕率及放流效益分析[D]. 謝周全.上海海洋大學(xué) 2015
[5]不同蛋白源飼料對團(tuán)頭魴生長、消化、抗應(yīng)激及基因表達(dá)的影響[D]. 鄧偉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]山東半島南部海蜇增殖放流效果評價[D]. 張金浩.煙臺大學(xué) 2013
[7]生物絮團(tuán)作為鳙餌料的研究與應(yīng)用[D]. 李朝兵.上海海洋大學(xué) 2012
[8]熒光標(biāo)記斑馬魚稚魚耳石的效果及其對抗氧化酶活力的影響[D]. 許莉佳.西南大學(xué) 2012
[9]褐牙鲆標(biāo)志技術(shù)與增殖放流試驗研究[D]. 劉奇.中國海洋大學(xué) 2009
本文編號:3159967
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