抗苗勒氏管激素（anti-müllerian hormone,AMH）是一種糖蛋白激素,屬于β-轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）超家族。Amh基因能夠在雄性哺乳動物性腺分化期,抑制繆勒氏管的形成,從而抑制雌性生殖器官的發(fā)育。它作為一個重要的性別分化因子,能夠調(diào)節(jié)生殖細(xì)胞的發(fā)育及分化�？姑缋帐瞎芗に囟褪荏w（anti-müllerian hormone type II receptor,AMHRII）也是轉(zhuǎn)化生長因子β受體超家族的成員,它與配體AMH結(jié)合后,通過細(xì)胞內(nèi)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶催化結(jié)構(gòu)域起作用。為了研究amh和amhrII基因在紅鰭東方鲀各組織和不同發(fā)育時期的表達(dá)情況,進(jìn)而研究amh和amhrII基因在紅鰭東方鲀性別分化和性腺發(fā)育等過程中的作用。本實(shí)驗(yàn)利用實(shí)時熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)分析amh和amhrII基因在紅鰭東方鲀成魚的腎臟、腦、心臟、脾臟、肝臟、精巢和卵巢等不同組織,以及23、30、40、60、80日齡及2齡和3齡,7個發(fā)育時期個體水平上的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:紅鰭東方鲀amh基因在脾臟中的表達(dá)量最高,其次是腎臟、肝臟和精巢,在卵巢和腦中的表達(dá)量較低,并且精巢... 

【文章來源】：大連海洋大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

基于RNA-Seq技術(shù)的研究內(nèi)容Fig1-1ThepipelineofRNA-Seqresearch

2.3.1 紅鰭東方鲀幼魚性別鑒定采用苯酚—氯仿抽提的方法提取不同發(fā)育時期幼魚（23、30、40、60、80日齡）肌肉組織的基因組，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測其質(zhì)量（圖2-1）。以基因組DNA為模板，做PCR擴(kuò)增反應(yīng)，將含有目的基因片段的PCR產(chǎn)物送生工生物工程（上海）股份有限公司測序。根據(jù)測序結(jié)果的峰圖，鑒別幼魚的雌雄，雄性個體SNP位點(diǎn)呈現(xiàn)的是套峰（雜合子），而雌性個體是單峰（純合子），結(jié)果如圖2-2所示。圖2-1：紅鰭東方鲀幼魚肌肉組織基因組1%瓊脂糖電泳圖（M：DL2000，1~8：部分幼魚的基因組）Fig2-1 The agarose gels electrophoresis results for the genome DNA of young Fugu rubripes muscle (M: DL2000; 1~8:DNA of young Fugu rubripes)圖2-2：紅鰭東方鲀幼魚PCR產(chǎn)物測序峰圖（雄性雜合子，雌性純合子）Fig2-1 The PCR product sequencing peak figures of young Fugu rubripes (Males are heterozygous, females arehomozygous)

用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測其質(zhì)量（圖2-1）。以基因組DNA為模板，做PCR擴(kuò)增反應(yīng)，將含有目的基因片段的PCR產(chǎn)物送生工生物工程（上海）股份有限公司測序。根據(jù)測序結(jié)果的峰圖，鑒別幼魚的雌雄，雄性個體SNP位點(diǎn)呈現(xiàn)的是套峰（雜合子），而雌性個體是單峰（純合子），結(jié)果如圖2-2所示。圖2-1：紅鰭東方鲀幼魚肌肉組織基因組1%瓊脂糖電泳圖（M：DL2000，1~8：部分幼魚的基因組）Fig2-1 The agarose gels electrophoresis results for the genome DNA of young Fugu rubripes muscle (M: DL2000; 1~8:DNA of young Fugu rubripes)圖2-2：紅鰭東方鲀幼魚PCR產(chǎn)物測序峰圖（雄性雜合子，雌性純合子）Fig2-1 The PCR product sequencing peak figures of young Fugu rubripes (Males are heterozygous, females arehomozygous)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]斑馬魚CYP11a1基因在不同性腺發(fā)育時期的表達(dá)[J]. 陳孝紅,仇雪梅,郝薇薇,王秀利.  大連海洋大學(xué)學(xué)報. 2015(01)
[2]低溫誘導(dǎo)紅鰭東方鲀雄性化及性腺分化的組織學(xué)觀察[J]. 周賀,李佳奇,馬海艷,李雅娟,姜志強(qiáng),李霞,徐雯,江振華.  大連海洋大學(xué)學(xué)報. 2015(01)
[3]Foxn4:A multi-faceted transcriptional regulator of cell fates in vertebrate development[J]. XIANG MengQing,LI ShengGuo.  Science China（Life Sciences）. 2013(11)
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碩士論文
[1]Amhy/Amh及其受體AmhrⅡ?qū)δ崃_羅非魚雄性性別的決定作用[D]. 趙九娥.西南大學(xué) 2015
[2]基于RNA-Seq技術(shù)的紅鰭東方鲀鰓和鰾轉(zhuǎn)錄組的初步研究[D]. 崔軍.大連海洋大學(xué) 2013
[3]尼羅羅非魚性腺發(fā)育過程的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究及Fox家族生物信息學(xué)分析[D]. 袁靜.西南大學(xué) 2013
[4]彭澤鯽amh、cyp19a1a和dax1的克隆及甲基睪丸酮對其在幼魚中的表達(dá)影響[D]. 李蒙.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[5]豬CART和AgRP基因啟動子的克隆與活性分析[D]. 王濤.華南理工大學(xué) 2011
[6]若干大黃魚性腺發(fā)育相關(guān)基因的克隆與表達(dá)[D]. 周鵬.集美大學(xué) 2009



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