原始生殖細(xì)胞（Primordial germ cells,PGCs）經(jīng)過遷移進(jìn)入生殖腺原基后,經(jīng)過增殖、分化為精原細(xì)胞和卵原細(xì)胞。魚類生殖細(xì)胞在性別分化過程中起到了重要作用,以尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）作為研究魚類性別決定與分化的實驗動物,研究生殖細(xì)胞有助于從另一角度闡明其性別決定與分化的機(jī)制。dnd（dead end）同vasa基因一樣是生殖細(xì)胞的標(biāo)記基因,對于脊椎動物PGCs的發(fā)育和配子生成有重要作用。在PGCs分化為卵原細(xì)胞和精原細(xì)胞之后需進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生卵子和精子,然而在不同物種,雌、雄生殖細(xì)胞減數(shù)分裂起始時間是不同的,這一過程對其生殖發(fā)育有著重要的作用。多年的研究證實了視黃酸（Retinoic acid,RA）信號通路在減數(shù)分裂起始中有重要作用,Stra8（Stimulated by retinoic acid gene8）是這一信號通路中的關(guān)鍵因子。然而這一機(jī)制僅在四足動物中如哺乳類、鳥類和兩棲類得到證實,RA信號通路在硬骨魚類生殖細(xì)胞減數(shù)分裂起始過程中的作用還有待闡明。本實驗室首次報道南方鲇中存在Stra8并證實RA可能參與硬骨魚類減數(shù)分裂起... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1 魚類的性別決定和性別分化概述
    2 魚類生殖細(xì)胞的發(fā)育
        2.1 魚類PGCs
        2.2 魚類PGCs在性別分化過程中作用
    3 生殖細(xì)胞分子標(biāo)記概述
    4 生殖細(xì)胞減數(shù)分裂的調(diào)控機(jī)制概述
        4.1 RA起始減數(shù)分裂的研究進(jìn)展
        4.2 RA合成酶——Aldh1a家族
    5 科學(xué)問題的提出和本研究的目的意義
第2章 dnd在尼羅羅非魚生殖細(xì)胞發(fā)育中的功能研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 試劑、耗材和儀器
        2.3 有關(guān)試劑的配制
        2.4 氨基酸序列比對分析
        2.5 羅非魚dnd性腺轉(zhuǎn)錄組分析
        2.6 羅非魚dnd組織表達(dá)模式分析
        2.7 羅非魚dnd CRISPR/Cas9敲除
    3 結(jié)果與分析
        3.1 dnd氨基酸同源性分析
        3.2 羅非魚dnd性腺轉(zhuǎn)錄組分析
        3.3 dnd在羅非魚成魚不同組織表達(dá)模式分析
        3.4 羅非魚dnd CRISPR/Cas9敲除靶位點的選擇及突變檢測
        3.5 dnd敲除影響性腺生殖細(xì)胞的正常發(fā)育
        3.6 dnd敲除魚的免疫組織化學(xué)分析
    4 討論
第3章 RA合成酶aldh1a2在尼羅羅非魚生殖細(xì)胞發(fā)育中的調(diào)控研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 藥物處理
        2.3 羅非魚aldh1a2多克隆抗體免疫組織化學(xué)檢測
        2.4 DEAB處理魚的取材及組織學(xué)和免疫組織化學(xué)檢測
        2.5 羅非魚aldh1a2 CRISPR/Cas9敲除
    3 結(jié)果與分析
        3.1 羅非魚aldh1a2在XX和XY性腺發(fā)育過程中表達(dá)
        3.2 羅非魚aldh1a2 CRISPR/Cas9敲除靶位點的選擇及突變檢測
        3.3 DEAB處理魚和aldh1a2敲除魚卵巢發(fā)育組織學(xué)觀察
        3.4 生殖細(xì)胞缺失時Aldh1a2表達(dá)情況
    4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表論文情況
在讀期間參加科研情況



本文編號：3062619