基于轉(zhuǎn)錄組的泥東風螺EST-SSR標記開發(fā)及遺傳多樣性分析
發(fā)布時間:2021-03-04 07:21
泥東風螺(Babylonia lutosa)俗稱黃螺,在中國主要分布于海南、廣西、廣東和福建等地,為廣鹽性、廣溫性貝類。因其肉質(zhì)鮮美,營養(yǎng)豐富,近幾年已成為國內(nèi)十分暢銷的優(yōu)質(zhì)海產(chǎn)貝類,并以其生長快、價格高等優(yōu)點,已開發(fā)成海水養(yǎng)殖新種類。但因環(huán)境變化及過度捕撈使野生泥東風螺資源銳減,我國農(nóng)業(yè)部設立公益性科研專項項目以期恢復和保護泥東風螺資源。本研究利用新一代高通量測序技術獲得泥東風螺的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),從中發(fā)掘EST-SSR標記及含有EST-SSR序列的生長相關基因,并測定了泥東風螺線粒體全基因組序列;然后利用開發(fā)的EST-SSR標記和線粒體標記基因測序?qū)σ吧后w進行遺傳結構與遺傳多樣性分析,以開發(fā)的標記對人工養(yǎng)殖Fl代群體進行生長性狀與EST-SSR標記的關聯(lián)分析,尋找生長相關的分子標記,以期為泥東風螺種質(zhì)資源保護、人工增殖效果評估和分子標記輔助選育提供參考。主要研究結果如下研究結果如下:1、基于高通量測序的泥東風螺轉(zhuǎn)錄組分析利用高通量測序技術從泥東風螺腹足和肝胰腺混合RNA樣本中獲得119,113條高質(zhì)量Unigenes,篩選得到13,962個EST-SSR,共有109,359個Unige...
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省
【文章頁數(shù)】:97 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
轉(zhuǎn)錄組測序流程
細胞組分(cellular?component)、生物學過程進(biological?process)行分類,通過GO注釋’??對可W對比上的基因進行總的功能分類分析。KEGG分析通過網(wǎng)上的KEGG自動注釋??服務(KAAS)來實現(xiàn)[121]。對泥東風螺的轉(zhuǎn)錄組生物信息分析流程見圖2-2。??19??
?\?J??圖2-2轉(zhuǎn)錄組生物信息分析流程??Fig.2-2?The?process?of?transcrip化me?information?analysis??2結果與分析??2.1?RNA提取和轉(zhuǎn)錄組文庫的構建??獲得高質(zhì)量的RNA是構建高質(zhì)量454文庫的重要前提。試驗提取的3只泥東風螺??的腹足和肝族腺組織總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測。瓊脂糖凝??膠電泳檢測可見H條明顯條帶,紫外分光光度計OD260/280比值在1.8?2.2之間。結??果表明,RNA提取質(zhì)量較好,總RNA有較好的完整性,無明顯降解,蛋白質(zhì)和DNA??污染很少,可W用于下步試驗。??2.2序列拼接和分析??對構建的cDNA文庫的進行高通量測序共獲得:測序共獲得5,015,236,064?bp數(shù)??據(jù)量,GC?含量為?50.54%其中?reads?數(shù)?24,829,460?條,CycleQ20?達到?100%;denovo?組??裝后共獲得119,113條Unigenes,其中長度在1?kb?(^上Unigenes有16,877?條,N50??20??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]泥東風螺4個群體遺傳多樣性的AFLP分析[J]. 秦溱,王曉清,曾志南,朱丹麗,熊鋼,巫旗生,寧岳. 湖南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2014(03)
[2]西南大西洋拉氏南美南極魚耳石形態(tài)的多樣性[J]. 張鳳俠,劉巖,張秀梅. 中國水產(chǎn)科學. 2014(03)
[3]菲律賓蛤仔ESTSSR標記與生長性狀的相關分析[J]. 牛泓博,聶鴻濤,朱德鵬,楊鳳,閆喜武. 生態(tài)學報. 2015(06)
[4]中國志留紀魚化石及含魚地層對比研究綜述[J]. 趙文金,朱敏. 地學前緣. 2014(02)
[5]中華鱉(Pelodiscus sinensis)EST-SSR標記與生長性狀相關性分析[J]. 張群英,黃鶴忠,袁文成,李文龍,雍福和,徐雪英,張平. 海洋與湖沼. 2013(06)
[6]幾種天然餌料對泥東風螺稚螺生長、存活的影響[J]. 鄭雅友,曾志南,劉波,林國清,李正良,李雷斌,林丹. 福建水產(chǎn). 2013(04)
[7]5個紅鰭東方鲀養(yǎng)殖群體微衛(wèi)星DNA遺傳多態(tài)性分析[J]. 陸麗君,馬愛軍,王新安,岳亮,孟雪松,翟介明,譚林濤,侯仕營. 漁業(yè)科學進展. 2013(04)
[8]團頭魴EST-SSR在厚頜魴中的跨種擴增及雜交F1的鑒定[J]. 易少奎,高澤霞,羅偉,段曉克,李艷和,王衛(wèi)民. 水產(chǎn)學報. 2013(07)
[9]錦鯉TYR基因克隆、序列分析及在不同組織中表達[J]. 熊鋼,王宇,王曉清,劉臻,馬曉,張建國,卿愛東. 生物技術. 2013(03)
[10]鯧亞目魚類線粒體16S rRNA基因序列變異及其分子系統(tǒng)進化關系[J]. 吳仁協(xié),李超,劉靜. 水產(chǎn)學報. 2013(01)
博士論文
[1]三角魴轉(zhuǎn)錄組分析與不同地理種群遺傳多樣性研究[D]. 聶竹蘭.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]感病草魚脾臟的比較轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 許寶紅.湖南農(nóng)業(yè)大學 2012
[3]FGFR1信號通路在小鼠骨骼發(fā)育和重建中的作用[D]. 李福兵.第三軍醫(yī)大學 2008
碩士論文
[1]雞TBC1D1基因的SNPs及其與屠宰性狀的關聯(lián)性研究[D]. 彭星.四川農(nóng)業(yè)大學 2013
[2]海灣扇貝分子標記的研究及應用[D]. 孫博.中國科學院研究生院(海洋研究所) 2003
本文編號:3062800
【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省
【文章頁數(shù)】:97 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
轉(zhuǎn)錄組測序流程
細胞組分(cellular?component)、生物學過程進(biological?process)行分類,通過GO注釋’??對可W對比上的基因進行總的功能分類分析。KEGG分析通過網(wǎng)上的KEGG自動注釋??服務(KAAS)來實現(xiàn)[121]。對泥東風螺的轉(zhuǎn)錄組生物信息分析流程見圖2-2。??19??
?\?J??圖2-2轉(zhuǎn)錄組生物信息分析流程??Fig.2-2?The?process?of?transcrip化me?information?analysis??2結果與分析??2.1?RNA提取和轉(zhuǎn)錄組文庫的構建??獲得高質(zhì)量的RNA是構建高質(zhì)量454文庫的重要前提。試驗提取的3只泥東風螺??的腹足和肝族腺組織總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測。瓊脂糖凝??膠電泳檢測可見H條明顯條帶,紫外分光光度計OD260/280比值在1.8?2.2之間。結??果表明,RNA提取質(zhì)量較好,總RNA有較好的完整性,無明顯降解,蛋白質(zhì)和DNA??污染很少,可W用于下步試驗。??2.2序列拼接和分析??對構建的cDNA文庫的進行高通量測序共獲得:測序共獲得5,015,236,064?bp數(shù)??據(jù)量,GC?含量為?50.54%其中?reads?數(shù)?24,829,460?條,CycleQ20?達到?100%;denovo?組??裝后共獲得119,113條Unigenes,其中長度在1?kb?(^上Unigenes有16,877?條,N50??20??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]泥東風螺4個群體遺傳多樣性的AFLP分析[J]. 秦溱,王曉清,曾志南,朱丹麗,熊鋼,巫旗生,寧岳. 湖南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版). 2014(03)
[2]西南大西洋拉氏南美南極魚耳石形態(tài)的多樣性[J]. 張鳳俠,劉巖,張秀梅. 中國水產(chǎn)科學. 2014(03)
[3]菲律賓蛤仔ESTSSR標記與生長性狀的相關分析[J]. 牛泓博,聶鴻濤,朱德鵬,楊鳳,閆喜武. 生態(tài)學報. 2015(06)
[4]中國志留紀魚化石及含魚地層對比研究綜述[J]. 趙文金,朱敏. 地學前緣. 2014(02)
[5]中華鱉(Pelodiscus sinensis)EST-SSR標記與生長性狀相關性分析[J]. 張群英,黃鶴忠,袁文成,李文龍,雍福和,徐雪英,張平. 海洋與湖沼. 2013(06)
[6]幾種天然餌料對泥東風螺稚螺生長、存活的影響[J]. 鄭雅友,曾志南,劉波,林國清,李正良,李雷斌,林丹. 福建水產(chǎn). 2013(04)
[7]5個紅鰭東方鲀養(yǎng)殖群體微衛(wèi)星DNA遺傳多態(tài)性分析[J]. 陸麗君,馬愛軍,王新安,岳亮,孟雪松,翟介明,譚林濤,侯仕營. 漁業(yè)科學進展. 2013(04)
[8]團頭魴EST-SSR在厚頜魴中的跨種擴增及雜交F1的鑒定[J]. 易少奎,高澤霞,羅偉,段曉克,李艷和,王衛(wèi)民. 水產(chǎn)學報. 2013(07)
[9]錦鯉TYR基因克隆、序列分析及在不同組織中表達[J]. 熊鋼,王宇,王曉清,劉臻,馬曉,張建國,卿愛東. 生物技術. 2013(03)
[10]鯧亞目魚類線粒體16S rRNA基因序列變異及其分子系統(tǒng)進化關系[J]. 吳仁協(xié),李超,劉靜. 水產(chǎn)學報. 2013(01)
博士論文
[1]三角魴轉(zhuǎn)錄組分析與不同地理種群遺傳多樣性研究[D]. 聶竹蘭.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]感病草魚脾臟的比較轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 許寶紅.湖南農(nóng)業(yè)大學 2012
[3]FGFR1信號通路在小鼠骨骼發(fā)育和重建中的作用[D]. 李福兵.第三軍醫(yī)大學 2008
碩士論文
[1]雞TBC1D1基因的SNPs及其與屠宰性狀的關聯(lián)性研究[D]. 彭星.四川農(nóng)業(yè)大學 2013
[2]海灣扇貝分子標記的研究及應用[D]. 孫博.中國科學院研究生院(海洋研究所) 2003
本文編號:3062800
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