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日本沼蝦α2-巨球蛋白和低密度脂蛋白相關(guān)受體-1基因的分子克隆及其功能分析

發(fā)布時(shí)間:2020-12-18 18:28
  氨氮是水產(chǎn)養(yǎng)殖中最重要的環(huán)境脅迫因子之一,能夠嚴(yán)重影響水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育與生理健康。α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,A2M)是一種廣譜性蛋白酶抑制劑,在凝血補(bǔ)體系統(tǒng)、酚氧化酶原激活系統(tǒng)、細(xì)胞遷移、抗環(huán)境脅迫等方面都發(fā)揮著關(guān)鍵調(diào)控作用。低密度脂蛋白相關(guān)受體-1基因(Low-density lipoprotein receptor-related protein,LRP1)是低密度脂蛋白受體基因家族的一員,在誘導(dǎo)脂蛋白的攝取、血管損傷、細(xì)胞生長(zhǎng)等方面具有重要作用,同時(shí)可以作為活化的α2-巨球蛋白、組織纖溶酶原激活劑等多種配體的細(xì)胞信號(hào)受體。本研究以我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖蝦類日本沼蝦(Macrobrachium nipponense)為實(shí)驗(yàn)材料,采用組織切片、RACE克隆、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western blot等技術(shù),對(duì)高濃度氨氮脅迫下蝦的免疫組織變化和A2M、LRP1基因進(jìn)行了分子克隆和基因表達(dá)與功能檢測(cè)等。主要研究結(jié)果如下:在實(shí)驗(yàn)室條件下,對(duì)日本沼蝦進(jìn)行氨氮攻毒試驗(yàn)顯示其半致死濃度LD50(48h)為96.8mg/L。組織學(xué)分析顯示,氨氮脅迫對(duì)日本... 

【文章來(lái)源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

日本沼蝦α2-巨球蛋白和低密度脂蛋白相關(guān)受體-1基因的分子克隆及其功能分析


RNA1%瓊脂糖凝膠電泳圖

青蝦,高通量,全序列,軟件處理


圖 3-2 RNA 1% 瓊脂糖凝膠電泳圖Fig. 3-2 The RNA detected by 1% agarose gel electrophoresis根據(jù)實(shí)驗(yàn)室高通量測(cè)序結(jié)果(孫健 2017)設(shè)計(jì)引物 A2M/LRP1-F、A2M/LR增得到基因的中間序列,通過(guò) 5’RACE 擴(kuò)增獲得 5’UTR(圖 3-3)通過(guò) 3’R3’UTR(圖 3-4),最后通過(guò) Chroma 和 DNAMAN 8.0 等軟件處理拼接后得cDNA 全序列(圖 3-5、圖 3-6)。

青蝦,基因,高通量,全序列


圖 3-2 RNA 1% 瓊脂糖凝膠電泳圖Fig. 3-2 The RNA detected by 1% agarose gel electrophoresis根據(jù)實(shí)驗(yàn)室高通量測(cè)序結(jié)果(孫健 2017)設(shè)計(jì)引物 A2M/LRP1-F、A2M/LR增得到基因的中間序列,通過(guò) 5’RACE 擴(kuò)增獲得 5’UTR(圖 3-3)通過(guò) 3’R3’UTR(圖 3-4),最后通過(guò) Chroma 和 DNAMAN 8.0 等軟件處理拼接后得cDNA 全序列(圖 3-5、圖 3-6)。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Roles of lipoprotein receptors in the entry of hepatitis C virus[J]. Jingya Lyu,Hitomi Imachi,Kensaku Fukunaga,Takuo Yoshimoto,Huanxiang Zhang,Koji Murao.  World Journal of Hepatology. 2015(24)
[2]養(yǎng)蝦池氨氮的科學(xué)認(rèn)識(shí)與調(diào)控[J]. 張水波.  水產(chǎn)養(yǎng)殖. 2013(11)
[3]Sleeve gastrectomy prevents lipoprotein receptor-1 expression in aortas of obese rats[J]. Jie Bai, Yong Wang, Yuan Liu, Dong-Hua Geng, Jin-Gang Liu, Department of General Surgery, China Medical University and the affiliated Shengjing Hospital, Shenyang 110004, Liaoning Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2011(32)

碩士論文
[1]日本沼蝦抗氨氮脅迫轉(zhuǎn)錄組與代謝組分析[D]. 孫健.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017



本文編號(hào):2924400

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