鯉皰疹病毒3型囊膜蛋白ORF136、ORF25的篩選和鑒定
發(fā)布時間:2020-12-14 20:10
鯉皰疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,Cy HV-3),又稱為錦鯉皰疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),是引起鯉魚、錦鯉及其變種高度傳染性錦鯉皰疹病毒。↘oi herpesvirus disease,KHVD)的病原。KHVD自1997年首次報道以來,在全球多個國家傳播、流行,范圍覆蓋亞洲、歐洲、北美及非洲多個國家地區(qū),給鯉魚及錦鯉養(yǎng)殖業(yè)造成無可估量的經(jīng)濟(jì)損失。Cy HV-3隸屬于皰疹病毒目,異皰疹病毒科,鯉皰疹病毒屬,是具有囊膜包裹的雙鏈DNA病毒。病毒的囊膜蛋白在識別宿主細(xì)胞受體介導(dǎo)病毒入侵等方面具有關(guān)鍵性的作用,而關(guān)于Cy HV-3囊膜蛋白的研究卻非常有限。本論文將對Cy HV-3純化病毒粒子和囊膜組分進(jìn)行蛋白質(zhì)組分析,篩選病毒可能存在的囊膜蛋白,在此基礎(chǔ)上對推測的囊膜蛋白ORF136和ORF25進(jìn)行定位研究,試驗證實ORF136和ORF25為Cy HV-3的囊膜蛋白,為后續(xù)的蛋白功能研究奠定基礎(chǔ)。全文內(nèi)容分為以下三個部分:1、Cy HV-3增殖與純化:分別將Cy HV-3 GZ1301分離株和E分離株感染敏感細(xì)胞系鯉魚腦細(xì)胞(Common...
【文章來源】:上海海洋大學(xué)上海市
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
1 CyHV-3分類地位
2 CyHV-3理化特性
3 CyHV-3基因組與轉(zhuǎn)錄組
4 CyHV-3蛋白質(zhì)組
5 KHVD流行病學(xué)
6 KHVD診斷與檢測
7 KHVD防治措施
8 本研究目的與意義
第一章 鯉皰疹病毒3型增殖與純化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與CyHV-3感染
2.2 CyHV-3純化與電鏡觀察
2.3 SDS-PAGE
2.4 免疫印跡分析
3 討論
4 小結(jié)
第二章 鯉皰疹病毒3型蛋白質(zhì)組分析
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
3 討論
3.1 CyHV-3病毒蛋白
3.2 與CyHV-3相關(guān)的宿主蛋白
4 小結(jié)
第三章 鯉皰疹病毒3型囊膜蛋白ORF136和ORF25的鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 ORF136蛋白鑒定
2.2 ORF25蛋白鑒定
3 討論
3.1 ORF136蛋白
3.2 ORF25蛋白
4 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
碩士期間主要成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測牛腸道病毒抗原方法的建立及流行病學(xué)調(diào)查[J]. 邢澤黎,王新平,朱利塞,魯海冰,郭昌明,蓋小春,王明月. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2016(04)
[2]一種基于Ⅱ型鯉皰疹病毒衣殼蛋白72的免疫學(xué)檢測方法[J]. 孔善云,姜有聲,許丹,謝駿,呂利群. 中國水產(chǎn)科學(xué). 2016(02)
[3]錦鯉皰疹病毒GZ1301株的分離與鑒定[J]. 李瑩瑩,王慶,曾偉偉,潘厚軍,王英英,劉春,梁紅茹,石存斌,吳淑勤. 水產(chǎn)學(xué)報. 2014(08)
[4]傳染性胰壞死病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張琳琳,連科迅,張英,蔣燁,姜艷萍,崔文,喬薪瑗,唐麗杰,李一經(jīng),劉敏. 淡水漁業(yè). 2014(04)
[5]羅非魚無乳鏈球菌雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張新艷. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(06)
[6]一例冰下低溫爆發(fā)的錦鯉皰疹病毒病的鑒定[J]. 邢程,王好,周井祥,王友超. 水產(chǎn)學(xué)雜志. 2014(01)
[7]豬傳染性胃腸炎病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 屈月,葛俊偉,唐麗杰,喬薪瑗,姜艷平,尹光昕,李一經(jīng). 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2013(05)
[8]一株錦鯉皰疹病毒的分離與鑒定[J]. 朱霞,李新偉,王好,呂文亮,周井祥. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2011(05)
[9]錦鯉皰疹病毒的檢測與人工感染試驗[J]. 周永燦,袁軍法,任武澤,劉葒,江育林,石正麗. 武漢大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版). 2005(S2)
[10]進(jìn)口錦鯉暴發(fā)病病原的nested-PCR鑒定[J]. 劉葒,史秀杰,高隆英,江育林. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2002(05)
碩士論文
[1]錦鯉皰疹病毒抗體血清學(xué)檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 劉亭岐.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號:2916954
【文章來源】:上海海洋大學(xué)上海市
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
1 CyHV-3分類地位
2 CyHV-3理化特性
3 CyHV-3基因組與轉(zhuǎn)錄組
4 CyHV-3蛋白質(zhì)組
5 KHVD流行病學(xué)
6 KHVD診斷與檢測
7 KHVD防治措施
8 本研究目的與意義
第一章 鯉皰疹病毒3型增殖與純化
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與CyHV-3感染
2.2 CyHV-3純化與電鏡觀察
2.3 SDS-PAGE
2.4 免疫印跡分析
3 討論
4 小結(jié)
第二章 鯉皰疹病毒3型蛋白質(zhì)組分析
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
3 討論
3.1 CyHV-3病毒蛋白
3.2 與CyHV-3相關(guān)的宿主蛋白
4 小結(jié)
第三章 鯉皰疹病毒3型囊膜蛋白ORF136和ORF25的鑒定
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果與分析
2.1 ORF136蛋白鑒定
2.2 ORF25蛋白鑒定
3 討論
3.1 ORF136蛋白
3.2 ORF25蛋白
4 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
碩士期間主要成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測牛腸道病毒抗原方法的建立及流行病學(xué)調(diào)查[J]. 邢澤黎,王新平,朱利塞,魯海冰,郭昌明,蓋小春,王明月. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2016(04)
[2]一種基于Ⅱ型鯉皰疹病毒衣殼蛋白72的免疫學(xué)檢測方法[J]. 孔善云,姜有聲,許丹,謝駿,呂利群. 中國水產(chǎn)科學(xué). 2016(02)
[3]錦鯉皰疹病毒GZ1301株的分離與鑒定[J]. 李瑩瑩,王慶,曾偉偉,潘厚軍,王英英,劉春,梁紅茹,石存斌,吳淑勤. 水產(chǎn)學(xué)報. 2014(08)
[4]傳染性胰壞死病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張琳琳,連科迅,張英,蔣燁,姜艷萍,崔文,喬薪瑗,唐麗杰,李一經(jīng),劉敏. 淡水漁業(yè). 2014(04)
[5]羅非魚無乳鏈球菌雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 張新艷. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(06)
[6]一例冰下低溫爆發(fā)的錦鯉皰疹病毒病的鑒定[J]. 邢程,王好,周井祥,王友超. 水產(chǎn)學(xué)雜志. 2014(01)
[7]豬傳染性胃腸炎病毒雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J]. 屈月,葛俊偉,唐麗杰,喬薪瑗,姜艷平,尹光昕,李一經(jīng). 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2013(05)
[8]一株錦鯉皰疹病毒的分離與鑒定[J]. 朱霞,李新偉,王好,呂文亮,周井祥. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2011(05)
[9]錦鯉皰疹病毒的檢測與人工感染試驗[J]. 周永燦,袁軍法,任武澤,劉葒,江育林,石正麗. 武漢大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版). 2005(S2)
[10]進(jìn)口錦鯉暴發(fā)病病原的nested-PCR鑒定[J]. 劉葒,史秀杰,高隆英,江育林. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2002(05)
碩士論文
[1]錦鯉皰疹病毒抗體血清學(xué)檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 劉亭岐.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號:2916954
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